Molluschi bivalvi vivi: sempre in allerta Complesso Agave Hotel -SS 7/ IV Domizian 14 novembre 2017 EPATITE A E NOROVIRUS

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1 Molluschi bivalvi vivi: sempre in allerta Complesso Agave Hotel -SS 7/ IV Domizian 14 novembre 2017 EPATITE A E NOROVIRUS

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6 Lo Palco P, J Vir Hepat 2005

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10 Sopravvivenza dei virus nell ambiente in letteratura vengono riportati tempi di sopravvivenza virale di gg in acqua di rubinetto, gg in acqua di mare, gg nel suolo e fino a 190 gg nei MEL. I virus che giungono al mare attraverso le feci vengono concentrati negli organismi filtratori e il corpo dei MEL esercita su di essi un effetto protettivo

11 Circa 2 milioni di abitanti Con, inoltre, un consistente disordine urbanistico GOLFO DI NAPOLI

12 18 febbraio 2015: segnalazione di due casi di epatite (ASL Napoli 2 Nord ) l indagine epidemiologica indirizza verso il consumo di frutti di mare acquistati in una pescheria

13 cronologia 19/02/2015 : prelievo campioni in pescheria 20/02/2015 : analisi positive per HAV 20/02/2015 : individuazione fornitore e produttore- prelievo campioni e richiesta analisi HAV + NOV 22/02/2015 : tutti i campioni risultano HAV e NOV positivi (conferma ISS)

14 SI DISPONE: campionamento di molluschi nelle zone di produzione e il blocco della raccolta. Successivamente viene inoltrata a tutti gli ospedali la raccomandazione di segnalare tutti i casi di HAV e inviare all ISS il materiale necessario per gli opportuni approfondimenti diagnostici LA REGIONE AVVIA UN PIANO DI MONITORAGGIO DELLE AREE DI PRODUZIONE

15 Dati dell Osservatorio Epidemiologico su HAV in Campania Fasce d'età Totale N. casi Frequenza 9% 8% 15% 14% 13% 18% 11% 5% 3% 3% 100%

16 IN AGGIUNTA AI CONTROLLI EFFETTUATI IN BASE AL PIANO REGIONALE, VENGOLO PRELEVATI CAMPIONI ANCHE PER ALTRE ATTIVITÀ DI CONTROLLO

17 Totale campioni esaminati ed analisi eseguite CAMPIONI ANALISI NUMERO CAMPIONI PIANO DI MONITORAGGIO 251 EXTRA PIANO DI MONITORAGGIO 88

18 SUDDIVISIONE PER SPECIE CAMPIONATA N. CAMPIONI % VONGOLE cannolicchi lupini specie % mitili tartufi tellina ostrica cozze 79,4 cannolicchi 5,62 lupini 4,49 telline 3,75 vongole 3,37 ostrica 2,25 tartufi 1,12

19 Risultati monotoraggio aree di produzione: Mytilus galloprovincialis 5% 17% 3% HAV+; HAV+; NOV GII+; 39% 12% HAV+;NOV GI+;NOV GII+; NOV GI+; 13% 8% 3% NOV GI+;NOV GII+; NOV GII+; Negativi non analizzabili Risulatati % HAV+; 17 HAV+; NOV GII+; 3 HAV+;NOV GI+;NOV GII+; 12 NOV GI+; 3 NOV GI+;NOV GII+; 8 NOV GII+; 13 Negativi 39 Non analizzabili 5

20 Comunicato n. 199 Data del comunicato 30 settembre 2013 Epatite Virale "A" e consumo di frutti di bosco surgelati. Aggiornamenti e raccomandazioni del Ministero RACCOMANDAZIONI PER I CONSUMATORI Si raccomanda di consumare i frutti di bosco surgelati solo ed esclusivamente previa cottura. Il virus dell epatite A, infatti, sopravvive a basse temperature, ma viene rapidamente inattivato dal calore. Per esempio, facendo bollire i frutti di bosco per almeno 2 minuti viene garantita la salubrità dell alimento. la cottura a una temperatura di 100 C per 2 minuti in seguito alla completa apertura delle valve di tutte le vongole è sufficiente a inattivare completamente il virus dell epatite A nelle vongole infettate sperimentalmente. Questa temperatura generalmente corrisponde al tempo necessario per l apertura della maggior parte delle vongole sottoposte a cottura.

21 Indicazione valida nei MBV solo verso NoV ma non per l epatite A

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23 RISULTATI HAV

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26 ANALISI QUANTITATIVA IZSM: Il LOD del metodo oscilla tra 4.4 e 7.8 copie genomiche per reazione

27 Approfondimenti sugli isolati dai mitili e dall uomo Piena concordanza

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29 PRINCIPI ddpcr Standard PCR Visualizzazione dei prodotti di amplificazione a fine rezione qpcr Quantizzazione degli amplificati in tempo reale ddpcr Una volta eseguita la PCR su un termociclatore, le goccioline ottenute da ciascun campione vengono analizzate singolarmente sullo strumento QX100 Droplet Reader. Il conteggio delle goccioline PCR positive e PCR negative permette la quantificazione assoluta del DNA target in formato digitale.

30 REAL-TIME PCR

31 Processo analitico ddpcr

32 Bio-Rad QX100 System Processo analiticoddpcr

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34 RISULTATI HAV

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43 384 campioni di frutti di mare specie n. campioni % Cozze ,6 Cannolicchi 41 10,7 Vongole 33 8,6 Telline 12 3,1 68 campioni di acqua di mare n. campioni % Sbocchi di scarichi 29 42,6 Allevamenti mitili 39 57,4

44 RISULTATI specie n. campioni Campioni positivi % Cozze ,7 Cannolicchi ,9 Vongole Telline n. campioni Campioni positivi % Sbocchi di scarichi Allevamenti mitili ,8

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