COSA SONO? PERCHE? A CHI? QUALE?. E UNA VOLTA CHE ARRIVA IL RISULTATO?

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2 OS SONO? PERHE? HI? QULE?. E UN VOL HE RRIV IL RISULO???

3 Di cosa stiamo parlando.. Per test genetici si intendono comunemente le analisi di specifici geni, del loro prodotto o della loro funzione, nonché ogni altro tipo di indagine del DN o dei cromosomi, finalizzate ad individuare o a escludere modificazioni (del DN) verosimilmente associate a patologie genetiche B D Basi azotate DN cromosoma gene

4 est genetici: perché sono diversi dalle comuni analisi di laboratorio? La richiesta può non provenire dal diretto interessato: test pre-natali; test a minorenni Possono essere eseguiti con finalità diagnostiche ma anche predittive per patologie future Il risultato acquisito è relativo al patrimonio genetico e identifica una condizione permanente, come tale può: modificare le scelte riproduttive del richiedente avere ricadute su altri componenti della famiglia (che non chiesto nulla e potrebbero non voler sapere nulla) hanno

5 Potenziali benefici e rischi dei test genetici BENEFII RISHI Formulazione o conferma della diagnosi Disponibilità di informazioni prognostiche Istituzione di terapia più appropriata Prevenzione di possibili complicanze Definizione del rischio riproduttivo del soggetto e dei collaterali Rinuncia ad indagini inutili Fisici: prelievo in epoca prenatale Medici: relativi a particolari scelte riproduttive o terapie vd mastectomia preventiva Psicologici: disistima, alterazione dei rapporti familiari per informazioni non previste ltri: discriminazione sociale, terapie inutili per errata diagnosi

6 Peculiarità dei test genetici rispetto ad altre analisi biomediche Risultato del test quando sì non sempre è sì e no non sempre no Risultato POSIIVO Identificazione di una mutazione Fibrosi cistica (F): riscontro di varianti rare di significato incerto Risultato NEGIVO Mancato riscontro di mutazioni SM: 5% falsi negativi-test del portatore BR1/2: 5-15% delle mutazioni non vengono evidenziate attraverso il sequenziamento F mancato riscontro di mutazioni al test che identifica il 95% delle mutazioni = probabilità residua di essere portatore di F 1:491 (1:25 se non fa il test)

7 Peculiarità dei test genetici rispetto ad altre analisi biomediche Interpretazione del risultato Eterogeneità genetica Mutazioni alleliche Eredità digenica Penetranza incompleta Sono fattori di complicazione per l interpretazione del risultato Eterogeneità genetica = riduce la sensibilità clinica Penetranza incompleta = riduce il Valore predittivo positivo (p. che il soggetto positivo al test abbia la patologia)

8 est Genetici: lassificazione - Diagnostici ests - Presintomatici/ predittivi romosomi (citogenetica) Materiali -est del portatore - Predittivi di suscettibilità - est prognostici - Farmacogenetici - Indagini medico -legali DN (genetica molecolare) ltri (RN, proteine, tessuti, ecc)

9 est genetici est diagnostici Effettuati su soggetti che sono affetti (diagnosi clinica già formulata) o sospettati di essere affetti da una determinata malattia; la domanda è se un paziente con segni e sintomi clinici evidenti è affetto da una specifica malattia, non se è a rischio di svilupparla est presintomatici Effettuati su soggetti che non presentano sintomi clinici ma hanno una storia familiare positiva per una determinata malattia; un risultato positivo indica che il soggetto svilupperà (o potrà sviluppare " test predittivo) la malattia ad un certo momento della sua vita

10 est predittivi per malattie comuni multifattoriali Riguardano malattie complesse, identificano situazioni di suscettibilità o resistenza nei confronti di queste patologie Definiscono la probabilità di ammalarsi di una determinata condizione la condizione si svilupperà se si combineranno diversi fattori genetici e/o ambientali fino al raggiungimento di una soglia di malattia La presenza di uno o più fattori di rischio (o protettivi) genetici conferisce un rischio maggiore (o minore) di sviluppare la malattia, che si presenterà solitamente solo in una minoranza dei soggetti a rischio Esempi: diabete, malattia coronarica, malattie neurodegenerative

11 .PERHE?

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16 Le anomalie cromosomiche

17 Le malattie geniche lterazioni di piccoli frammenti del DN (GENI) all'interno di un cromosoma. Non individuabili con l'analisi dei cromosomi. Spesso ma non sempre sono trasmesse da uno o entrambi i genitori.

18 Il gene difettoso può rimanere nascosto (REESSIVO) sia nei maschi che nelle femmine (entrambi hanno 2 cr. 7)

19 Il gene difettoso può rimanere nascosto (REESSIVO) solo nelle femmine (perché hanno 2 cr. X)

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21 ome si trasmette il gene mutato?

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23 HI..

24 In famiglia? utto bene, grazie! Portatori sani di anemia mediterranea

25 QULE ES? Qual è il sospetto? nomalia romosomica nomalia Genica IOGENEI"RIOIPO IOGENEI MOLEOLRE"FISH MOLEOLRE" SEQUENZIMENO, MLP, RRYGH, ES DI MEILZIONE, SOUHERN BLOING.

26 Se il sospetto è un NOMLI ROMOSOMI S. di DOWN RIOIPO

27 ome ottenere un preparato cromosomico Prelievo di sangue eparinato Stimolare le cellule PH oltivare In vitro Bloccare il fuso mitotico nalizzare Pipettare le cellule su di un vetrino fissare e colorare ggiungere soluzione ipotonica

28 Se il sospetto è una MIRODELEZIONE Del 22q FISH

29 onsente di verificare se un soggetto presenta nel suo patrimonio genetico una coppia (esito normale) o una singola informazione genetica per quanto riguarda una regione cromosomica

30 .. E LERZIONI NOR PIU PIOLE? RRY GH

31 Se il sospetto è un NOMLI GENI acondroplasia FINISE

32 Se il sospetto è un NOMLI GENI acondroplasia NLISI MOLEOLRE MIR SEQUENZIMENO

33 he sono le mutazioni? G G G G G G

34 he sono le mutazioni? G G G Mutazioni puntiformi G G

35 he sono le mutazioni? G G G G G G

36 he sono le mutazioni? G G G G delezioni

37 he sono le mutazioni? G G G G G G

38 he sono le mutazioni? G G G G G G G inserzioni G G

39 nalisi diretta di mutazioni mediante sequenziamento

40 nalisi mediante OL delle 31 mutazioni più frequenti causa di Fibrosi istica

41 MLP (multiplex ligation dependent probe amplification)

42 I ES GENEII SPERE DI ESSERE PREDISPOSO PER UN MLI INURBILE o DI ESSERE PORORI O FFEI D UN MLI RSMISSIBILE E BENE O MLE?

43 I ES GENEII EFFEI PSIOLOGII HI DEVE ESSERE MESSO L ORRENE? IL PROBLEM DELL ONFIDENZILI