NTCC2. Tecnologie per il Cancro Cervicale 2) 2. Risultati Preliminari
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- Agostino Andreoli
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1 Studio NTCC2 (Nuove Tecnologie per il Cancro Cervicale 2) 2 Risultati Preliminari Anna Gillio Tos, Elena Allia, Laura De Marco, Centro Unificato Screening Cervico Vaginale SGAS, Torino AOU Città della Salute e della Scienza S.C. Anatomia ed Istologia Patologica Della Donna, Del Bambino E Dei Tumori Rari WORKSHOP PROGR. REGIONALE DI SCREENING PER IL CERVICOCARCINOMA PREVENZIONE SERENA 21 NOVEMBRE 2016
2 Studio NTCC2 (Nuove Nuove Tecnologie per il Cancro Cervicale 2) 2 P.I. Paolo Giorgi Rossi (AUSL Reggio Emilia); Maria Benevolo (IFO Roma) Obiettivo migliorare la prestazione dello screening cervicale ovviare al limite test HPV : scarsa specificità individuare nuove tecnologie di triage di HPV pos da affiancare alla citologia di triage BIOMARCATORI di RISCHIO PROGRESSIONE TUMORALE (virus) (cellula ospite)
3 HPV mrna. Razionale biologico DNA Divisione Cell Basali infettate da HPV Infezione produttiva TRANSIENTE mrna proteine E6/E7 E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR E6 ed E7 proteine oncogene Infezione trasformante Infezione PERSISTENTE trasformante Depuydt et al. Cancer Med 2015
4 HPV mrna. Razionale Biologico Epitelio cervicale normale Cellule cervicali HPV- infette Carcinoma cervicale E6/E7 mrna levels
5 HPV mrna. Razionale Biologico HPV DNA indica la presenza di HPV mrna di E6/E7 indica oncogeni di HPV attivi le onco-proteine E6/E7 inducono trasformazione cellulare DNA indica la presenza di HPV HPV mrna di E6/E7 indica la presenza di HPV attivo Test disponibile: Aptima [GenProbe GenProbe Hologic: 14 tipi HPV] Amplificazione Mediata da Trascrizione soglia di rischio
6 p16 / ki67. Razionale Biologico p16 Inibitore della chinasi ciclina dipendente 2 proteina tumor suppressor Non espressa o poco espressa in cell normali mature ki67 Proteina associata con attività proliferativa Non espressa o poco espressa in cell normali mature Test disponibile: CINTEC Plus [Roche Roche: Kit che evidenzia entrambi] Rilevazione in immunocitochimica
7 P16/ki67. Razionale Biologico DNA E6 E7 p53 prb mrna proteine Controllo del ciclo cellulare E6/E7 E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR E6 ed E7 proteine oncogene
8 P16/ki67. Razionale Biologico prb E2F promotore p16 Cellula quiescente prb E2F promotore p16 Cellula proliferante HPV E6/E7E1/E2 E4 E5 L2 L1 LCR prb E7 E2F promotore p16 p16 p16 p16p16 p16p16 p16 Cellula HPV + inf trasformante prb = proteina del Retinoblastoma E2F = fattore di trascrizione
9 p16 / ki67 Colorazione con CINTEC Plus citoplasma marrone p16 nucleo rosso ki67 Il test di colorazione ICC con CinTecPlus è morfologia indipendente Il campione è dato positivo con 1 o più cell con doppia colorazione 9
10 NTCC2 Obiettivi HPV mrna E6/E7 p16 / ki67 Studio di indicatori di rischio Triage donne HPV+ donne non a rischio : no colposcopia donne a rischio maggiore: colposcopia Limitare approfondimenti inutili (rischio sovradiagnosi e sovratrattamento) Obiettivi specifici Outcome: CIN2+ accuratezza dei test HPV mrna e p16/ki67 e loro VPN prospettico a 5 anni specificità test HPV mrna (1000 HPV-DNA neg) Detection Rate CIN2+ cumulativa a 5 anni a fronte di un test HPV pos e un marcatore (HPV mrna o p16/ki67) ) neg potenziale riduzione sovradiagnosi con triage citologico o con HPV mrna o con p16/ki67 vs invio in colpo diretto
11 NTCC2 Disegno dello Studio Flow chart target donne HPV pos
12 NTCC2 Metodi Indicatori di rischio: HPV mrna E6/E7 p16 / ki67 virus attivo test molecol Aptima proliferazione e potenziale progressione Coloraz. ICC CinTecPlus Cosa comporta per le donne dello studio la positività a questi 2 indicatori? donne HPV + al reclutamento nulla, seguono DGR donne HPV + alla rip a 1 anno colpo, come in DGR donne HPV al reclutamento colpo
13 NTCC2 Reclutamento Abruzzo L Aquila ASL 1 Lazio Roma Roma G Piemonte Torino CPO CUSCV Veneto Este Monselice ULSS 17 Toscana Firenze ISPO Emilia R. Reggio Emilia AUSL R.E. Umbria Perugia USL1 - Umbria 1 Trentino Trento Az Prov Servizi Sanitari Criteri di eligibilità: donne con età (o 30-59) 59), residenti in area screening Criteri di esclusione: gravidanza, lesioni nei 5 aa precedenti, cito inadeg Modalità invito: lettera e informativa in accompagnamento alla lettera di invito allo screening con test HPV consenso informato Campione: aliquota residua a valle di test HPV pos dal prelievo in PreservCyt (ThinPrep)
14 NTCC2 Analisi di Laboratorio HPV mrna test APTIMA centralizzazione in 2 Laboratori 1) Torino - Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze -ISPO p16/ki67 colorazione immunocitochimica CinTec Plus allestimento preparati e colorazioni 1) Torino Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze ISPO 3) Perugia USL1 - Umbria 1 4) Roma IFO -Ist Naz Tum Reg El Letture 1) Torino Centro Unificato Screening Cervico Vag SGAS 2) Firenze ISPO 3) Perugia USL1 - Umbria 1 4) Roma IFO -Ist Naz Tum Reg El 5) Roma S. Andrea 6) Este Mons ULSS 17 7) Reggio Em AUSL R.E. 8) Trento Az Prov Servizi Sanitari 9) L AquilaL ASL1
15 NTCC2 Stato dell arte Reclutamento Disegno Agosto 31 Gennaio studio Abruzzo L Aquila ASL Lazio Roma Roma G Piemonte Torino CPO- CUSCV Veneto Este Monsel. ULSS Toscana Firenze ISPO Emilia R. Reggio Em. AUSL R.E Umbria Perugia USL1 - Umbria Trentino Trento Az Prov Servizi Sanitari (79%) Fine reclutamento a Torino: 311 gennaio 2017
16 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Reclutamento I livello [%] [5.9] [9.9] [6.4] [11] [7.4] II livello
17 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Test HPV mrna 7.4% HPV-DNA pos Triage cito, 27% cito pos pos 2% invio in colpo 5% % mrna pos 5% invio in colpo test mrna: come test primario guadagno in specif, ma in sensib?? come test triage, meglio la citologia
18 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 HPV mrna in donne HPV-DNA pos per età Non si osserva effetto dell età sulla positività ad HPV mrna
19 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Specificità test HPV mrna (1000 HPV-DNA neg) se si adottasse il test HPV mrna come test primario di screening HPV-DNA Negativi stima HPV HPVmRNA pos é 6,5% HPV-DNA pos é 7,4% 6,5% (5% tra HPV-DNA pos + 1,5% tra HPV-DNA neg) Sembra esserci un guadagno in specificità, ma necessaria fine FU per capire impatto sulla sensibilità
20 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Positività ad HPV mrna e tipo virale (test di screening Cobas) Positività ad mrna: maggiore con HPV16, lievemente maggiore con HPV18
21 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 Positività ad HPV mrna e Carico Virale (Ratio con test di screening HC2) Positività ad mrna: forte aumento all aumentare del carico virale (Ratio HC2)
22 NTCC2 Risultati preliminari al 31 agosto 2016 p16/ki67 : colorazioni con CinTec Plus e letture in corso Studio di concordanza interosservatore: 42 vetrini letti in 9 centri 886 letture Buona riproducibilità tra i lettori, che aumenta tra lettori esperti
23 NTCC2 Conclusioni Studio ancora in corso aspettiamo risultati definitivi al termine del reclutamento e delle analisi Conduzione di studi nel setting dello screening consente - seguire le donne al FU - l acquisizione di informazioni accurate sull efficacia longitudinale degli indicatori proposti Grazie per l attenzionel
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