LA STERILIZZAZIONE. Università G. d Annunzio - CHIETI - Facoltà di Medicina Dipartimento di Scienze Biomediche Sezione di Microbiologia Clinica

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1 Università G. d Annunzio - CHIETI - Facoltà di Medicina Dipartimento di Scienze Biomediche Sezione di Microbiologia Clinica Dott. Giovanni Catamo

2 CONCETTI GENERALI PER STERILIZZAZIONE SI INTENDE LA UCCISIONE DI TUTTI I MICRORGANISMI E L INATTIVAZIONE IRREVERSIBILE DEI VIRUS PRESENTI IN O SU UN PRODOTTO OD OGGETTO

3 FISICI PROCEDIMENTI - Calore secco - Calore umido (sotto pressione) -Raggi gamma - Radiazioni ultraviolette -Microonde - Filtrazione CHIMICI - Ossido di etilene CHIMICO-FISICI - Calore umido con vapori non di acqua A FREDDO - Soluzioni microbicide Indipendentemente dai procedimenti, è importante far precedere le operazioni da un accurato lavaggio

4 CALORE PROCEDIMENTI SECCO - Esposizione diretta alla fiamma - Aria calda UMIDO - Vapore fluente* - Vapore sotto pressione *L impiego di acqua in ebollizione e di vapore fluente sono da proscrivere: a t <110 C non si ha una sterilizzazione efficace

5 MECCANISMO DI DISTRUZIONE TERMICA La morte dei microrganismi è il risultato della inattivazione proteica La maggiore resistenza opposta al CALORE SECCO è dovuta al fatto che lee proteine allo stato secco hanno maggiore stabilità termica Albume con 50% di H 2 O coagula a 56 C con 18% di H 2 O coagula a C con 6% di H 2 O coagula a 145 C senza aggiunta di H 2 O coagula a C CALORE SECCO Determina la morte cellulare per Ossidazione proteica CALORE UMIDO Determina la morte cellulare per Coagulazione proteica

6 TRAMITE CALORE SECCO TEMPERATURA TEMPO 180 C 30 min. 170 C 60 min. 160 C 120 min. 150 C 150 min. 140 C 180 min. 120 C 360 min. Il tempo di sterilizzazione deve essere conteggiato a partire dal momento in cui il materiale ha raggiunto la temperatura prefissata

7 TRAMITE CALORE SECCO Materiale sterilizzabile -Vetreria -Strumentazione metellica -Polveri farmaceutiche -Preparazioni non acquose di sostanze termostabili (olii) -Materiale termoresistente Materiale non sterilizzabile -Tessuti -Soluzioni acquose -Farmaci organici -Oggetti smaltati -Materiale termosensibile VANTAGGI Apparecchiatura ubiquitaria Sterilizzazione strumenti all interno dei contenitori, se metallici Non corrode i metalli SVANTAGGI Deterioramento materiale termosensibile Durata eccessiva del processo

8 TRAMITE CALORE SECCO FORNO PASTEUR

9 TRAMITE CALORE UMIDO TEMPERATURA TEMPO 100 C oltre 1200 min. 108 C 420 min. 110 C 120 min. 113 C 30 min. 125 C 1 min. 135 C 30 sec. Si definisce sterilizzazione a calore umido il procedimento che utilizza vapore acqueo saturo a T non minore di 110 C

10 TRAMITE CALORE UMIDO TEMPERATURA TEMPI PRESSIONE 115 C 20 min. 0,7 atm 121 C 15 min. 1,0 atm 134 C 3 min. 2,0 atm VANTAGGI Rapidità di penetrazione del calore nei materiali Distruzione dei microrganismi in breve tempo Facile controllo della sterilità Atossicità Economia di esercizio SVANTAGGI Degradazione del materiale termolabile Corrosione dei metalli Impossibilità di sterilizzare grassi e polveri anidre

11 TRAMITE CALORE UMIDO

12 TRAMITE CALORE UMIDO Autoclave

13 RAGGI GAMMA Radiazioni ionizzanti prodotte dal Co 60 Applicazione per sterilizzare materiale a perdere VANTAGGI Facile sterilizzazione di materiale termolabile (monouso) SVANTAGGI Apparecchiature di difficile utilizzo Costi altissimi Danneggiano mucose e cute

14 RAGGI UV Gli UV sono prodotti da lampade a vapori di Hg rarefatti Attività microbicida avviene a L.O. di 2500 Å Usati per sterilizzare aria e piani di appoggio Meccanismo d azione: danneggiamento del DNA SVANTAGGI Azione limitata alle superfici esposte alla luce Efficacia limitata nel tempo in relazione al decadimento Costi Danneggiano mucose ed epidermide

15 MICROONDE Onde elettromagnetiche a bassa frequenza (3x10 8-3x10 10 Hz) - Meccanismo d azione: Aumento della temperatura per attrito interno P. aeruginosa, E. coli, S. aureus distrutti dopo 90 secondi B. subtilis, B. stearothermophilus distrutti dopo 150 secondi VANTAGGI Velocità Mancanza di vapori o gas tossici Economia di esercizio Elevata sterilizzazione Non scalda i materiali plastici Bassa T a fine ciclo Maneggevolezza SVANTAGGI Difficoltà controllo T Impossibile sterilizzare metalli

16 FILTRAZIONE Utilizzata esclusivamente per i liquidi contenenti sostanze termolabili (limpidi, con vistosità bassa) Dispositivi filtranti: Membrane (cellulosa ed esteri di cellulosa) Candele Chamberland (porcellana) Vetro poroso I dispositivi filtranti devono essere assolutamente sterili

17 OSSIDO DI ETILENE C 2 H 4 O è un etere ciclico che passa dallo stato liquido a gassoso a 10,73 C. Infiammabile a T ambiente, solubile in H 2 O, alcool, etere. -Meccanismo d azione: alchilazione dei gruppi aminici, agisce lentamente, elevato potere di penetrazione VANTAGGI La bassa T non danneggia il materiale da sterilizzare SVANTAGGI Pericolo di esplosione Notevole azione irritante su cute e mucose L effetto dipende da concentrazione, temperatura e umidità Difficile allontanamento

18 CALORE UMIDO CON VAPORI NON DI ACQUA Sterilizzazione con CHEMICLAVE si basa su l evaporazione di miscele di: Alcooli, Chetoni, Formaldeide, Acetone, Acqua (<15%) a 130 C per 20 minuti VANTAGGI Assenza di corrosione per i metalli SVANTAGGI Non adatta per strumenti cavi con lume piccolo Procedimento non unificato

19 Glutaraldeide Acido Paracetico CON SOLUZIONI MICROBICIDE DA CONSIDERARE CON ASSOLUTA RISERVA

20 TINDALIZZAZIONE Tindalizzazione o sterilizzazione frazionata (calore umido) viene utilizzata per sterilizzare terreni contenenti sostanze termolabili C per 30 - raffreddare a temperatura ambiente - ripetere il trattamento dopo 24 h a C per 30 - raffreddare a temperatura ambiente - ripetere il trattamento dopo 24 h a C per 30

21 PASTORIZZAZIONE Tecnica di disinfezione utilizzata per la bonifica e la conservazione di alimenti C per 30 (pastorizzazione bassa) - 72 C per 15 (pastorizzazione alta) - 90 C per 1 (pastorizzazione ultra alta UHT)