INFORMAZIONI SULLE PRESTAZIONI AMBULATORIALI CONSULENZA GENETICA La consulenza genetica è un processo medico-clinico che ha lo scopo di definire il percorso diagnostico in caso di sospetto di malattia genetica. Il conseguente processo informativo e comunicativo è rivolto sia all individuo affetto o a rischio di patologia genetica che ai suoi familiari ed affronta la descrizione della malattia, le modalità di trasmissione, il rischio di ricorrenza e le possibili terapie, incluse le opzioni riproduttive. La consulenza è fornita direttamente dal Responsabile Medico del Servizio di Genetica oppure da un medico specialista in Genetica Medica il martedì e il giovedì dalle ore 8,30 alle 10.00 e il mercoledì dalle 14.30 alle 15.30, presso gli ambulatori aziendali. Per i pazienti ricoverati il medico curante richiede telefonicamente o mediante apposita richiesta la prestazione di consulenza genetica concordandola con il genetista medico. I pazienti esterni devo prenotare la consulenza genetica contattando direttamente prima il servizio di genetica e successivamente il Centro Unico Prenotazioni (CUP) telefonando al numero 800 638 638. Il giorno della consulenza i pazienti devono passare prima dal CUP per la definizione del ticket e successivamente devono presentarsi al servizio di genetica con l impegnativa del medico curante. I pazienti esterni che desiderano una consulenza privata devo prenotare la consulenza genetica contattando direttamente prima il servizio di genetica e successivamente il Centro Unico Prenotazioni (CUP) telefonando al numero 0372 405417. SCREENING PRENATALE PER SINDROMI DI DOWN E DIFETTI DEL TUBO NEURALE I programmi di screening prenatale richiedono un approccio multidisciplinare, che coinvolge ginecologi, ecografisti, laboratoristi e genetisti. Il ruolo laboratorio è quello di determinare i marcatori nel sangue materno, utilizzando metodi immunometrici in grado di fornire dati accurati e precisi. Viene successivamente effettuata la conversione dei dati analitici in Multipli della Mediana (MoM) per età gestazionale. La definizione del rischio (risk assessment) viene effettuata mediante metodiche multiparametriche secondo Wald. Lo screening per la sindrome di Down (DS) nel primo e nel secondo trimestre di gravidanza, nonchè i difetti del tubo neurale (DTN) nel secondo trimestre vengono eseguiti come segue: - Primo trimestre (test combinato) tra la 10 a e la 12 a settimana di gestazione mediante valutazione ecografica della translucenza nucale (NT) ed il dosaggio nel sangue materno di PAPP-A e free beta hcg. - Secondo trimestre tra la 15 e la 18 settimana di gestazione mediante dosaggio di due sostanze presenti nel sangue materno: frazione β libera della coriogonadotropina umana (free beta hcg) e alfa-feto proteina (AFP) Ogni test di screening non è diagnostico, ma rappresenta una stima individuale del rischio. In caso di screening prenatale positivo la conferma diagnostica avviene mediante diagnosi prenatale invasiva attraverso l esame del cariotipo fetale (amniocentesi o villocentesi). Il test viene eseguito dietro presentazione di un modulo di raccolta dati anamnestici compilata dal medico curante. E possibile consulenza sia pre che post-test.
CITOGENETICA PRENATALE Le indagini citogenetiche prenatali vengono eseguite su cellule da liquido amniotico o da villi coriali prelevate mediante tecniche di amniocentesi e villocentesi. Tali indagini hanno principalmente lo scopo di verificare la presenza di anomalie cromosomiche. Il test viene suggerito nei seguenti casi: età materna superiore a 35 anni precedente gravidanza con anomalia cromosomica anomalia cromosomica rilevata in uno dei genitori positività al test di screening anomalie fetali riscontrate mediante analisi ultrasonografiche La procedura prevede un colloquio di consulenza genetica precedente all esecuzione del prelievo; tale consulenza è disponibile anche successivamente alla consegna del referto. Il prelievo di liquido amniotico (amniocentesi) viene effettuato il lunedì presso il servizio di Ostetricia del Presidio Ospedaliero di Cremona (POC) e il martedì presso il Presidio Ospedaliero Oglio Po (POOP); il prelievo di villi coriali (CVS) viene effettuato il martedì nelle UO di Ostetricia in entrambi i presidi ospedalieri. N.B. L amniocentesi e la villocentesi sono disponibili anche al di fuori delle indicazioni codificate, secondo le medesime modalità, ma con un contributo alla spesa sanitaria. CITOGENETICA POSTNATALE La determinazione del cariotipo viene comunemente eseguita su colture di linfociti da sangue periferico. L analisi citogenetica postnatale viene raccomandato in caso di: sospetto di patologia cromosomica genitori di figli con difetti cromosomici sindrome malformativa/dismorfica ritardo mentale pazienti con ritardo mentale non sindromico abortività ripetuta sterilità di coppia pazienti con oligo-azospermia Il prelievo deve essere prenotato presso il servizio di genetica e viene effettuato nei giorni di lunedì e martedì. CITOGENETICA ONCOEMATOLOGICA La determinazione del cariotipo su sangue midollare viene eseguita in corso di malattie ematologiche. Il test viene eseguito inoltre per il monitoraggio dei pazienti in terapia o trapiantati. Il prelievo deve essere prenotato presso il servizio di genetica e viene effettuato dal lunedì al giovedì. CITOGENETICA MOLECOLARE Le indagine di citogenetica molecolare (Fluorescence in Situ Hybridization -FISH) vengono eseguite in citogenetica prenatale, postnatale e oncoematologica in risoluzione di quesiti diagnostici per le quali l analisi citogenetica standard e' risultata insufficiente. Le applicazioni diagnostiche eseguite dal nostro servizio sono: diagnosi delle sindromi da microdelezione
studio delle delezioni subtelomeriche caratterizzazione di marker cromosomici analisi citogenetiche prenatali caratterizzazione di aberrazioni cromosomiche in ambito oncoematologico Diagnosi delle sindromi da microdelezione Le microdelezioni sono anomalie cromosomiche che comportano perdita di materiale genetico non rilevabili attraverso l indagine citogenetica convenzionale. Alla presenza di microdelezioni in regioni cromosomiche specifiche, sono associate numerose sindromi con quadri clinici malformativi e/o di ritardo mentale. Tali microdelezioni sono individuabili mediante tecnica FISH (fluorescent in situ hybridization) su colture cellulari da sangue periferico, liquido amniotico, villi coriali Sono disponibili sonde molecolari sequenza-specifiche per: sindrome di Di George-velocardiofacciale (DGS/VCF) sindrome di Angelman sindrome di Prader-Willi sindrome di Smith Magenis sindrome di Miller-Dieker sidrome di Wolf-Hirschhorn sidrome del Cri-du chat sindrome di Williams Studio delle delezioni subtelomeriche I telomeri costituiscono le estremità dei cromosomi e ne garantiscono la stabilità. In posizione prossimale a queste sequenze esistono regioni specifiche per ogni cromosoma e la presenza di riarrangiamenti in queste zone può essere associata a ritardo mentale, malformazioni congenite. Il test viene suggerito per: ritardo mentale idiopatico ricerca di riarrangiamenti cromosomici criptici anomalie congenite abortività ripetuta caratterizzazione di marker cromosomici caratterizzazione di aberrazioni cromosomiche Il test può essere eseguito anche in diagnosi prenatale per confermare o escludere il sospetto di riarrangiamenti cromosomici. Il test viene eseguito con sonde molecolari subtelomeriche (Flint, 1995) su preparati cromosomici secondo la tecnica FISH (fluorescent in situ hybridization) oppure secondo la tecnica MLPA. Caratterizzazione di marker cromosomici I marker cromosomici sono cromosomi strutturalmente anormali, di origine non definita. L identificazione di tali cromosomi è possibile mediante l utilizzo di tecniche di citogenetica molecolare (ad esempio FISH) ed è di fondamentale importanza clinica nelle correlazioni cariotipo-fenotipo. Caratterizzazione di aberrazioni cromosomiche in ambito oncoematologico La presenza di specifiche anomalie cromosomiche rilevate mediante tecnica FISH o citogenetica convenzionale può decidere della gestione del paziente compresi la diagnosi o la conferma della stessa, il trattamento e la prognosi. Sono disponibili sonde molecolari sequenza specifica per la individuazione di riarrangiamenti cromosomici specifici in corso di: leucemia mieloide acuta(aml)/mielodispalsia(mds) leucemia linfatica cronica (CLL)
Mieloma multiplo (MM) Leucemia mieloide cronica Linfoma follicolare Linfoma mantellare Linfoma marginale Array-CGH L array CGH (array- Comparative Genomic Hybridization) è una tecnica che consente la valutazione dell intero assetto cromosomico mediante la tecnica dell ibridazione genomica comparativa su microarray. Tale procedura permette di identificare anomalie cromosomiche di tipo numerico (aneuploidie) o anche delezioni o amplificazioni di piccole porzioni cromosomiche. Il principio su cui si basa la tecnica dell Array CGH è la coibridazione del DNA in esame o DNA test e del DNA genomico di riferimento proveniente da un soggetto sano, marcati in maniera differenziale con molecole fluorescenti, su un microarray di cloni genomici. Il microarray è costituito da un supporto solido, su cui vengono disposti (spottati) una serie di cloni (oltre 5000) corrispondenti a piccole porzione di ciascun cromosoma, fino a ricomprendere l intero assetto cromosomico umano, raggiungendo una risoluzione di circa 150 Kb. L analisi array-cgh viene raccomandata in diagnosi postnatale in caso di: sindrome malformativa/dismorfica ritardo di sviluppo, ritardo mentale, autismo L analisi array-cgh viene raccomandata in diagnosi prenatale in caso di riarrangiamenti cromosomici de novo o in presenza di quadri malformativi fetali con cariotipo normale. GENETICA MOLECOLARE L analisi molecolare su sangue periferico e tessuti (anche inclusi in paraffina) viene effettuata per le seguenti patologie: Malattie genetiche Fibrosi cistica (CFTR) Sindrome X fragile (FMR-1) Alzheimer (apoe e PS1) Sterilità/anomalie della differenziazione sessuale (SRY) Acondroplasia/ipocondroplasia (FGFR3) Sindrome da microdelezione/ritardo mentale Sindrome di Beckwith-Wiedemann Sindrome di Silver-Russell Malattia di Charcot-Marie Tooth/Neuropatia ereditaria (HNPP) Atrofie muscolari spinali Sindromi MED12-correlate: sindrome di Opitz-Kaveggia (FG tipo 1) e sindrome di Lujan-Fryns Emocromatosi Test di predisposizione genetica allo sviluppo di patologie tromboemboliche: Fattore II della coagulazione Fattore V della coagulazione Test di predisposizione genetica allo sviluppo dei tumori:
BRCA1 e BRCA2/Cancro mammella-ovaio PALB2 (Partner di localizzazione nucleare di BRCA2) P53 CHEK2 MLH1/MSH2/MSH6 (cancro ereditario del colon) APC/Poliposi Adenomatosa Familiare (FAP) MUTYH/ Poliposi Adenomatosa Familiare (FAP) e Poliposi Adenomatosa Familiare Attenuata (AFAP) HOXB13 (cancro familiare prostata) CDKN2A (melanoma familiare) POLE/POLD1 (poliposi/cancro colon) Diagnosi molecolare di oligo/azoospermia Microdelezione cromosoma Y Test di farmacogenetica/valutazione di marcatori biologici molecolari diagnostici e prognostici Risposta terapeutica a gefitinib/erlotinib (EGFR) Effetti collaterali da IRINOTECAN (UGT1A1) Resistenza all Aspirina Risposta terapeutica a CETUXIMAB/PANITUMUMAB (Kras-BRAF-PIK3CA) Risposta terapeutica a farmaci metabolizzati da enzimi del citocromo P450 Instabilità dei microsatelliti BCR/ABL t (9;22) BCL1 t (11;14) BCL 2 t (14;18) PML-RARa t (15;17) JAK2 mutazione V617F Definizione del rischio di difetto del tubo neurale: Metabolismo dei folati (CBS - MTHFR C677T - MTHFR A1298C - MTRR - MTHFD1 - RFC1) Per l indagine della Sindrome dell X fragile è necessario contattare il servizio di genetica per l appuntamento. Per tutti gli altri esami si effettua con un prelievo di sangue al centro prelievi dell ospedale senza appuntamento con impegnativa del medico curante.