Paolo Chiarugi. U.O. Analisi Chimico-Cliniche. AOUP Pisa
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- Guido Campana
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1 VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2014 Paolo Chiarugi U.O. Analisi Chimico-Cliniche AOUP Pisa
2 Proteine Specifiche o Aspecifiche? PROTEINA Val.Rif. (g/l) Sintesi Alfa 1 - Antitripsina 0,9-2,0 Fegato Alfa 1 Glicoproteina Acida 0,5-1,2 Fegato Alfa 2 - Macroglobulina 1,3 3,0 Fegato Aptoglobina 0,3 2,0 Fegato Beta 2 - Microglobulina 0,0008 0,0025 Ubiquitaria C3 0,9 1,8 Fegato C4 0,1 0,4 Fegato Ceruloplasmina 0,2 0,6 Fegato Cistatina C 0,0006 0,0014 Ubiquitaria Fattore Reumatoide <10 UI/mL S.I. IgA 0,7 4,0 S.I. IgE <0,00043 S.I. IgG 7 16 S.I. IgM 0,4 2,3 S.I. Kappa-Catena Leggera 2-4 S.I. Lambda-Catena Leggera 1 2,4 S.I. Proteina C Reattiva < 0,005 Fegato Prealbumina 0,2 0,4 Fegato Proteina Legante il Retinolo 0,03 0,06 Fegato Recettore Solubile Transferrina 0,0008 0,0018 Ubiquitaria Transferrina 2,0 3,6 Fegato
3 VEQ Proteine Specifiche
4 PCR 95,75 Transferrina 83,25 Frequenza di dosaggio Fattore Reumatoide IgA IgG IgM C4 61,25 78,5 78,5 77,5 80,5 C3 61,25 Alfa 1 Glicoproteina Acida 60,5 Beta 2 - Microglobulina 45,75 Alfa 1 - Antitripsina IgE Aptoglobina Lambda - Catena Leggera Kappa - Catena Leggera Prealbumina Ceruloplasmina Cistatina C Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG Alfa 2 - Macroglobulina 5,25 5,25 5,25 4,75 20,25 20,25 19,25 18,75 31,25 29,5 34,5 400 CENTRI PARTECIPANTI, 16 REGIONI: Lombardia: 186 Toscana: 95 Basilicata: 33 Marche: 23 Piemonte: 21 Lazio: 18 Recettore Solubile Transferrina 4,25 Proteina Legante Retinolo
5 Metodi usati test METODO % VARIANTI STRUMENTO e/o REAGENTE + USATO AGGLUTINAZIONE 0,7 11 SIEMENS CARD/RIFRATT. 0,1 20 CARD SENTINEL CHEMILUM. 1,8 15 IMMULITE 2000 MEDICAL SYSTEM COLORIMETRICO 0,03 1 CHEMACOMP 100 G.D. DRY CHEMISTRY 0,4 3 VITROS ORTHO ELFA 1,2 1 VIDAS BIOMERIEUX IMMUNODIFF. 2,5 15 SIEMENS IMMUNOENZ. 0,2 7 ALISEI RADIM IMMUNOFLUOR. 0,6 5 AIA TOSOH IMMUNOPREC. 0,1 5 KONELAB BIODEVICE IMMUNOTURB. 66,0 110 COBAS ROCHE MEIA 0,1 2 AXSYM ABBOTT NEFELOMETRICO 24,1 19 B.N.II IMAGE SIEMENS BECKMAN
6 % Metodi usati per analisi TURBIDIM. NEFELOM. RID ALTRO Alfa 1 - Antitripsina Alfa 1 Glicoproteina Acida Alfa 2 - Macroglobulina Aptoglobina Beta 2 - Microglobulina C C Ceruloplasmina Cistatina C Fattore Reumatoide IgA IgE IgG IgM Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG Kappa - Catena Leggera Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG Lambda - Catena Leggera PCR Prealbumina Proteina Legante Retinolo Recettore Solubile Transferrina Transferrina
7 CRM 470: la nuova era delle proteine specifiche
8 Cause d inaccuratezza Trasferimento dei valori da CRM a calibratori e controlli Eterogeneità delle proteine Effetto matrice
9 ERM-DA470k/IFCC
10 Principali metodi usati IMMUNODIFFUSIONE RADIALE % VARIANTI STRUMENTO e/o REAGENTI + USATI 2,5 15 SIEMENS LIOFILCHEM MEDIC PKL POKLER BIODEVICE NEFELOMETRIA 24,1 19 BNA BN II IMAGE ARRAY 360 BN PROSPEC TURBIDIMETRIA 66,0 110 MODULAR ARCHITECT COBAS DX AU 400 AU 600 SIEMENS SIEMENS BECKMAN BECKMAN SIEMENS ROCHE ABBOTT ROCHE BECKMAN BECKMAN BECKMAN
11 Immunodiffusione Radiale
12 Nefelometria
13 Turbidimetria
14 Curva di Heidelberger-Kendall
15 CV (media) Alfa 1 - Antitripsina Alfa 1 Glicoproteina Acida Alfa 2 - Macroglobulina Aptoglobina Beta 2 - Microglobulina C3 C4 Ceruloplasmina Cistatina C Fattore Reumatoide
16 CV (media) IgA IgE IgG IgM Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG Kappa - Catena Leggera Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG Lambda - Catena Leggera PCR Prealbumina Proteina Legante il retinolo Recettore Solubile Transferrina Transferrina
17 CV 2014 Analita Media Min Max Alfa 1 - Antitripsina 9,7 4,3 19,1 Alfa 1 - Antitripsina (Nefelom. Siemens) 11,6 10,3 13,1 Alfa 1 Glicoproteina Acida 8,8 3,2 42,8 Alfa 2 - Macroglobulina 14,6 8,3 17,9 Aptoglobina 5,6 2,0 14,1 Beta 2 - Microglobulina 9,5 2,6 20,0 C3 6,2 2,5 35,1 C4 10,5 4,5 34,9 Ceruloplasmina 8,7 3,4 15,8 Cistatina C 27,2 25,0 28,6 Fattore Reumatoide 13,8 3,5 49,2 IgA 6,3 1,7 29,5 IgE 14,5 4,9 42,9 IgG 5,9 2,1 32,3 IgM 7,6 1,8 34,4 Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG 8,0 4,1 15,9 Kappa - Catena Leggera 6,3 4,6 8,8 Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG 3,8 2,1 5,6 Lambda - Catena Leggera 8,5 4,9 11,2 PCR 8,6 1,4 21,9 Prealbumina 7,9 4,6 18,5 Proteina Legante Retinolo 6,9 6,9 6,9 Recettore Solubile Transferrina 7,9 4,3 11,1 Transferrina 6,1 3,4 30,7
18 CV 2014 Metodo MediaDiCV MinDiCV MaxDiCV AGGLUTINAZIONE 38,7 24,8 49,2 CHEMILUM. 12,1 7,4 20,0 DRY CHEMISTRY 11,4 7,3 21,9 ELFA 12,9 8,3 21,4 IMMUNODIFF. 25,9 13,8 42,8 IMMUNOFLUOR. 22,8 6,3 42,9 IMMUNOTURB. 9,1 4,4 24,4 IMMUNOT.ROCHE COBAS /MODULAR 4,6 2,0 12,2 IMMUNOTURB. INTEGRA 9,9 6,2 20,0 IMMUNOTURB SIEMENS 7,1 3,3 12,3 IMMUNOTURB ABBOTT ARCHITECT 4,4 2,9 6,0 IMMUNOTURB BECKMAN UDR 27,9 19,3 39,7 IMMUNOTURB. BECKMAN AU 6,5 3,6 9,1 IMMUNOTURB. BECKMAN LX/CX/DX 5,1 2,4 16,6 IMMUNOTURB. I.L./BIOKIT 8,5 3,6 23,9 IMMUNOTURB. SCLAVO 13,5 12,1 14,9 NEFELOMETRICO 7,1 2,1 23,2 NEFELOMETRICO BECKMAN 8,2 3,6 12,9 NEFELOM. BECKMAN IMAGE 5,0 4,0 6,2 NEFELOM. SIEMENS 7,9 4,3 11,1
19 CV 2014 Analita Metodo MaxDiCV Fattore Reumatoide AGGLUTINAZIONE 49,2 IgE IMMUNOFLUOR. 42,9 Alfa 1 Glicoproteina Acida IMMUNODIFF. 42,8 Fattore Reumatoide IMMUNOTURB BECKMAN UDR 39,7 C3 IMMUNODIFF. 35,1 C4 IMMUNODIFF. 34,9 IgM IMMUNODIFF. 34,4 IgG IMMUNODIFF. 32,3 Transferrina IMMUNODIFF. 30,7 IgA IMMUNODIFF. 29,5 Cistatina C NEFELOM. SIEMENS BN 28,6 Fattore Reumatoide IMMUNOTURB.ABBOTT ARCHITECT 25,9 IgE IMMUNOTURB. 24,4 Fattore Reumatoide IMMUNOTURB. I.L./BIOKIT 23,9 IgA NEFEL. BECKMAN IMAGE 23,3 C4 NEFELOMETRICO 23,2 C3 NEFELOMETRICO 23,1 IgM NEFELOM.BECKMAN IMAGE 22,2 PCR DRY CHEMISTRY 21,9 IgE ELFA 21,4 PCR IMMUNOTURB. INTEGRA 20,0 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. 20,0
20 VEQ Immunoglobuline
21 IgG mg/dl NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 1 NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 3 NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 4 Media ±DS
22 CV% IgG CV B Nefelom. Turbidim. RID
23 PCR mg/dl 0 7 NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM. Campione: 1 NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM. Campione: NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM. Campione: 3 NEFELOM. TURBIDIM. DRY CHEM. Campione: 4 Media ±DS
24 CV% PCR 0,5. CV B Nefelom. Turbidim. Dry Chemistry
25 PCR ultrasensibile
26 Fattore Reumatoide
27 Fattore Reumatoide UI/mL 50 AGGLUTIN TURBIDIM. NEFELOM. Campione: 1 AGGLUTIN TURBIDIM. NEFELOM. Campione: AGGLUTIN TURBIDIM. NEFELOM. Campione: 3 AGGLUTIN TURBIDIM. NEFELOM. Campione: 4 Media ±DS
28 CV% Fattore Reumatoide CV B Nefelom. Turbidim. Agglutinaz.
29 Fattore Reumatoide (Turbidim.) UI/mL 30 ROCHE BECKMAN ABBOTT Campione: 1 ROCHE BECKMAN ABBOTT Campione: ROCHE BECKMAN ABBOTT Campione: 3 ROCHE BECKMAN ABBOTT Campione: 4 Media ±DS
30 Fattore Reumatoide Standardizzazione non ERM-DA470 Non dosabile come IgM in unità di massa Persistenza di metodi qualitativi - semiquantitativi
31 CV% Esordienti Recettore Solubile Transferrina Cistatina C CV B NEFELOMETRICO SIEMENS
32 Leggere le catene leggere CATENE LEGGERE LEGATE K(2-4)g/L (1-2,4)g/L LIBERE K(3-19)mg/L (6-26)mg/L POLICLONALI MONOCLONALI POLICLONALI MONOCLONALI ANTISIERI ANTI-CL TOTALI ANTISIERI ANTI-CL LIBERE
33 Leggere le catene leggere LEGATE POLICLONALI Dosaggio CL totali k o λ come se fossero tutte libere CATENE LEGGERE MONOCLONALI POLICLONALI ANTISIERI ANTI-CL TOTALI LIBERE MONOCLONALI Dosaggio immunoglobuline che montano CL k o λ Fattore di conversione = 150 (PM IgG ) / 46 (2xPM CL ) 3
34 Leggere le catene leggere
35 CV% Kappa catena leggera CV B K(nefelom.) K(turbidim.) K(rif.IgG)
36 CV% Lambda catena leggera L(nefelom.) L(turbidim.) L(rif.IgG) 6 4 CV B
37 CL totali Dosaggio CL totali. Utilità clinica: Rapporto k/ come indizio di monoclonalità Parametro di follow-up per CM già tipizzate
38 CL libere
39 CL libere
40 CL libere
41 CL libere: discrepanza tra letteratura e pratica Nonostante il crescente numero di pubblicazioni in materia e l adattabilità del metodo sui principali strumenti, la maggior parte dei laboratori ignora il dosaggio delle CLL nel siero continuando ad utilizzare il dosaggio di CL totali, equivoco e destinato ad obsolescenza.
42 CL libere: VEQ Variabilità fra strumenti Problema dell eccesso di antigene
43 Coming soon: Hevylite
44 Proteine specifiche: conclusioni Variabilità inter- e intra-metodo: Limiti di standardizzazione Metodi manuali Vecchie e nuove proteine: Nuove esigenze cliniche Svecchiamento del repertorio
Kit per la determinazione immuno-turbidimetrica quantitativa delle sieroproteine umane su sistemi automatici.
1 1. IMMUNOTURBIDIMETRIA METODI IMMUNO-TURBIDIMETRICI PER AUTOMAZIONE 2. LATTICI METODI IN AGGLUTINAZIONE AL LATTICE SU VETRINO 3. LATTICI PER AUTOMAZIONE METODI TURBIDIMETRICI AL LATTICE 2012 1 2 METODI
FORNITURA QUADRIENNALE DI ESAMI CLINICA CLINICA, DROGHE, FARMACI PROTEINE SPECIFICHE, IMMUNOMETRIA 1/5
1 17BETA E2 ( beta estradiolo) 12.000 3.320 15.320 2 AB ANTI TIREOGLOBULINA 18.400 2.560 20.960 3 AB ANTI TIREOPEROSSIDASI 18.880 2.600 21.480 4 ACIDO LATTICO 6.000 2,37% 400 280 64,00% 6.680 5 ALBUMINA
Nome Analisi. Unità di misura. Intervallo di riferimento. Matrice. Metodo di riferimento. 17-OH progesterone. ng/ml. Vedi allegati.
Nome Analisi Unità di misura Intervallo di riferimento Matrice Metodo di riferimento 17-OH progesterone ng/ml Vedi allegati LIA 1 / 60 17-ß estradiolo pg/ml Vedi allegati Chemiluminescenza 17-OH corticosteroidi
CAPITOLATO TECNICO. Il fabbisogno previsto è il seguente:
Allegato A GARA PER LA FORNITURA DI SISTEMI DIAGNOSTICI PER LA DETERMINAZIONE QUANTITATIVA DI PROTEINE SPECIFICHE, PROTEINE TOTALI E CREATININA SU CAMPIONI DI SIERO, URINE E LIQUOR CEFALORACHIDIANO CAPITOLATO
LIMITI DI ACCETTABILITA PROGRAMMI DI V.E.Q. M/1481/43 - Rev. 0
CHIMICA CLINICA Analita Lim.Accettab.% conc. Analita Lim.Accettab.% conc. GLUCOSIO 10.0 80 ALT (GPT) 10.0 30 CREATININA 8.0
Centro di Riferimento Sicurezza di Qualità Valutazione esterna di qualità SIEROIMMUNOLOGIA 1-Ciclo 2014 Centro n. 04486
Analita: Antigene HBs Risultato atteso: ELFA N Risposte totali: 317 Sottogruppo: Antigene HBs Tuo valore Tutti 31 12 0.088 11.47 0.01 0.08 21 5 0.086 11.10 0.01 0.08 Seg.Camp/Cut-off 0.08 Diff. S Diff.
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