CONTROLLI SOTTO SORVEGLIANZA UFFICIALE - CORSO DI FORMAZIONE 4b PARTE TEORICA: ANALISI RESPONSABILE DI LABORATORIO VERIFICA, CALCOLO, ESPRESSIONE DEI RISULTATI DI ANALISI Presentazione di: Rita Zecchinelli CREA Difesa e Certificazione Sede di Tavazzano 07/02/2019 1
VERIFICA STATISTICA DEI RISULTATI DI ANALISI Scopo: accertare se la variabilità riscontrata - fra risultati parziali che concorrono a formare il risultato finale oppure - fra risultati finali ottenuti con diverse prove sullo stesso campione consenta di accettare gli stessi risultati con un determinato livello di significatività statistica. Per significatività statistica, o livello di probabilità, si intende la probabilità di errore. 07/02/2019 2
INCERTEZZA DI MISURA: L APPROCCIO ISTA RISULTATO DI ANALISI: migliore stima della caratteristica di interesse. INCERTEZZA DI MISURA: intervallo al cui interno ricade il «valore vero» della caratteristica di interesse. https://www.seedtest.org/en/position-papers-_content---1--1019.html https://www.seedtest.org/en/rules%202019/free-2019-rules-chapters-_content---1--3410.html 07/02/2019 3
RISULTATI DI ANALISI DELLE SEMENTI Procedura di verifica: prevede l uso di TABELLE DI TOLLERANZA. Queste riportano il valore della massima differenza accettabile fra due dati a confronto, in funzione della media calcolata fra i dati oggetto di verifica. Fonte: Handbook of Tolerances and of Measures of Precision for Seed Testing (S.R. Miles, Proc. Int. Seed Test. Ass., 28 (3) 1963) 07/02/2019 4
METODI UFFICIALI DI ANALISI DELLE SEMENTI (D.M. 22-12-1992) I M.U. recepiscono alcune tabelle di tolleranza fra le molte contenute nella pubblicazione di S.R. Miles del 1963. Le tabelle incluse nei M.U. sono riferite alle analisi di: - purezza (tabella 1, pag. 24) - germinabilità (tabella 3, pag. 39; tabella 4, pag. 40) Queste tabelle si applicano per verificare l attendibilità delle analisi eseguite in Laboratorio. I M.U. includono anche la tabella 2 (pag. 26) riferita alla Ricerca Semi Estranei che invece viene utilizzata nel caso di rianalisi effettuate a scopo di verifica. In casi particolari, è comunque possibile avvalersi delle altre tabelle pubblicate nelle Norme ISTA in vigore o reperibili nella pubblicazione originale. 07/02/2019 5
ANALISI DELLA PUREZZA Tabella 1 - da utilizzare per confrontare i risultati ottenuti sui 2 sottocampioni - la verifica deve riguardare tutte le 3 frazioni - se le differenze riscontrate per tutte le 3 frazioni risultano inferiori alle tolleranze ammesse, l analisi è da ritenersi valida - in caso contrario, l analisi deve essere ripetuta anche più volte, finché le tolleranze non sono rispettate. PROCEDURA: - calcolare la media - verificare il valore di tolleranza corrispondente - confrontare con la differenza Rif. Norme ISTA 2019 Tab. 3C, Half working samples, Chaffy seeds 07/02/2019 6
Analisi di purezza: calcolo ed espressione del risultato 1) Verifica tolleranze (tab. 1 pag. 24 M.U.) Per ogni sottocampione, calcolare la % sulla somma dei pesi dei singoli componenti (precisione 0,01); per ogni frazione, calcolare la % media e verificare i risultati utilizzando la tabella 1. A B Peso (g) % Peso (g) % Seme puro 26,26 91,79 25,98 91,61 Altre specie 1,15 4,02 1,13 3,98 Materie inerti 1,20 4,19 1,25 4,41 ------------------------ ------------------- 28,61 100,00 28,36 100,00 A B Peso (g) % Peso (g) % Seme puro 24,16 92,18 21,33 85,08 Altre specie 1,12 4,27 1,88 7,50 Materie inerti 0,93 3,55 1,86 7,42 ------------------------ ------------------- 26,21 100,00 25,07 100,00 Seme puro: MEDIA = 91,70 TOLLERANZA = 2,90 DIFFERENZA = 0,18 Altre specie: MEDIA = 4,00 TOLLERANZA = 2,12 DIFFERENZA = 0,04 Mat. inerti: MEDIA = 4,30 TOLLERANZA = 2,12 DIFFERENZA = 0,22 Seme puro: MEDIA = 88,63 TOLLERANZA = 3,25 DIFFERENZA = 7,10 NO OK 07/02/2019 7
Analisi di purezza: calcolo ed espressione del risultato 2) Calcolo ed espressione del risultato finale: Per ogni frazione, sommare i pesi dei due sottocampioni; calcolare il peso totale; calcolare la % di ogni frazione rispetto al peso totale, arrotondando alla 1 a cifra decimale. Per valori inferiori a 0,05%, il risultato finale è espresso come TR (tracce). Se la somma di tutti i componenti (escluse le Tracce ) è diversa da 100.0, aggiungere/ sottrarre 0,1% dal valore più alto (di norma il seme puro). Peso iniziale sottocampione A: 28,68 g (5% 1,43 g) Peso iniziale sottocampione B: 29,01 g (5% 1,45 g) A B Peso (g) % Peso (g) % Seme puro 26,26 91,79 25,98 91,61 Altre specie 1,15 4,02 1,13 3,98 Materie inerti 1,20 4,19 1,25 4,41 ------------------------ ------------------- 28,61 100,00 28,36 100,00 RISULTATO FINALE Peso (g) % in peso Seme puro 52,24 91,7 Altre specie 2,28 4,0 Materie inerti 2,45 4,3 -------------- ------------------- 56,97 100,0 PESO INIZIALE, PESO FINALE: DIFFERENZA MASSIMA AMMESSA 5% RIPORTARE SUL CERTIFICATO 07/02/2019 8
ANALISI DELLA GERMINABILITA Tabella 3 - da utilizzare per confrontare i risultati ottenuti dalle 4 replicazioni - la verifica deve riguardare tutte le categorie di semi e germinelli - se la differenza riscontrata, per qualsiasi categoria, fra il valore più alto e quello più basso è superiore alla tolleranza ammessa, l analisi deve essere ripetuta - se la differenza è invece inferiore alla tolleranza ammessa, il risultato finale è dato dalla media dei 4 valori ottenuti Rif. Norme ISTA 2019 Tab. 5B, Part 1 (4 replicates of 100 seeds) PROCEDURA: - calcolare la media - verificare il valore di tolleranza corrispondente - confrontare con la differenza fra valore più basso e più alto 07/02/2019 9
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato Verifica tolleranze (tab. 3 pag. 39 M.U.) Per ogni categoria, calcolare media e differenza massima; verificare i risultati utilizzando la tabella 3. REPL. 1a conta Conta finale Totale Morti Norm. Norm. Norm. A 81 2 5 6 86 8 6 B 75 4 6 6 81 10 9 C 83 3 7 3 90 6 4 D 86 2 9 2 95 4 1 Media 88 7 5 Tolleranza 13 10 8 Differenza 14 6 8 Giudizio - + + NO 07/02/2019 10
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato Verifica tolleranze (tab. 3 pag. 39 M.U.) Per ogni categoria, calcolare media e differenza massima; verificare i risultati utilizzando la tabella 3. REPL. 1a conta Conta finale Totale Morti Duri Germ. Duri Germ. Germ. A 75 2 9 3 1 84 1 5 10 B 76 4 4 2 9 80 9 6 5 C 71 3 7 5 4 78 4 8 10 D 76 4 6 1 2 82 2 5 11 Media 81 4 6 9 Tolleranza 15 7 9 11 Differenza 6 8 3 6 Giudizio + - + + NO 07/02/2019 11
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato Verifica tolleranze (tab. 3 pag. 39 M.U.) Per ogni categoria, calcolare media e differenza massima; verificare i risultati utilizzando la tabella 3. REPL. 1a conta Conta finale Totale Morti Norm. Norm. Norm. RISULTATO FINALE DA RIPORTARE SUL CERTIFICATO A 76 1 12 3 88 4 8 B 81 2 11 1 92 3 5 C 78 1 13 1 91 2 7 D 77 1 12 2 89 3 8 Media 90 3 7 Tolleranza 12 6 10 Differenza 4 2 3 Giudizio + + + OK 07/02/2019 12
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato ESPRESSIONE FINALE DEL RISULTATO Sul certificato è necessario riportare: - i giorni effettivi di durata dell analisi (esclusi i giorni di durata di eventuali trattamenti preliminari) - percentuale in numero di germinelli normali, anormali, semi freschi, duri, morti; le percentuali devono essere espresse da numeri interi, calcolati con arrotondamento per eccesso dei decimali uguali o superiori a 0,5 e per difetto dei decimali inferiori a 0,5; la somma deve essere pari a 100. * - il metodo di analisi ed i trattamenti speciali utilizzati * NB se la somma è diversa da 100 è necessario seguire un apposita procedura di arrotondamento 07/02/2019 13
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato * NB nel caso di somma diversa da 100: A) arrotondare il risultato dei germinelli normali (per eccesso se 0,5, per difetto se inferiore) B) fra i dati con cifra decimale 0,5, arrotondare per eccesso solo il dato con cifra decimale più alta; se il risultato è ora pari 100, la procedura è terminata Morti Norm. A 89 5 6 86 7 7 87 8 5 85 6 9 86,75 6,5 6,75 87 7 87 6 7 Arrotondamento matematico B 87 7 7 101! RISULTATO FINALE DA RIPORTARE SUL CERTIFICATO 07/02/2019 14
Analisi di germinabilità: calcolo ed espressione del risultato * NB nel caso di somma diversa da 100: A) arrotondare il risultato dei germinelli normali (per eccesso se 0,5, per difetto se inferiore) B) fra i dati con cifra decimale 0,5,, arrotondare per eccesso solo il/i dato/i con cifra decimale più alta; C) se il risultato è ancora diverso da 100, la priorità è la seguente: germinelli anormali, semi duri, semi freschi, semi morti. Morti Duri Norm. A B C 89 5 2 4 87 4 3 6 87 5 1 7 86 4 1 9 87,25 4,5 1,75 6,5 87 4 2 6 5 6 87 5 2 6 87 5 2 7 101! 87 4 2 6 99! RISULTATO FINALE DA RIPORTARE SUL CERTIFICATO 07/02/2019 15
ANALISI DELLA GERMINABILITA Rif. Norme ISTA 2019 Tab. 5C, Part 1 (2 tests of 400 seeds) Tabella 4 - da utilizzare per confrontare i risultati ottenuti da 2 analisi realizzate sullo stesso campione (in caso di mancato rispetto delle tolleranze nella 1 a analisi o a scopo di verifica) - la verifica deve riguardare tutte le categorie di semi e germinelli - se la differenza riscontrata, per qualsiasi categoria, fra i risultati delle 2 analisi è superiore alla tolleranza ammessa, le due analisi non sono compatibili e sono necessarie ulteriori analisi, sino ad ottenere risultati fra loro compatibili - se la differenza è invece inferiore alla tolleranza ammessa, le due analisi sono compatibili e si può calcolare il risultato finale. PROCEDURA: calcolare la media verificare il valore di tolleranza corrispondente confrontare con la differenza se in tolleranza, calcolare il risultato finale RISULTATO FINALE 07/02/2019 16
ANALISI DELLA GERMINABILITA Il risultato dell analisi di germinabilità non è considerato valido e le prove devono essere ripetute nei seguenti casi: a) - tolleranze fra le repliche non rispettate (tab. 3 dei M.U.) b) - errate condizioni di analisi c) - valutazione di semi e germinelli difficoltosa d) - dormienza e) - fitotossicità f) - sviluppo di patogeni Qualora si verifichino le condizioni elencate sopra, la rianalisi deve consentire di superare il problema riscontrato. Di norma è necessario o opportuno applicare un diverso metodo e l esito finale è rappresentato dal migliore risultato conseguito. In caso di rianalisi per mancata tolleranza (caso a), la riprova può essere realizzata con lo stesso o con diverso metodo. Nel primo caso, se i risultati delle due prove realizzate utilizzando lo stesso metodo sono compatibili fra loro, il risultato finale è dato dalla loro media. In caso contrario, è necessario effettuare una o più ulteriori analisi e considerare valido come risultato definitivo la media fra i risultati compatibili. Se invece si ricorre ad un diverso metodo (trattamenti speciali e/o condizioni diverse), la riprova viene considerata come un nuovo test e il suo risultato è il risultato finale, sempre che le repliche siano in tolleranza. In caso contrario, è necessario applicare quanto descritto sopra. 07/02/2019 17
RICERCA SEMI ESTRANEI Tabella 2 - da utilizzare per confrontare i risultati ottenuti da 2 diverse analisi (scopo: verifica) - può essere applicata ad ogni singola specie estranea, ma anche alla somma di tutti i semi estranei rinvenuti - se la differenza riscontrata fra i 2 risultati è superiore alla tolleranza ammessa, l analisi deve essere ripetuta - se la differenza è invece inferiore alla tolleranza ammessa, il risultato finale è dato dalla media dei valori ottenuti Rif. Norme ISTA 2019 Tab. 4A PROCEDURA: - calcolare la media - verificare il valore di tolleranza corrispondente - confrontare con la differenza 07/02/2019 18
Prova di esame: la serie di domande include la richiesta di calcoli e verifiche statistiche di risultati di analisi forniti (purezza specifica, germinabilità). - Portare calcolatrice - Tabelle di tolleranza fornite GRAZIE PER L ATTENZIONE 07/02/2019 19