bioetica e scienze veterinarie. Ottobre 2000).
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- Gianpiero Boscolo
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1 I PETS POSSONO SALVARCI LA VITA? L'IMPORTANZA DEL MODELLO ANIMALE DI PATOLOGIA SPONTANEA IN ONCOLOGIA Rossi G. Dipartimento di Scienze Veterinarie Università di Camerino
2 Che cosa è un modello animale di patologia spontanea? Comitato Nazionale per la Bioetica (CNB) (Rapporto tra bioetica e scienze veterinarie. Ottobre 2000). Organismo vivente con un processo patologico trasmesso geneticamente, spontaneamente acquisito o indotto, che in uno o più aspetti ha stretta similitudine con lo stesso fenomeno che si verifica nell uomo. I modelli animali offrono solo un approssimazione della patologia umana e non possono riprodurre esattamente il processo patologico umano; contribuiscono però a far comprendere e ad approfondire i meccanismi, a individuare un trattamento farmacologico più specifico a trovare possibili modi di prevenzione
3 Cane e Gatto presentano patologie oncologiche rapportabili all uomo?
4 Gatto Neoplasie mammarie (adenocarcinoma mammario) Neoplasie cutanee (carcinoma squamocellulare) (mastocitosi sistemica) Neoplasie mesenchimali (fibrosarcoma vaccinale) Cane Neoplasie mammarie (ad.carc.mammario) Neoplasie cutanee (melanoma) Neoplasie gastroenteriche Neoplasie mesenchimali (osteosarcoma) Elenco destinato ad essere implementato!!
5 Esperienza personale: 3 trials clinici su nuovi protocolli per: A) Trattamento del CSC felino B) Trattamento del mastocitoma felino in forma sistemica A) Trattamento del melanoma canino
6 A)Trattamento del CSC felino con Photo Dinamic Therapy tramite uso di Verteporfina (Visudyne ).
7 Carcinoma squamocellulare
8 Verteporfina VANTAGGI Tempo di attesa per irradiazione laser: 15 minuti, Tempo di attesa per esposizione al sole: 2 giorni, Lunghezza d onda di attivazione 689 nm = >profondità di penetrazione Alta specificità per Low-density lipoprotein (LDL)
9 Gruppo di animali in studio
10 Experimental design Time schedule T/-1 : Enrollment after clinical evaluation (x-ray, biopsy, staging and grading) T/0 : PDT alone or associate to surgical debulking by CO 2 laser T/1 : 45 days after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading) T/2 : 90 days after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading) T/3 : 180 days after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading) T/4 : 1 year after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading) T/5 : 2 years after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading) T/6 : 3 years after T/0. Clinical check (x-ray, biopsy, staging and grading)
11 Caso #1 T/-1 Durante l esposizione al laser
12 Caso #1 2 giorni dopo la PDT 15 giorni dopo
13 Caso #1 30 giorni dopo 45 giorni dopo (T1)
14 Caso#1 T/2-90 giorni
15 Caso #1 T/4 (1 anno) T/5 (3 anni)
16 Caso #2 T/1-48h dopo trattamento T/3 (180 giorni)
17 Caso #2 T/5 (2 anni) T/6 (3 anni)
18 Caso #9 Prima del trattamento 48 h dopo trattamento
19 Caso #9 T/2 (90 gg) T/4 (1 anno)
20 Risultati: Follow Up Relapses in yellow
21 Considerazioni Correlation among types of Tx & effectiveness (% relapses) Tx Lesion site % relapse Period of time : Tx- Relapse Author Surgical removal Truffle 100% 7 Withrow 1990 Chemotherapy Truffle 55% 12 Theon 1996 Radiotherapy Truffle 47% 24 Theon 1995 PDT (others photosenzitizer) PDT (Visudyne) Truffle 27% 17 Truffle 2% 45 McCaw 2000 Rossi 2009
22 B)Trattamento del mastocitoma felino in forma sistemica con uso di Imatinib mesylato.
23 Mastocitosi sistemica dell uomo- mastocitoma sistemico del gatto: principali punti in comune Mastocitemia Interessamento M.O. Forte prurito generalizzato tipo orticaria dermografica imponente Anemia (particolare eritrofagocitosi) Mutazioni genetiche del protoncogene c-kit nell eziopatogenesi
24 SPERIMENTAZIONE Ø 11 gatti affetti da mastocitoma multicentrico e con requisiti minimi per l ingresso nel protocollo con Imatinib mesilato(gleevec, Glivec) (mutazione del protoncogene c-kit, verificata con immunoistochimica - CD117).
25 substrato Proteina Kit p p p substrato MEMBRANA Attivazione ciclo cell. c-kit Nucleo Up-regulation c-kit
26 Inatinib substrato Prot. Kit p p p MEMBRANA Stop Ciclo cell. Nucleo c-kit Azione del GLIVEC
27 I GATTI
28 I GATTI-CASO ESEMPIO Maya, sei anni, femmina Anamnesi : emaciazione, perdita di peso progressiva, vomito con ematemesi, melena, accessi di forte prurito con autotraumatismo Localizzazione tumore : Forma sistemica con interessamento cutaneo diffuso dalle evidenti ulcerazioni in area perineale, dorsale e addominale nonché sulla coda. Interessamento poliviscerale. Classificazione istologica e clinica: G2 T2N3M2 - Fegato e milza positivi all esame ecografico - Buffy coat positivo - Midollo positivo - CD117; forte positività (oltre 90% delle cellule) con pattern tipo III
29 EVOLUZIONE CLINICA E ISTOLOGICA NEL CASO 1 Maya T1 la gatta si presenta con un miglioramento delle lesioni che risultano meno pruriginose e meno essudative. Sono in parte scompase le lesioni T0 Maja presenta lesioni ulcerative infette e sanguinanti sul muso, dorso, ulcerative e al loro posto sono presenti aree nerastre con segni di arti pelvici e nella regione addominale caudale e uno scadimento delle ripitelizzazione e ricrescita del pelo condizioni generali
30 T3T2 Le aree Le lesioni lese sono non sono completamente più eritematose ricoperte e continua da pelo. la Unica crescita lesione del pelo. residuale è un area alopecia localizzata a livello del mento
31 Risultati Caso T0 T1 (1 mese ) T2 (8 mesi ) T3 (12 mesi ) CD11 7 CD1 1 7 Ki67 C TUNE a L s p a s i - 3 CD117 Ki67 Cas TUNE p L a s i - 3 CD117 Ki67 Casp a s i - 3 TUNE L Maja P III P II P I P I Nuvola P II P I P P Odino P I P P P Simba P III P II Romeo P III P II P I P I 1 1 0
32 C) Trattamento del melanoma canino con terapia a base di ADI-Peg
33 Prime osservazioni in vitro Sulla membrana delle cellule ASS = Arginina succinil Sintetasi ASL = Arginina succinil lyasi I due enzimi, in successione, determinano la sintesi di Arginina a partire dalla citrullina, derivante dal ciclo dell urea, secondo lo schema Citrullina ASS ASL Arginina
34 Prime osservazioni in vitro Alcune linee cellulari neoplastiche (Melanoma, carcinoma epatico, prostatico) perdono totalmente gli enzimi ASS e ASL, divenendo totalmente dipendenti dalla quota esogena di Arginina. Due Mycoplasmi M. hominis e M. arginini, sono capaci di produrre in vitro un enzima Arginina Deiminasi capace di degradare l arginina esogena.
35
36 Osservazioni in vivo 10 cani con melanoma maligno: 6 melanoma orale (1 stadio I, 1 stadio II, 2 stadio III, 2 stadio IV) 4 melanoma digitale (2 stadio I, 1 stadio II, 1 stadio III) 4 gatti con melanoma maligno: 3 melanoma orale (2 stadio I, 1 stadio II) 1 melanoma sovrascapolare (stadio II)
37
38 Caso 2 Stadio II: T2N0M0
39 Caso 3 Stadio III: T3N2bM0
40 Caso 7- StadioII:T2N0M0
41 Risultati 10 cani con melanoma maligno: 70% no recidive Orale 1 stadio I remissione (follow-up, 19 mesi) 1 stadio II remissione (follow-up, 22 mesi) 2 stadio III 1 stabilizzazione (follow-up, 15 mesi), 1 decesso (follow-up, 2 settimane) 2 stadio IV 2 decessi (follow-up 3 settimane e un mese carc prostatico!) Digitale 2 stadio I remissione (follow-up, 18 e 36 mesi) 1 stadio II remissione (follow-up, 14 mesi) 1 stadio III remissione (follow-up, 28 mesi)
42 Grazie per l attenzione Grazie per l attenzione
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