Studio NTCC2 (Nuove Tecnologie per il Cancro Cervicale 2) 2 Risultati Preliminari Anna Gillio Tos, Elena Allia, Laura De Marco, Centro Unificato Screening Cervico Vaginale SGAS, Torino AOU Città della Salute e della Scienza S.C. Anatomia ed Istologia Patologica Della Donna, Del Bambino E Dei Tumori Rari WORKSHOP PROGR. REGIONALE DI SCREENING PER IL CERVICOCARCINOMA PREVENZIONE SERENA 21 NOVEMBRE 2016
Studio NTCC2 (Nuove Nuove Tecnologie per il Cancro Cervicale 2) 2 P.I. Paolo Giorgi Rossi (AUSL Reggio Emilia); Maria Benevolo (IFO Roma) Obiettivo migliorare la prestazione dello screening cervicale ovviare al limite test HPV : scarsa specificità individuare nuove tecnologie di triage di HPV pos da affiancare alla citologia di triage BIOMARCATORI di RISCHIO PROGRESSIONE TUMORALE (virus) (cellula ospite)
HPV mrna. Razionale biologico DNA Divisione Cell Basali infettate da HPV Infezione produttiva TRANSIENTE mrna proteine E6/E7 E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR E6 ed E7 proteine oncogene Infezione trasformante Infezione PERSISTENTE trasformante Depuydt et al. Cancer Med 2015
HPV mrna. Razionale Biologico Epitelio cervicale normale Cellule cervicali HPV- infette Carcinoma cervicale E6/E7 mrna levels
HPV mrna. Razionale Biologico HPV DNA indica la presenza di HPV mrna di E6/E7 indica oncogeni di HPV attivi le onco-proteine E6/E7 inducono trasformazione cellulare DNA indica la presenza di HPV HPV mrna di E6/E7 indica la presenza di HPV attivo Test disponibile: Aptima [GenProbe GenProbe Hologic: 14 tipi HPV] Amplificazione Mediata da Trascrizione soglia di rischio
p16 / ki67. Razionale Biologico p16 Inibitore della chinasi ciclina dipendente 2 proteina tumor suppressor Non espressa o poco espressa in cell normali mature ki67 Proteina associata con attività proliferativa Non espressa o poco espressa in cell normali mature Test disponibile: CINTEC Plus [Roche Roche: Kit che evidenzia entrambi] Rilevazione in immunocitochimica
P16/ki67. Razionale Biologico DNA E6 E7 p53 prb mrna proteine Controllo del ciclo cellulare E6/E7 E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR E6 ed E7 proteine oncogene
P16/ki67. Razionale Biologico prb E2F promotore p16 Cellula quiescente prb E2F promotore p16 Cellula proliferante HPV E6/E7E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR prb E7 E2F promotore p16 p16 p16 p16p16 p16p16 p16 Cellula HPV + inf trasformante prb = proteina del Retinoblastoma E2F = fattore di trascrizione
p16 / ki67 Colorazione con CINTEC Plus citoplasma marrone p16 nucleo rosso ki67 Il test di colorazione ICC con CinTecPlus è morfologia indipendente Il campione è dato positivo con 1 o più cell con doppia colorazione 9
NTCC2 Obiettivi HPV mrna E6/E7 p16 / ki67 Studio di indicatori di rischio Triage donne HPV+ donne non a rischio : no colposcopia donne a rischio maggiore: colposcopia Limitare approfondimenti inutili (rischio sovradiagnosi e sovratrattamento) Obiettivi specifici Outcome: CIN2+ accuratezza dei test HPV mrna e p16/ki67 e loro VPN prospettico a 5 anni specificità test HPV mrna (1000 HPV-DNA neg) Detection Rate CIN2+ cumulativa a 5 anni a fronte di un test HPV pos e un marcatore (HPV mrna o p16/ki67) ) neg potenziale riduzione sovradiagnosi con triage citologico o con HPV mrna o con p16/ki67 vs invio in colpo diretto
NTCC2 Disegno dello Studio Flow chart target donne HPV pos
NTCC2 Metodi Indicatori di rischio: HPV mrna E6/E7 p16 / ki67 virus attivo test molecol Aptima proliferazione e potenziale progressione Coloraz. ICC CinTecPlus Cosa comporta per le donne dello studio la positività a questi 2 indicatori? donne HPV + al reclutamento nulla, seguono DGR donne HPV + alla rip a 1 anno colpo, come in DGR donne HPV al reclutamento colpo
NTCC2 Reclutamento Abruzzo L Aquila ASL 1 Lazio Roma Roma G Piemonte Torino CPO CUSCV Veneto Este Monselice ULSS 17 Toscana Firenze ISPO Emilia R. Reggio Emilia AUSL R.E. Umbria Perugia USL1 - Umbria 1 Trentino Trento Az Prov Servizi Sanitari 60.000 Criteri di eligibilità: donne con età 25-59 59 (o 30-59) 59), residenti in area screening Criteri di esclusione: gravidanza, lesioni nei 5 aa precedenti, cito inadeg Modalità invito: lettera e informativa in accompagnamento alla lettera di invito allo screening con test HPV consenso informato Campione: aliquota residua a valle di test HPV pos dal prelievo in PreservCyt (ThinPrep)
NTCC2 Analisi di Laboratorio HPV mrna test APTIMA centralizzazione in 2 Laboratori 1) Torino - Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze -ISPO p16/ki67 colorazione immunocitochimica CinTec Plus allestimento preparati e colorazioni 1) Torino Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze ISPO 3) Perugia USL1 - Umbria 1 4) Roma IFO -Ist Naz Tum Reg El Letture 1) Torino Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze ISPO 3) Perugia USL1 - Umbria 1 4) Roma IFO -Ist Naz Tum Reg El 5) Roma S. Andrea 6) Este Mons ULSS 17 7) Reggio Em AUSL R.E. 8) Trento Az Prov Servizi Sanitari 9) L AquilaL ASL1
NTCC2 Stato dell arte Reclutamento Disegno Agosto 31 Gennaio studio 2016 2017 Abruzzo L Aquila ASL 1 6000 -- -- Lazio Roma Roma G 11000 -- -- Piemonte Torino CPO- CUSCV 12500 2920 6000 Veneto Este Monsel. ULSS 17 9500 10074 10074 Toscana Firenze ISPO 9000 8041 12000 Emilia R. Reggio Em. AUSL R.E. 6000 -- -- Umbria Perugia USL1 - Umbria 1 -- 15500 15500 Trentino Trento Az Prov Servizi Sanitari 6000 2000 4000 60000 38535 47574 47574 (79%) Fine reclutamento a Torino: 311 gennaio 2017
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Reclutamento I livello [%] [5.9] [9.9] [6.4] [11] [7.4] II livello
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Test HPV mrna 7.4% HPV-DNA pos Triage cito, 27% cito pos pos 2% invio in colpo 5% 67.3 5% mrna pos 5% invio in colpo test mrna: come test primario guadagno in specif, ma in sensib?? come test triage, meglio la citologia
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 HPV mrna in donne HPV-DNA pos per età Non si osserva effetto dell età sulla positività ad HPV mrna
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Specificità test HPV mrna (1000 HPV-DNA neg) se si adottasse il test HPV mrna come test primario di screening HPV-DNA Negativi stima HPV HPVmRNA pos é 6,5% HPV-DNA pos é 7,4% 6,5% (5% tra HPV-DNA pos + 1,5% tra HPV-DNA neg) Sembra esserci un guadagno in specificità, ma necessaria fine FU per capire impatto sulla sensibilità
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Positività ad HPV mrna e tipo virale (test di screening Cobas) Positività ad mrna: maggiore con HPV16, lievemente maggiore con HPV18
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Positività ad HPV mrna e Carico Virale (Ratio con test di screening HC2) Positività ad mrna: forte aumento all aumentare del carico virale (Ratio HC2)
NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 p16/ki67 : colorazioni con CinTec Plus e letture in corso Studio di concordanza interosservatore: 42 vetrini letti in 9 centri 886 letture Buona riproducibilità tra i lettori, che aumenta tra lettori esperti
NTCC2 Conclusioni Studio ancora in corso aspettiamo risultati definitivi al termine del reclutamento e delle analisi Conduzione di studi nel setting dello screening consente - seguire le donne al FU - l acquisizione di informazioni accurate sull efficacia longitudinale degli indicatori proposti Grazie per l attenzionel