L esame emocromocitometrico in pediatria Principi generali e valori di normalità

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1 FIMPAGGIORNA maggio 2005 L esame emocromocitometrico in pediatria Principi generali e valori di normalità Luciano Pinto Dipartimento di Pediatria A.O.R.N. Santobono-Pausilipon

2 Ma come è pallido. E sicuramente anemico.

3 Vi è qualcosa di meglio dell occhio dei genitori per fare diagnosi di anemia? I dati del laboratorio!

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5 La valutazione dei parametri forniti dai moderni contaglobuli è la prima tappa di ogni diagnosi ematologica

6 Dall emocromo vogliamo ricavare informazioni Sui globuli rossi Sui leucociti Sulle piastrine

7 Parametri eritrocitari rilevabili nell emocromo RBCConta totale degli eritrociti HGBEmoglobina HtEmatocrito MCVVolume Corpuscolare Medio MCHContenuto Emoglobinico Medio MCHCConcentrazione Corpusc. Emoglobinica Media

8 Ulteriori parametri eritrocitari forniti dai moderni contaglobuli RDW Indice di distribuzione del volume degli eritrociti HDW Indice di distribuzione della concentrazione dell Hb Ret CHr Conta dei reticolociti Contenuto emoglobinico dei reticolociti

9 La valutazione dei parametri ematologici richiede la preventiva conoscenza dei valori normali per l età e per il sesso

10 Si è anemici quando l Hb è < 2 DS al valore medio per l età e per il sesso

11 Hb nei primi 6 mesi di vita DS Media - 2 DS giorni

12 Hb gr/dl Hb nel 1 anno di vita Età in mesi + 2 DS Media -2 DS

13 MCV nel 1 anno di vita MCV ftl Età in mesi + 2 DS Media -2 DS

14 E dopo il 1 anno?

15 Dallman e Siimes, J. Pediatr. 1979

16 NHANES III

17 16 Femmine Percentili di Dalmann iiaaaaaaaaaaaaaaa Età in anni Percentili NHANES III 2005

18 95 Femmine

19 Red Cell Distribution Width (RDW) L RDW è un indice di variazione del volume della popolazione eritrocitaria = (deviazione standard del volume eritrocitario MCV) x 100 N di emazie volume emazie Sangue normale reticolociti RDW = 14.8 RDW = 27.0 Marcata reticolocitosi

20 % RDW : percentili da 1 a 16 anni Età in anni NHANES III

21 Reticolociti

22 Il colorante penetra attraverso la membrana cellulare, colorando l'rna nei reticolociti e il DNA/RNA nelle cellule nucleate. RBC Ret Plt NRBC WBC I reticolociti sono separati dagli eritrociti maturi in funzione del differente contenuto di RNA e dalle cellule nucleate in funzione del differente contenuto di DNA/RNA.

23 Se i reticolociti vengono calcolati in percentuale, è indispensabile trasformare tale valore in numero assoluto

24 Un soggetto normale, con di emazie, ha in media l 1% di reticolociti (= reticolociti). Questo valore corrisponde alla quota che ogni giorno il midollo produce, per mantenere integro il patrimonio eritrocitario (1 emazia vive gg)

25 Se necessario, il midollo può incrementare di 6 8 volte la produzione di reticolociti

26 Paz. A eritrociti reticolociti 1 % Paz. B eritrociti reticolociti 2 %

27 Paz. A eritrociti reticolociti 1 % reticolociti as Paz. B eritrociti reticolociti 2 % reticolociti as

28 I moderni contaglobuli forniscono, oltre alla conta totale dei leucociti, anche la formula

29 Citometria a flusso Misurazione quantitativa di caratteristiche cellulari individuali multiple grandezza granulazioni citoplasmatiche fluorescenza Anticorpi monoclonali marcati con fluoresceina e legati ad antigeni leucocitari

30 METODO DI ANALISI neutrofilo eosinofilo basofilo monocita linfocita Band cell metamielocita mielocita promielocita mieloblasto

31 Citometria a flusso: Rifrazione laterale Granulociti Monociti Linfociti NRBC Blasti Rifrazione frontale

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33 Divertiamoci con i valori normali dei leucociti.

34 Valori normali di neutrofili e linfociti (media e range) ) nel 1 anno di vita ore mesi Totale Leucociti Neutrofili Linfociti Media Range Media Range Media Range Nascita 18,1 9,0-30,0 11,O 6,0-26,0 5,5 2,0-11, ,8 13,0-38,0 15,5 6,0-28,0 5,5 2,0-11, ,9 9,4-34,0 11,5 5,0-21,0 5,8 2,0-11,5 1 10,8 5,0-19,5 3,8 1,0-9,0 6,0 2,5-16,5 6 11,9 6,0-17,5 3,8 1,0-8,5 7,3 4,0-13, ,4 6,0-17,5 3,5 1,5-8,5 7,0 4,0-10,5 Dallman 1977

35 Percentili ( ) del n totale dei leucociti (1.000 / mmc) in età pediatrica Età in anni NHANES III

36 Percentili ( ) dei granulociti e dei 10 linfociti (1.000 / mmc) in età pediatrica Età in anni NHANES III

37 Neutrofilo segmentato, Band cell,, Linfocita

38 3 neutrofili non segmentati, 1 monocita (in alto al centro)

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40 Ed infine le piastrine!

41 Piastrine : percentili da 1 a 16 anni X Età in anni NHANES III

42 MPV (volume piastrinico medio) percentili da 1 a 16 anni ftl Età in anni NHANES III

43 Non sempre una piastrinopenia è vera : ricordate la forma spuria! Aggregato di piastrine