Le micotossine nei prodotti agroalimentari: fonti di rischio e gestione della contaminazione

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PSR 2014-2020 Regione Toscana Progetto Integrato di filiera Cereali Sovicille e dintorni Progetto Sottomisura 16.2 - INNOVACEREALI Le micotossine nei prodotti agroalimentari: fonti di rischio e gestione della contaminazione Giornata incontri teorico-pratici sulla gestione delle micotossine 28 Novembre 2017 Complesso didattico Pian dei Mantellini Università di Siena Michelangelo Pascale Istituto di Scienze delle Produzioni Alimentari Consiglio Nazionale delle Ricerche (ISPA-CNR)

Sommario 1. Micotossine e rischi per la salute animale ed umana 2. Limiti e regolamentazione 3. Strategie per la prevenzione 4. Metodi di analisi per il controllo

Percezione dei rischi alimentari Fattori di rischio percepito dai consumatori Fattori di rischio scientificamente riconosciuti 1. Pesticidi - Metalli pesanti - Contaminanti chimici 2. Microrganismi patogeni (es. Salmonella, Listeria) 3. OGM 4. Additivi 5. Malattie/Disturbi alimentari 6. Micotossine (EFSA, Eurobarometro 2010) + - 1. Malattie/Disturbi alimentari 2. Microrganismi patogeni (es. Salmonella, Listeria) 3. Micotossine 4. Pesticidi - Metalli pesanti - Contaminanti chimici 5. Additivi 6. OGM

COSA SONO LE MICOTOSSINE Le micotossine sono metaboliti secondari prodotti da funghi patogeni o saprofiti delle piante (Aspergillus, Penicillium, Fusarium) che hanno effetti tossici sulla salute animale ed umana Sono resistenti ai comuni trattamenti termici Possono contaminare varie derrate alimentari (cereali e prodotti derivati, arachidi, nocciole, pistacchi, mandorle, frutta secca, spezie, vino, birra, caffè, prodotti di origine animale quali latte, uova insaccati e mangimi) Nel mondo, più del 25% di derrate alimentari sono contaminate da micotossine a livelli significativi (fonte FAO) E stato stimato che più di 500 millioni di persone povere in Africa, America Latina e Asia è esposta alle micotossine a livelli che incrementano malattie e mortalità (IARC Report No. 9, 2015)

MICOTOSSINE: scoperta recente Malattia X del tacchino (Turkey X Disease, 1960): scoperta delle aflatossine e inizio della moderna micotossicologia AFB1 O O O - morte di ~100.000 tacchini in Gran Bretagna per ingestione di arachidi colonizzate da A. flavus e contaminate da aflatossine O O OCH3 oltre 400 micotossine note 20 con interesse alimentare (accertati effetti tossici sulla salute animale e risvolti economici)

PRINCIPALI MICOTOSSINE PRESENTI NELLE DERRATE ALIMENTARI E RELATIVI FUNGHI PRODUTTORI MICOTOSSINA DERRATA FUNGO Aflatossine (B 1, B 2, G 1, G 2 ) Aflatossina M1 Ocratossina A mais, arachidi, nocciole, spezie, frutta secca latte, formaggi frumento, orzo, caffè, vino, birra Aspergillus flavus, A. parasiticus Aspergillus ochraceus, A. carbonarius, A. niger, Penicillium verrucosum Deossinivalenolo frumento, mais, orzo Fusarium graminearum, F. culmorum, Tossine T-2 e HT-2 frumento, mais, orzo, segale, avena F. sporotrichioides, F. langsethiae, F. poae Zearalenone mais, frumento Fusarium graminearum, F. culmorum, F. crookwellense Fumonisine (B 1, B 2, B 3 ) mais Fusarium verticillioides, F. proliferatum Patulina prodotti a base di mela, succhi di frutta (mela) Penicillium expansum

ALTRE MICOTOSSINE Micotossine ritrovate con meno frequenza che possono causare rischi per la salute umana ed animale ALCALOIDI DELL ERGOT Claviceps purpurea, C. paspali, C. africana ACIDO TENUAZONICO ALTERNARIOLO ACIDO CICLOPIAZONICO CITRININA STERIGMATOCISTINA MONILIFORMINA BEAUVERICINA ENNIATINE Alternaria spp Aspergillus flavus, A. tamarii, A. versicolor, Penicillium camembertii, P. cyclopium Penicillium citrinin, P. verrucosim, P. expansus Aspergillus versicolor, A. flavus, A. parasiticus Fusarium proliferatum, F. oxysporum Beaveria bassiana, Fusarium spp. Fusarium spp

MICOTOSSINE MODIFICATE Micotossine prodotte principalmente da: 1) metabolismo del fungo 2) trasformazione enzimatica della pianta (meccanismo di detossifcazione) 3) trasformazione chimica che avviene durante la lavorazione dell alimento di solito sfuggono alle analisi tradizionali possono contribuire alla tossicità dell alimento DON-glucoside

DOVE SI SVILUPPANO trasporto raccolta stoccaggio FUNGHI MICOTOSSINE campo prodotti trasformati

FATTORI CHE PREGIUDICANO LA PRESENZA DI MICOTOSSINE LUNGO LA CATENA ALIMENTARE FATTORI BIOLOGICI Colture suscettibili PRATICHE AGRONOMICHE Rotazione Preparazione del terreno Fertilizzazione Irrigazione Distanza tra le piante Controllo delle infestanti FATTORI AMBIENTALI Temperatura Umidità Pioggia Danni da insetti/uccelli RACCOLTA Raccolta ritardata Temperatura Umidità Danni meccanici Ritardo nel riempire i silos

FATTORI CHE PREGIUDICANO LA PRESENZA DI MICOTOSSINE LUNGO LA CATENA ALIMENTARE TRASPORTO E STOCCAGGIO Temperatura Umidità Danni meccanici Danno da insetti Spore fungine Tempo Cattiva pulizia Granaglia umida PRODOTTI PROCESSATI Temperatura Umidità Spore fungine

PRINCIPALI FUNGHI PRODUTTORI DI MICOTOSSINE Aspergillus Fusarium Penicillium

Fusarium spp Principali specie di Fusarium nei cereali e micotossine Fusarium graminearum DON, AcDON, NIV, FUS, ZEN F. culmorum DON, AcDON, NIV, ZEN, ZOH F. poae DAS, NIV, FUS, T-2 F. langsethiae T-2, HT-2 F. verticillioides FB 1, FB 2 F. proliferatum FB 1, FB 2, MON, BEA, FUP F. temperatum (ex F. subglutinans) MON, BEA, FUP F. avenaceum (MON, BEA, ENS) F. cerealis (NIV, FUS, ZEN, ZOH) F. sporotrichioides (T-2, HT-2, NEO) F. tricinctum (MON, BEA, ENS) F. acuminatum (T-2, NEO, MON, ENS) F. subglutinans (MON, BEA, FUP) F. oxysporum (MON, BEA, ENS) F. equiseti (DAS, ZEN, ZOH)

LE MICOTOSSINE POSSONO ESSERE RAGGRUPPATE IN DUE CATEGORIE MICOTOSSINE DI CAMPO fumonisine, deossinivalenolo, zearalenone, tossine T-2/HT-2, aflatossine, patulina MICOTOSSINE DI STOCCAGGIO aflatossine, ochratossina A Alcune micotossine possono svilupparsi sia in campo che durante lo stoccaggio

FONTI DI ESPOSIZIONE ALLE MICOTOSSINE Negli animali e nell uomo: ingestione di mangime/cibo contaminato Vanno prese in considerazione anche inalazione e contatto della pelle

MICOTOSSICOSI Malattie che derivano da esposizione alle micotossine MICOTOSSICOSI ACUTA Causata dall ingestione di elevate quantità di micotossine Di solito ristretta ad animali da allevamento e popolazioni rurali nei Paesi in via di sviluppo MICOTOSSICOSI CRONICA Causata da micotossine presenti in alimenti e mangimi a bassi livelli Riguarda la salute animale e umana a lungo termine

Effetti tossici delle micotossine AFL OTA FUM TRICH* ZEA CARCINOGENICITA EPATOTOSSICITA IMMUNOTOSSICITA NEFROTOSSICITA NEUROTOSSICITA ESTROGENICITA TERATOGENICITA * TRICH = tricoteceni, includono DON, NIV, T-2 e HT-2

Effetti delle micotossine sulla salute animale

Effetto delle micotossine sulla salute dei ruminanti

Alcune malattie umane per cui i dati analitici e/o epidemiologici indicano il coinvolgimento di micotossine Malattia Alimento Agente eziologico Leucopenia tossico alimentare (ATA) Nefropatia dei Balcani (BEN) Ergotismo Malattia di Kashin-Beck Cancro esofageo Carcinoma epatico (aflatossicosi acuta) Kwashiorkor (biafra) Sindrome di Reye s Cereali Cereali Segale Cereali Mais Cereali, arachidi Cereali Cereali Fusarium spp. - tossine T2/HT2 Penicillium spp., Aspergillus ochraceus - ocratossina A Claviceps purpurea - alcaloidi Fusarium spp. - tricoteceni Fusarium verticillioides - fumonisine Aspergillus flavus, A. parasiticus - aflatossine Aspergillus flavus, A. parasiticus - aflatossine Aspergillus flavus, A. parasiticus - aflatossine

CLASSIFICAZIONE DI ALCUNE MICOTOSSINE SULLA BASE DEL RISCHIO CANCEROGENO PER L UOMO GRUPPO MICOTOSSINE Gruppo 1 Cancerogeni per l uomo Aflatossine B 1, B 2, G 1 e G 2 Gruppo 2B Cancerogeni per gli Aflatossina M 1 animali e possibili Ocratossina A cancerogeni per l uomo Fumonisina B 1 Gruppo 3 Non classificabili per la cancerogenicità sull uomo Tossine di Fusarium graminearum, F. culmorum, F. crookwellense e F. sporotrichioides (zearalenone, deossinivalenolo, tossina T-2, nivalenolo, fusarenone-x) adattata da: IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic risk to humans. VOL. 56, 1993 e Vol. 82, 2002, IARC, Lyon, France

Sommario 1. Micotossine e rischi per la salute animale ed umana 2. Limiti e regolamentazione 3. Strategie per la prevenzione 4. Metodi di analisi per il controllo

Fattori che influenzano la normativa sui contaminanti Basi scientifiche Valutazione del rischio: responsabilità di appositi Organi/Commissioni scientifiche (es. JECFA, EFSA) Valutazione del rischio Identificazione del pericolo Caratterizzazione del pericolo Valutazione dell esposizione Caratterizzazione del rischio Informazioni tossicologiche Informazioni sulla presenza e i consumi Informazioni sul rischio di esposizione

Fattori che influenzano la normativa sulle micotossine Disponibilità di dati tossicologici JECFA, EFSA: forniscono le basi scientifiche

Fattori che influenzano la normativa sulle micotossine Disponibilità di dati analitici sulla contaminazione SCOOP: Scientific Cooperation on Problems relating to Food SCOOP TASK 3.2.10 COLLECTION OF OCCURRENCE DATA OF FUSARIUM TOXINS IN FOOD AND ASSESSMENT OF DIETARY INTAKE BY THE POPULATION OF EU MEMBER STATES Final Report Food Additives & Contaminants: Part B Surveillance

Fattori che influenzano la normativa sulle micotossine Disponibilità di metodi di campionamento ed analisi Whenever possible, laboratories that supply analytical data that are used by the Committee should have been accredited by a recognized body to ensure that they are applying a system of QA. Such a system should include, when possible, systematic use of RMs or CRMs and regular participation in interlaboratory comparison studies From JECFA report, 2002

Fattori che influenzano la normativa sulle micotossine Informazioni sui consumi Disponibilità di cibo http://www.fao.org/hunger/en/

Fattori che influenzano la normativa sulle micotossine Scambi commerciali

Normativa sulle micotossine Hans van Egmond - RIKILT Indagini nel mondo: 1981, 1987, 1995, 2003, 2012 (varie pubblicazioni) nel 2012: indagine in Paesi economicamente importanti (dati non pubblicati) Indagine 2003 pubblicata dalla FAO (FAO FNP 81, 2004) Pubblicazione disponibile in Inglese, Francese, Spagnolo e Cinese FAO FNP 81, 2004

Micotossine Paesi con limiti 1981-1987 - 1995-2003 - 2012 countries 160 120 80 40 31 56 77 99 R 2 = 0.99 0 1960 1980 2000 2020 year

Regolamentazione delle micotossine nel mondo Limiti massimi ammissibili per micotossine dal 1960 (scoperta delle aflatossine) Limiti armonizzati in EU, MERCORSUR, GCC, AU&NZ EU GCC MERCOSUR AU&NZ MERCOSUR EU GCC AU&NZ Common market of South America (Mercado Común del Sur) European Union Gulf Cooperation Council Australia & New Zealand

Livelli massimi ammissibili in UE Regolamenti UE No. 1881/2006, 1126/2007, 105/2010, 165/2010, 594/2012, 1058/2012, 212/2014 Micotossine regolamentate Aflatossine B 1, B 2, G 1, G 2, M 1 Deossinivalenolo Fumonisine (B 1, B 2 ) Zearalenone Ocratossina A Patulina Tossine T-2 e HT-2 (raccomandazione) Matrici considerate dalla legislazione europea Latte (AFM1) Frutta secca, frutta a guscio Cereali, Alimenti a base di cereali Baby food Caffè tostato Vino Spezie, liquirizia Succhi di frutta, prodotti a base di mele Mangimi (AFB1) Livelli massimi ammissibili: da ng-µg/kg (ppt-ppb) a mg/kg (ppm)

Livelli massimi ammissibili per aflatossine in cereali e mangimi in UE Prodotti alimentari (Regolamento CE N. 165/2010) Tutti i cereali e loro prodotti derivati, compresi i prodotti trasformati a base di cereali Aflatossina B1: Aflatossine totali: 2 µg/kg 4 µg/kg Mais e riso da sottoporre a cernita o ad altro trattamento fisico prima del consumo umano o dell'impiego quale ingrediente di prodotti alimentari Aflatossina B1: 5 µg/kg Aflatossine totali: 10 µg/kg Mangimi (Direttiva CE 2003/100/EC) Aflatossina B 1 : da 5 a 20 µg/kg Tutti i materiali per mangimi: 20 µg/kg Mangimi per animali da latte: 5 µg/kg

Regolamento (CE) N. 1181/2006 e 1126/2007 (cereali e prodotti derivati) Livelli max. (µg/kg) PRODOTTO ALIMENTARE DON ZEA OTA Cereali non processati diversi da frumento duro, avena e mais 1250 100 a 5 a Frumento duro e avena 1750 100 a 5 a Cereali destinati al consumo umano diretto, farina di cereali, crusca, germe 750 75 3 b Pasta (secca) 750-3 b Pane (compresi piccoli prodotti da forno), prodotti della pasticceria, biscotteria, merende a base di cereali e cereali da colazione Alimenti a base di cereali trasformati e altri alimenti destinati ai lattanti e ai bambini 500 50 3 b 200 20 0,5 a Cereali non trasformati; b Tutti i prodotti derivati dai cereali non trasformati, compresi i prodotti trasformati a base di cereali e i cereali destinati al consumo umano diretto

Livelli indicativi per le tossine T-2 e HT-2 in cereali e prodotti a base di cereali (2013/165/UE) Cereali non trasformati Somma di T-2 e HT-2 (µg/kg, ppb) orzo (compreso l orzo da birra) e mais 200 avena (non decorticata) 1000 frumento, segale e altri cereali 100 cereali destinati al consumo umano diretto avena 200 mais 100 altri cereali 50 Prodotti a base di cereali destinati al consumo umano crusca d avena e fiocchi d avena 200 crusche di cereali (ad eccezione della crusca d avena), prodotti di macinazione dell avena diversi dalla crusca d avena e prodotti di macinazione del mais altri prodotti di macinazione dei cereali 50 cereali da colazione, anche sotto forma di fiocchi 75 prodotti di panetteria, pasticceria, biscotteria, merende a base di cereali, paste alimentari alimenti a base di cereali destinati ai lattanti e ai bambini 15 100 25

Sommario 1. Micotossine e rischi per la salute animale ed umana 2. Limiti e regolamentazione 3. Strategie per la prevenzione 4. Metodi di analisi per il controllo

Strategie per la prevenzione e metodi di decontaminazione trasporto raccolta stoccaggio FUNGHI MICOTOSSINE campo prodotti trasformati

BUONE PRATICHE AGRICOLE per la prevenzione e riduzione delle tossine di Fusarium in cereali Uso di semi certificati - non contaminati da funghi tossigeni Rotazione delle colture - Evitare il mais prima del frumento Gestione del suolo - Aratura, minimizzare i residui di raccolto della coltura precedente sul suolo Scelta della varietà - Scegliere varietà più resistenti e adatte alla natura del suolo, alle condizioni climatiche, alle pratiche agricole Controllo degli insetti e delle infestanti - E efficace per il mais Uso di fertilizzanti - Usare un apporto nutritivo ottimale Uso di fungicidi - Usare fungicidi efficaci contro Fusarium spp Raccolta e immagazzinamento - Non ritardare il raccolto e controllare il tasso di umidità raccomandato per l immagazzinamento (se necessario essiccare)

PREVENZIONE ALLA RACCOLTA Essiccatore per arachidi Pulizia dei contenitori (es. vagoni, camion) usati per trasportare il prodotto raccolto nei centri di stoccaggio Evitare danni meccanici al prodotto ed evitare il contatto con il suolo durante le operazioni di raccolta Rimuovere le cariossidi danneggiate e altro materiale estraneo (pre-pulizia) Essiccare il prodotto all umidità raccomandata per lo stoccaggio di quel prodotto - per es. 13.5-14.5% per il frumento (previene la crescita di funghi) Evitare di sostare il frumento raccolto con un contenuto di umidità elevato per lungo tempo - minimizzare i tempi di trasporto

PREVENZIONE DURANTE IL TRASPORTO PREVENTI ON DURING TRANSPO RT Contenitori usati per il transporto (camion, vagoni, stive di navi), devono essere asciutti e puliti (evitare granaglie vecchie, muffe, insetti ). Possibilmente disinfettare gli ambienti Il trasporto dovrebbe essere protetto dall umidità usando contenitori coperti o teloni Evitare infestazione di insetti, uccelli e roditori usando appositi trattamenti chimici

PREVENZIONE DURANTE L IMMAGAZZINAMENTO Contenitori e silos dovrebbero essere puliti prima di caricare le granaglie CONTROLLO DEI FUNGHI Essiccare il raccolto al contenuto di umidità raccomandato per lo stoccaggio. Usare fungicidi e conservanti approvati (per es. acido propionico) CONTROLLO DELL UMIDITA Immagazzinare il prodotto al contenuto di umidità raccomandato (a 20 C è 14,5% per il frumento e mais, 9% per le arachidi) Evitare di sostare le granaglie umide o appena raccolte per molto tempo (alcune ore) prima di essiccarle Usare strutture asciutte e ben ventilate protette dal vento, pioggia, condensa dell umidità e possibilmente che risentano di minime fluttuazioni della temperatura CONTROLLO DEGLI INSETTI Usare strutture che forniscono protezione contro insetti, uccelli e roditori. Usare qualsiaisi precauzione per minimizzare la presenza di insetti, uccelli e roditori

Gestione del materiale contaminato da micotossine La prevenzione in pre-raccolta e post-raccolta è la maniera migliore per gestire la contaminazione da micotossine Tuttavia, in certe condizioni ambientali sfavorevoli, la contaminazione da micotossine puo essere inevitabile (anche a livelli superiori ai limiti massimi ammissibili) Distruzione del prodotto contaminato o diversificazione dell uso (per es. produzione di biogas/bioetanolo) Utilizzo come mangime per animali meno suscettibili Miscelazione con materiale non contaminato (è vietato nell Unione Europea) DECONTAMINAZIONE per recuperare il prodotto contaminato da micotossine

STRATEGIE PER LA DECONTAMINAZIONE /DETOSSIFICAZIONE DI MICOTOSSINE FISICA CHIMICA Rimozione di polvere, detriti e materiale danneggiato, decorticazione, irradiazione- ; trattamenti termici; materiali adsorbenti Ammoniazione, ozonizzazione, nixtamalizzazione. BIOLOGICA Detossificazione microbica/enzimatica PROCESSAMENTO Chimico, biologico, trattamento termico e/o meccanico applicato al prodotto grezzo per ottenere il prodotto finale

Setacciatura - Pulizia Alti livelli di micotossine sono ritrovati nelle polveri, detriti, cariossidi rotte o danneggiate La setacciatura reduce il contenuto di micotossine Il processo è non invasivo e non altera il prodotto

FUSARIOSI DELLA SPIGA (FHB) e MICOTOSSINE Cariossidi di frumento sane Cariossidi di frumento affette da fusariosi della spiga

Riduzione di aflatossine in mais mediante separazione meccanica e cernita ottica Separatore 1 - Aspiratore Separator 2 - Sortex flusso: 15 tons/hr; prodotto eliminato: 6.6% Lotto Frazione Aflatossina B 1 (µg/kg) Aflatossine totali (µg/kg) Riduzione AFB 1 (%) Riduzione AFs totali (%) A Prodotto prima della pulizia Prodotto dopo la pulizia 28.8 30.2 4.5 4.7 84 84 B Prodotto prima della pulizia Prodotto dopo la pulizia 23.5 24.5 5.7 6.0 76 76 Pascale et al., International Mycotoxin Conference 2014, Beijing, P.R. China

AFB1 (µg/kg) Livelli di aflatossine nelle frazioni scartate Separatore 1 Aspiratore Separator 2 - Sortex 350 300 250 200 150 100 B A 50 Incoming product 0 2 reject 8 separator reject 9 aspirator 1 reject aspirator 2 5 reject density separator 7 reject sortex B A 28.8 µg/kg 23.5 µg/kg

DON (%) Distribuzione del DON (%) nei prodotti e sottoprodotti di molitura del frumento duro e negli spaghetti prima e dopo cottura (n=9)* 200 159 150 100 100 77 64 scarti di pulitura 414% 50 37 33** 20** 0 Frumento non pulito Frumento pulito Crusca Farinetta Semola Spaghetti Spaghetti dopo cottura * Valore medio ± SD (n=9), frumento duro contaminato nell intervallo 0.3-13.1 µg/g; ** calcolato sul peso secco. Visconti et al., 2004

AGENTI DETOSSIFICANTI Biotransformazione/biodegradazione di micotossine a produrre metabolite non tossici Sopprimono o riducono l assorbimento gastrico delle micotossine ADDITIVI PER MICOTOSSINE NEI MANGIMI BIOTRANSFORMAZIONE - BIODEGRADAZIONE ADSORBIMENTO Microrganismi Enzimi Leganti di tossine

Sommario 1. Micotossine e rischi per la salute animale ed umana 2. Limiti e regolamentazione 3. Strategie per la prevenzione 4. Metodi di analisi per il controllo

METODI DI ANALISI Essere adatti per programmi di monitoraggio Permettere la determinazione delle micotossine a bassi livelli (ppt, ppb, ppm) di contaminazione in diverse matrici Permettere di raccogliere informazioni sull esposizione umana ed animale alle micotossine (risk assessment) Risolvere eventuali dispute legali tra le parti (metodi standard o ufficiali)

Metodi di analisi per le micotossine Metodi tradizionali TLC, GC, HPLC, ELISA Metodi innovativi Biosensori, NIR, FPIA, e-nose... METODI DI ANALISI Metodi rapidi ELISA, LFD, dip-sticks Metodi Ufficiali/Standard AOAC International, CEN

Procedura tipica per la determinazione di micotossine nei cereali campione di laboratorio (1-10 kg) campione da analizzare (25-50 g) CAMPIONAMENTO MOLITURA E OMOGENIZZAZIONE ESTRAZIONE la fase più critica preparazione del campione CLEAN-UP RIVELAZIONE/DETERMINAZIONE qualitativa quantitativa

Deossinivalenolo in frumento (HPLC/UV) Estrazione (acqua) Filtrazione (Whatman Nº 4) Filtrazione (Whatman GF/A) Purificazione con colonna ad immunoaffinità determinazione HPLC/UV (DAD) ( = 220 nm)

Metodi Standard/Ufficiali Validati mediante studi inter-laboratorio Vengono stabilite le performance del metodo (recuperi, precisione, limite di rivelazione, intervallo di applicazione, ) European Committee For Standardization Comité Européen de Normalisation Europäisches Komitee für Normung Possono essere usati in caso di controllo ufficiale e dispute legali tra le parti Esistono 22 metodi Standard CEN e 45 Metodi Ufficiali AOAC (aflatossine, fumonisine, deossinivalenolo, ocratossina A, zearalenone, patulina in varie matrici)

Metodi tradizionali Metodi rapidi/innovativi ESTRAZIONE filtrazione ESTRAZIONE filtrazione CLEAN-UP (colonne ad immunoaffinità) concentrazione dell estratto ANALISI STRUMENTALE ANALISI STRUMENTALE Tempo di analisi: 2-10 h Tempo di analisi: 5-20 min

Screening di micotossine Metodi rapidi Rapid e innovativi / Emerging per methods l analisi di for micotossine mycotoxin analysis Immunosaggi/Immunosensori: - Fast-ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) - Flow-Through ImmunoAssays (FIA) - Lateral Flow Devices (LFD) or dipsticks - Fluorescence Polarization ImmunoAssays (FPIA) - Electrochemical Immunoassays (SPE) - Surface Plasmon Resonance-based sensors (SPR) - Multi Analyte Profiling technology (Luminex) - Biosensor arrays Spettroscopia nell infrarosso (NIR, MIR, FT-NIR) Naso elettronico (MOS) Metodi che usano recettori alternativi (frammenti di anticorpi, peptidi, polimeri a stampo molecolare, aptameri)

PSR 2014-2020 Regione Toscana Progetto Integrato di filiera Cereali Sovicille e dintorni Progetto Sottomisura 16.2 - INNOVACEREALI GRAZIE PER L ATTENZIONE michelangelo.pascale@ispa.cnr.it Giornata incontri teorico-pratici sulla gestione delle micotossine 28 Novembre 2017 Complesso didattico Pian dei Mantellini Università di Siena