Fisiologia del Sangue Eritrociti o globuli rossi Funzioni trasporto O2 e CO2 Eritrociti nel sangue
Genesi degli eritrociti Fetale sacco vitellino- fegato Adulto- midollo osseo Stem cells- Precursori eritrociti Proeritroblasto- eritroblasto basofiloreticolocita eritrocita maturo Regolazione ematopoiesi Eritropoietina O2 Kidneys 90%, the rest liver
Eritrociti delle principali specie di interesse veterinario Cane Gatto Pecora Cavallo Bovino Cammello Capra Capra Angora
fl=0,000000000000001 litri
Metabolismo globuli rossi ATP unico metabolita usato dal globulo rosso..no nucleo.. 1) Mantenere integrità funzionale membrana 2) Trasporto ioni di membrana 3) Mantenere il Fe emoglobina in forma ferrosa 4) Impedire ossidazione proteine
Anemie - ematocrito 1) Post-emorragica 2) Aplastica 3) Megaloblastica 4) Emolitica Effetti dell anemia -
Emopoiesi Cofattori: Say you need proteins for hemoglobin Vitamine gruppo B- B12, cianocobalamina, Vit B 1, Tiamina, Vit. B6, Piridossina, PP, A. Folico, Biotina Oligoelementi: Fe ++, Cu, Co, Eritropoietina
Metabolismo del ferro Fe 2+ferroso Emosiderina Fe 3+ HCl Fe Fe 2+ 2+ Fe 2+ Fe 2+ Fe 2+ Apoferritina Ferritina Enterocita Fe 3+ Transerrina Sangue Ferrico Sangue
Policitemia Policitemia secondaria Policitemia vera Effetti
Emolisi Resistenza osmotica eritrocitaria Velocità di eritrosedimentazione (VES) Vita media eritrocitaria
Globuli bianchi o leucociti Neutrofili Eosinofili Basofili Linfociti Linfociti T Linfociti B Monociti Macrofagi Piastrine
Il sangue PLASMA Proteine plasmatiche Albumine Globuline Fibrinogeno Ormoni enzimi Residuo Solido 10% Sostanze inorganiche Sostanze organiche gas Na, K, Ca, Mg, Cl, Fe, Mn, Cu, Zn, I, Co Metaboliti:A.A. Glucosio, Grassi, colesterolo etc. Cataboliti: urea, a. urico, creatina Creatinina, Sali di ammonio O 2, CO 2 N
Ematocrito
Frazioni proteiche del Plasma Albumine riserva aminoacidi- (150/200 mg/kg pv)- a.grassi NE,trasporto ormoni α-globuline (α1fast α 2slow) - ceruloplasmina, eritropoietina, ormoni β-globuline (β1 as above β2)- β lipoproteine, transferrina, fattori coagulazione γ-globuline Fibrinogeno
Frazioni proteiche del Plasma Tracciato elettroforetico proteine del Plasma Albumina α β γ
Enzimi plasmatici Plasma-specifici Enzimi della coagulazione colinesterasi Esogeni Cellulari: Transaminasi Fosfatasi Creatinchinasi Lattatodeidrogenasi sorbitoldeidrogenasi Di secrezione: Amilasi Lipasi Fosfatasi
Emostasi Coagulazione del sangue 1) Spasmo muscolare 2) Formazione di un tappo piastrinico 3) Coagulazione del sangue 4) a-sviluppo di tessuto fibroso nel coagulo-chiusura della lesioneb-dissoluzione del coagulo
Emostasi Coagulazione del sangue Caratteristiche delle piastrine 1) Filamenti di actina, miosina e trombostenina 2) Reticolo endoplasmico- Golgi-proteine leganti Ca++ 3) Mitocondri ATP sintesi 4) Fattore stabilizzante la fibrina 5) Fattore di crescita endoteliale 6) Trombossano A2 Meccanismo di formazione del tappo piastrinico Say what happens when no platelets
La coagulazione del sangue nelle rotture vascolari Summarize the all events Meccanismo della coagulazione 1) Attivazione della protrombina (alfa2 globulina), 15mg/100 ml 2) Conversione protrombina in trombina 3) Scissione del fibrinogeno (100-700 mg/100ml) in fibrina
Schema dei principali eventi della coagulazione Protrombina Attivatore protrombina (intrinseco o intrinseco) Ca++ Trombina Fibrinogemo Filamenti di fibrina Insolubile Monomero di Fibrina Ca++ Fattore stabilizzante le fibrina
Il coagulo sanguigno Retrazione del coagulo Siero
Via estrinseca Avvio della coagulazione Via intrinseca ed estrinseca 1) Liberazione di tromboplastina tessutale (fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad azione proteolitica) 1) (Bis)Legame fattore X con fattore VII (attivazione fattore X) 2) Attivazione fattore X (fattore V + fosfolipidi + piastrine) Attivatore protrombinico
Avvio della coagulazione Via estrinseca Trauma tissutale tromboplastina tessutale fosfolipidi di membrane- lipoproteine ad azione proteolitica Fattore X Fatttore X attivo Attivatore della protrombina Ca++ + Fattore V Protrombina Ca++ Trombina
Vie Tessuto lesionato Coagulazione - vie -
Prevenzione della coagulazione vasale I: Prostaciclina e NO
Prevenzione della coagulazione intravasale II: Fattori vasali e Plasmatici 1) Levigatezza superficie endoteliale 2) Glicocalice + Trombociclina local endothelial factor 3) Trombomodulina legame con trombina 4) Filamenti di fibrina adsorbimento trombina 5) Antitrombina III Rimozione 6) Eparina (legame antitrombina III) Fattori XII, XI Say were it is produced mastcells, or basophyle granulocytes alone very weak!!!!! IX e X 7) Alfa 2 macroglobulina - legame fattori coagulazione
Destino del coagulo 1) Organizzazione del coagulo 2) Lisi del coagulo (plasmina + urochinasi) Plasminogeno (fibrinolisina) Attivatore del plasminogeno Plasmina Digestione fibrina e fattori coagulazione Inibita da: Alfa2 antiplasmina
Sindrome emorragiche Diminuzione protrombina e fattori coagulazione Carenza vitamina K Avvelenamenti da anticoagulanti (warfarin cumarinici) Emofilia carenza genetica fattore VIII Say something about transgenic animals carrying clotting factors
Test di coagulabilità del sangue 1) Tempo di emorragia 2) Tempo di coagulazione 3) Tempo di protrombina
Gruppi sanguigni Molteplicità di antigeni nelle cellule del sangue Gruppi di antigeni principali: O-A-B e Rh
Agglutinogeni ed agglutinine Antigeni A e B = agglutinogeni Anticorpi anti A e B = agglutinine Gruppi sanguigni: O-A- B O = 47% A = 41% B = 9% A B = 3%
Gruppi sanguigni, agglutinogeni ed agglutinine Gruppo O A B Agglutinogeni _ A B Agglutinine Anti A e B Anti B Anti A A B A -B
Antigeni Rh C D E c d e D Rh positivo D Rh negativo Risposta immunitaria al fattore Rh Eritroblastosi
DEA = Dog Erytrocyte Antigens
Gruppi sanguigni nel gatto Soggetti gruppo A anticorpi anti B blandi Soggetti gruppo B anticorpi anti A agglutinazione! Soggetti AB- nessun anticorpo Anemia emolitica neonatale frequente nei gattini
Determinazione gruppi sanguigni agglutinazione su gel + centrifugazione
Gruppi sanguigni nelle principali specie di interesse veterinario Gruppi sanguigni Bovini A, B, C, F, J, L, M, S, and Z Cenni sulle transfusioni Gruppi sanguigni Felini A, B, or AB. Gruppi sanguigni Equini A, C, D, K, P, Q, T, and U. Gruppi sanguigni Ovini A, C, D and M Gruppi sanguigni Suini A-E, F, G, H, I, J, K, L Gruppi sanguigni caprini A, B, C, R, E (diversi polimorfismi, es. C =21)
Blood cross matching for transfusion Collect 2ml of EDTA-anticoagulated blood from donor and recipient. Centrifuge blood samples for 1 minute in bench top centrifuge at approximately 1,000rpm (ie same speed as for plasma/serum separation) and remove plasma to prelabelled 75 x 10 mm test tubes. Make a 2% red cell suspension of each specimen in physiological saline (0.85% NaCl) solution. T his can be done by placing 0.02ml of concentrated red cells in 0.98ml of saline solution contained in a 75 x 10mm test tube; mixing, centrifuging, and washing three times; and resuspending washed red cells in a equal volume of saline solution. Place two drops of the donor s cell suspension in a 10 x 75mm test tube and mix. In a second tube similarly place equal volumes of donor s plasma and recipient s cell suspension. To check for autoagglutination, set up controls in the manner by mixing donor s red cells with its own plasma and follow the same procedure with the recipient s red cells and plasma. Shake rack of tubes and incubate for 30 minutes at room temperature, then centrifuge for 1 minute at 1,000 rpm. Examine the supernatant for haemolysis. Shake the tubes gently by tapping with finger to detect grossly visible agglutination of red cells. If no agglutination is observed, transfer a small amount to a glass slide and examine under the low power of the microscope. A slight haemolysis in canine blood is non-specific. Significant haemolysis and/or agglutination in one or both of the cross-matched tubes but not in the controls indicates and incompatibility and the need to choose a new donor.
Trapianti di organi 1) Isotrapianto 2) Allotrapianto 3) Xenotrapianto Antigeni complesso HLA HLA 1 HLA 2 HLA 3 Tipizzazione del tessuto Say something about cloning pigs for xenotransplantation
Incidenti trasfusionali 1) Agglutinazione 2) Emolisi Determinazione del gruppo sanguigno Say how do it Conseguenze delle reazioni trasfusionali Ittero Blocco renale Shock cardiocircolatorio