Modalità di prelievo, conservazione e conferimento dei campioni
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- Vincenzo Cavaliere
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1 Modalità di prelievo, conservazione e conferimento dei campioni L applicazione di una corretta pratica di campionamento è essenziale per ottenere risultati affidabili nelle successive fasi analitiche. Affinché i risultati siano tecnicamente validi, vi segnaliamo che non è possibile analizzare: Un campione mal conservato; Consegnato in quantità insufficiente (*); Contaminato; Privo d informazioni che ne garantiscono la provenienza. Per questo presentiamo, molto schematicamente, alcune istruzioni per prelevare, conservare e consegnare i campioni che volete fare analizzare. La condizione essenziale che determina l accettabilità di un campione è la temperatura di consegna: Campione termicamente non condizionato 1-8 c -15 c Idoneità del campione Un campione è idoneo quando non ha subito fenomeni di alterazioni dal momento del prelievo alla consegna; È mantenuto a temperature specifiche; È stato opportunamente confezionato; È rispondente ai requisiti per le indagini cui dovrà essere sottoposto; È accompagnato da specifica richiesta completa di tutte le informazioni necessarie per l accettazione. Nessuna regola standardizzata può in ogni caso prendere il posto del buon senso e dell esperienza degli operatori. (*) Le quantità per i campioni ufficiali sono riportate nei relativi piani. Per i campioni non ufficiali di sicurezza alimentare: - analisi chimiche: il campione deve essere costituito da almeno 300 gr; - analisi microbiologiche: il campione deve essere almeno di 50 gr per microrganismo da ricercare. Per ogni eventuale chiarimento o quesito relativo al campionamento contattare l accettazione. 1
2 Sanità animale Tutti i campioni devono essere scortati da specifica richiesta nella quale oltre a tutti i dati necessari per l accettazione e la registrazione del campione devono essere riportati i dati anamnestici. Siero Sangue - Plasma Esami sierologici Sangue in toto non emolizzato Siero o Ricerca emoparassiti Parametri chimico-clinici e dosaggi ormonali Esame emocromocitometrico Glicemia Sangue addizionato di anticoagulante e conferimento entro le 72 ore Sangue non emolizzato alla presenza di Coagulo, conferimento entro 24 ore dal prelievo Sangue addizionato di anticoagulante (Litio eparina). Le provette devono essere refrigerate e recapitate al più presto in laboratorio (entro24 ore); è, infatti, necessario separare il plasma/siero quanto prima per bloccare quei processi che possono modificare le concentrazioni dei metaboliti presenti nella parte liquida. Siero, o plasma da litio eparina Sangue addizionato di anticoagulante EDTA, conferimento entro 24 ore dal prelievo (non congelare) Sangue, conferimento entro 3 ore Dal prelievo Siero o plasma Esami virologici Sangue addizionato di anticoagulante, Conferimento entro 24 ore dal prelievo (se destinato a indagini molecolari non impiegare eparina) o (*) La quantità minima del campione di sangue conferito deve consentire l estrazione di almeno 2 ml di siero. Contattare l accettazione per ogni eventuale dubbio. 2
3 Si riportano alcune indicazioni sull uso delle provette di uso frequente: Tipo di provetta Manualità da applicare Prodotto finale Tipo di accertamento Senza anticoagulante (tappo rosso ) Dopo il prelievo non capovolgere la provetta e lasciarla riposare a temperatura ambiente. Poi conservare in frigorifero Siero Ricerca di anticorpi Esami biochimici Con anticoagulante EDTA K2 (tappo viola ) Dopo il prelievo capovolgere la provetta 4-5 volte. Poi conservare in frigorifero Sangue intero Plasma Anello di leucociti Ricerca agente patogeno (isolamento e/o PCR) Emocromo Con anticoagulante LITIO EPARINA (tappo verde) Dopo il prelievo capovolgere la provetta 4-5 volte. Poi conservare in frigorifero Sangue intero Plasma Esami biochimici Esami tossicologici Dosaggio -interferon Esami citologici con citofluorimetro Organi - porzioni anatomiche Esami batteriologici In contenitore a tenuta ermetica, Esami Istologici In contenitore a tenuta ermetica, prelevato entro ore dal decesso, In contenitore a tenuta ermetica, in soluzione di formalina tamponata (rapporto 1/10 tra campione/liquido fissante) Esami virologici In contenitore a tenuta ermetica, In contenitore a tenuta ermetica, conferimento oltre 24 ore dal prelievo 3
4 Tamponi d 0rgano Esami batteriologici senza terreno di trasporto se conferiti entro 2 ore dal prelievo Esami virologici Metrite Equina Contagiosa (CEM) con terreno di trasporto se conferiti oltre 2 ore dal prelievo In contenitore sterile a tenuta ermetica con tappo a vite con terreno di trasporto per colture cellulari, oppure con soluzione fisiologica antibiotata, conferimento entro 24 ore dal prelievo In contenitore sterile a tenuta ermetica con tappo a vite con terreno di trasporto per colture cellulari, oppure con soluzione fisiologica antibiotata, conferimento oltre 24 ore dal prelievo Tampone uretrale o utero-vaginale in contenitore sterile a tenuta ermetica con tappo, con terreno di trasporto al carbone attivo (colore nero), conferimento entro 48 ore dal prelievo Feci -Urine Esami batteriologici e virologici In contenitore possibilmente sterile a tenuta ermetica con tappo a vite, Esami parassitologici In contenitore possibilmente sterile a tenuta ermetica con tappo a vite, conferimento oltre le 24 ore dal prelievo In contenitore a tenuta ermetica con tappo a vite 4
5 Liquidi Biologici Esami batteriologici e virologici Trichomonas bovini conferimento oltre 24 ore dal prelievo Lavaggio prepuziale in contenitore sterile a tenuta ermetica, conferimento entro 24 ore dal prelievo Carcasse Esami anatomopatologici grossi animali Ove possibile contenitore o sacco a tenuta, conferimento nel più breve tempo possibile dal decesso Esami anatomopatologici piccoli animali Ove possibile contenitore o sacchi a tenuta, conferimento nel più breve tempo possibile dal decesso o NB. Nel corso dell Esame Anatomo Patologico possono essere prelevati dagli operatori dell Istituto organi e/o liquidi biologici per l effettuazione di ulteriori analisi necessarie a formulare la diagnosi. Insetti Identificazione In contenitore a tenuta con il loro substrato, se vitali In contenitore a tenuta, in alcol etilico 70% non denaturato, se morti 5
6 S Campioni per esame tossicologico in caso di sospetto avvelenamento: fornire adeguate informazioni riguardo alla storia del caso, i sintomi, le lesioni post-mortem, il luogo (importante per l eventuale bonifica).tali campioni devono arrivare per il tramite delle Aziende sanitarie o organi di polizia. Tipo campione Modalità di conferimento Modalità di conservazione Sospette Esche Usare contenitori a chiusura ermetica con etichetta identificativa posta all esterno, entro 24 ore dal prelievo Contenuto gastrico /vomito Organi Usare contenitori a chiusura ermetica con etichetta identificativa posta all esterno,oltre 24 ore dal prelievo Usare contenitori a chiusura ermetica con etichetta identificativa posta all esterno, entro 24 ore dal prelievo Usare contenitori a chiusura ermetica con etichetta identificativa posta all esterno, oltre 24 ore dal prelievo confezionati con un sistema a tre buste chiuse in modo da tale da evitare la fuoriuscita di liquidi biologici; entro le 24 ore confezionate con un sistema a tre buste chiuse in modo da tale da evitare la fuoriuscita di liquidi biologici; entro le 24 ore Latte Esami batteriologici In contenitore sterile a tenuta ermetica; conferimento entro 48 ore dal prelievo In contenitore sterile a tenuta ermetica; conferimento oltre 48 ore dal prelievo Carica batterica conferimento entro 36 ore dal prelievo Sostanze Inibenti Parametri qualitativi Grasso-Proteine-Lattosio (GPL), Cellule somatiche, urea, caseine ecc. conferimento entro 48 ore dal prelievo conferimento oltre 48 ore dal prelievo In specifico contenitore senza conservante, entro 24 ore dal prelievo In specifico contenitore con conservante, conferimento oltre le 24 ore dal prelievo (non oltre 4gg.) 6
7 SICUREZZA ALIMENTARE Tutti i campioni di alimenti (per l alimentazione umana e animale), ufficiali e non devono essere scortati da specifica richiesta nella quale, oltre alle informazioni necessarie per l accettazione e registrazione, devono essere riportate anche le analisi richieste. I campioni prelevati a seguito di tossinfezioni alimentari devono pervenire all Istituto nel più breve tempo possibile e devono essere accompagnati da specifica richiesta nella quale siano riportati anche i dati anamnestici. Il numero delle aliquote e delle unità campionarie per i campioni ufficiali è riportato nella specifica normativa. Il campione ufficiale è segregato nei seguenti casi: Carenze nella compilazione dei verbali di prelievo; Non corrispondenza tra i dati riportati sul cartellino dei sigilli e quelli del verbale; Mancanza del verbale o impossibilità di accedere allo stesso; Numero non regolare delle aliquote del campione; Numero non regolare delle unità campionarie costituenti l aliquota; Aliquote risultate manomesse alla consegna; Dubbi sulla richiesta delle prove da effettuare; Mancanza dei sigilli; Il campione è registrato e posto in segregazione alla temperatura idonea, in attesa di chiarimenti. Il Responsabile dell Accettazione avverte l Organo prelevatore dei problemi insorti e lo informa che, trascorsi 10 giorni senza aver ricevuto le informazioni richieste, il campione sarà alienato. Ai campioni non ufficiali inerenti alla Sicurezza Alimentare cui sono richieste analisi di tipo microbiologico (ove la temperatura potrebbe influenzare il dato analitico), l Accettazione, al momento della consegna, rileva la temperatura del contenitore di trasporto con un termometro tarato. In base al valore di temperatura rilevato, l operatore dell Accettazione, alla presenza del cliente/utente, definisce l accettabilità (favorevole o sfavorevole) del campione. I criteri di accettabilità per i campioni in cui risulta critica la temperatura di trasporto sono riportati nella seguente tabella di riferimento. Matrice Temperatura accettabile Norma di riferimento Prodotti stabili temperatura ambiente ISO 7218 prodotti non stabili Da 1 C a 8 C ISO 7218 Prodotti surgelati e congelati Sotto i -15 C ISO 7218 Tamponi da carcasse +4 C ISO Tamponi superfici +4 C ISO
8 Qualora le condizioni indicate non siano rispettate, quindi con parere di accettabilità sfavorevole, il cliente/utente potrà scegliere di: 1. Non fare eseguire l analisi. In questo caso l accettazione, finita la registrazione, emetterà un rapporto di non idoneità, prodotto dal sistema SIGLA. 2. Il cliente potrà scegliere di far eseguire l analisi purché tecnicamente possibile. Nel caso di accettabilità sfavorevole la scelta del cliente dovrà essere riportata e da lui firmata nel MOD. Q.019. Qualora il campione sia consegnato da un corriere, l accettazione comunica al cliente la condizione sfavorevole e quest ultimo decide se procedere all analisi. In caso di mancata risposta entro la giornata, il campione (deperibile) è comunque analizzato e la temperatura non conforme viene riportata nel rapporto di prova nel campo identificativo campione. Perugia, 31 Ottobre
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