UNIVERSITA' degli STUDI di PERUGIA. Virus dell epatite B
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- Giuseppa Borrelli
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1 UNIVERSITA' degli STUDI di PERUGIA Virus dell epatite B HBV
2 Famiglia Hepadnavirus HBV Diametro di 42nm, (presenti nel siero anche particelle di 22nm, e strutture tubulari). Simmetria icosaedrica. (forma sferica) Capside ricoperto da un pericapside di natura proteoglicolipidica.
3 Hepadnavirus: caratteristiche esclusive (1) causa epatite acuta, cronica, carcinoma epatocellulare genoma a DNA circolare parzialmente bicatenario possiede una trascrittasi inversa si replica attraverso un intermedio a RNA Il genoma codifica per molte proteine: HBsAg (L,M,S), HBeAg, HBcAg. il genoma si può integrare nel genoma ospite
4 Hepadnavirus: caratteristiche esclusive (2) codifica per proteine che hanno in comune alcune sequenze geniche, ma con differenti codoni di inizio si associa alla produzione di grosse quantità di antigene di superficie che si assembla in particelle prive di DNA (500mg/ml sangue infetto)
5 PARTICELLE VIRALI 10 miliardi/ml sangue infetto Particelle sferiche 22 nm Particelle sferiche 42 nm Particelle tubulari 22 nm
6
7 virione completo o particella di Dane diametro: 42 nm peso molecolare: 2x10 6 D simmetria: icosaedrica polimerasi DNA circolare parzialmente bicatenario capside pericapside (mantello)
8 proteine strutturali HBs HBc HBe
9 HBs antigene di superficie (HBsAg) localizzato nel pericapside (forme L, M, S) presenta 5 determinanti antigenici: a gruppo specifico, presente su tutte le particelle virali insieme a d - y oppure w - r tipo specifici 8 genotipi (A H)
10 distribuzione dei genotipi di HBV nel mondo TIPO SOTTOTIPO DISTRIBUZIONE A adw, adw2, ayw1 USA, Nord Europa, Africa B adw2, ayw1 Cina, Indonesia, Vietnam C adr, ayr Cina, Korea, Giappone, Vietnam D ayw2, ayw3 Mediterraneo, Medio Oriente, India E ayw4 Africa Occidentale F adw4 Polinesia G Europa in Italia prevalgono i genotipi A e D
11 HBc antigene del core (HBcAg) localizzato nel capside non si trova libero nel siero ma solo negli epatociti
12 HBe antigene secretorio (HBeAg) componente minore del virione si trova libero nel siero, non si assembla in particelle indice di intensa replica virale e infettività
13 GENOMA DNA parzialmente bicatenario paia di basi HBsAg P S C HBcAg HBeAg Polimerasi Transattivatore trascrizionale X
14 Gene S Pre-S1 Pre-S2 S codifica per le 3 forme di HBsAg: S codifica per la proteina di superficie gp27 (S) Pre S2 + S codifica per la proteina gp36 (M) PreS1 + PreS2 + S codifica per la proteina gp42 (L)
15 HBsAg S L M S L M S
16 Gene C Pre-C C codifica per HBcAg e HBcAg: C codifica per HBcAg, proteina core intracellulare Pre C + C codifica proteina nucleocapsidica solubile HBeAg
17 Gene P P codifica per la DNA polimerasi ad attività: DNA-polimerasica DNA dipendente DNA-polimerasica RNA dipendente (trascrittasi inversa)
18 Gene X X codifica per HBx, transattivatore di: geni cellulari (IFN-b, MHC) geni virali (HBV stesso e altri virus, quali HIV) HBx complessa l oncorepressore p53
19 Epidemiologia - Trasmissione
20 distribuzione geografica dell infezione cronica da HBV nel mondo: > 500 milioni di persone infette in USA: circa 1.25 milioni di persone infette alta prevalenza in Italia, Grecia, Sud Est Asiatico, Africa Prevalenza > 8 % 2 7 % < 2 % 50 %
21 HBV nei liquidi biologici concentrazione elevata sangue siero essudati moderata liquido seminale fluido vaginale saliva bassa/nulla urine feci sudore lacrime latte
22 1 ml di sangue infetto: > 1 miliardo di virioni! ml di sangue infetto: sufficienti a trasmettere il virus (HIV: 0.1 ml) rischio di infezione dopo puntura con ago infetto: 7 30% (HIV: 0.5%)
23 Trasmissione Parenterale Sessuale Perinatale
24 comportamenti a rischio Piercing Agopuntura DRUG Uso di droghe (15%) Tatuaggio Promiscuità sessuale (41% rapporti eterosessuali) (9% rapporti omosessuali)
25 soggetti a rischio Politrasfusi Trapiantati Dializzati Neonati da madre con epatite B Personale sanitario (1%)
26 resistenza etere -20 C (20 anni) 37 C (60 minuti) 25 (> 1 settimana) essiccamento raggi UV suscettibilità 5% ipoclorito di sodio ph 2.4 (6 ore)
27 Quadri clinici
28 Gravità Epatite virale infezione sistemica che interessa soprattutto il fegato Tempo Forme acute Asintomatiche Forme croniche Portatore sano Fulminanti Persistenti Progressive Cirrosi Epatocarcinoma
29 1 3 mesi epatite acuta incubazione pre-ittero ittero convalescenza 15% febbre, rash, artrite 3 4 mesi ittero bilirubina >2-3 mg/dl urine scure malessere 95% anoressia 90% nausea 80% dolore QSD 60% prurito 10%
30 Infezione acuta di HBV Periodo d incubazione da 1-6 mesi, con inizio insidioso. I sintomi durante il periodo prodromico includono: febbre, malessere addominale, anoressia, nausea,vomito e brividi. I segni classici conseguenti al danno epatico: ittero, urine scure, feci ipocoliche. La guarigione si manifesta con diminuzione della febbre e ricomparsa dell appetito.
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32 Epatite B cronica L epatite cronica si verifica nel 5-10% delle persone infette da HBV. Circa un terzo di queste persone presenta epatite cronica attiva con danno epatico continuo che porta a sovvertimento dell architettura epatica, cirrosi, alterata funzionalità o PHC. Gli altri due terzi presentano epatite cronica persistente che ha come conseguenza, poliartrite nodosa e glomerulonefrite. La forma cronica può essere diagnosticata solo mediante la rilevazione di elevati enzimi epatici all esame ematochimico. Le persone affette da epatite cronica rappresentano la principale forma di diffusione del virus e sono a rischio di malattia fulminante in caso di coinfezione con HDV.
33 se l infezione è contratta da bambino è maggiore la probabilità di infezione cronica Guarigione 10%-70% Infezione perinatale o del bambino Infezione dell adulto 95% Guarigione 30%-90% Infezione cronica <5% <1% Epatite Fulminante 1* 25%-30% Rischio di morte Epatite cronica lieve, moderata o severa 2-10* Cirrosi 4* 3* 2-8* Portatore sano 0.1* Scompenso Trapianto o Morte HCC
34 Chronic Infection (%) 100 Outcome of Hepatitis B Virus Infection by Age at Infection Chronic Infection (%) Chronic Infection Symptomatic Infection (%) 0 Symptomatic Infection 0 Birth 1-6 months 7-12 months 1-4 years Older Children and Adults Age at Infection
35 coinfezione o superinfezione da virus Delta aggravamento della sintomatologia aumento del rischio di cronicizzazione
36 carcinoma epatocellulare (PHC) nell 80% dei casi causato da HBV latenza tra inizio dell infezione da HBV e PHC: 9-35 anni meccanismi d azione ipotizzati: 1) HBV induce continui processi di distruzione/riparazione epatica 2) HBV integra il proprio DNA nel genoma della cellula alterando il controllo genico della crescita cellulare 3) HBx complessa l oncorepressore cellulare p53
37 Diagnosi sierologica molecolare
38 diagnosi sierologica ricerca dei MARKERS di HBV nel siero del paziente antigeni HBsAg HBeAg anticorpi anti-hbc (IgM, IgG) anti-hbs anti-hbe
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42 Esempi di possibili risultati sierologici Marker Risultato Interpretazione HBsAg anti-hbc anti-hbs Negativo Negativo Negativo Soggetto Suscettibile HBsAg anti-hbc IgM anti-hbc anti-hbs Positivo Positivo Positivo Negativo Soggetto con infezione acuta HBsAg anti-hbc anti-hbs Negativo Positivo Positivo Soggetto immune per superamento infezione
43 Esempi di possibili risultati sierologici Marker Risultato Interpretazione HBsAg anti-hbc IgM anti-hbc anti-hbs HBsAg anti-hbc anti-hbs Positivo Positivo Negativo Negativo Negativo Positivo Negativo Soggetto con infezione cronica 4 possibilità: Falso positivo In fase di guarigione da epatite acuta Epatite guarita da molto tempo Epatite cronica con bassi livelli HBsAg
44 ricerca degli acidi nucleici (DNA) cccdna: covalently closed circular DNA presente nell epatocita nelle infezioni persistenti diagnosi di infezione approccio terapeutico monitoraggio della terapia Tests qualitativi Tests quantitativi ~15-25 a infinito
45 Terapia e Prevenzione
46 TERAPIA non esiste una terapia per la forma acuta per le forme croniche: IFN-a LAMIVUDINA (inibitore trascrittasi inversa) ADEFOVIR DIPIVOXIL e famciclovir (analoghi nucleosidici)
47 PREVENZIONE MISURE COMPORTAMENTALI evitare comportamenti a rischio prevenzione del rischio professionale VACCINO HBIG (immunoglobuline anti-hbv)
48 VACCINO disponibile dal 1982, obbligatorio dal 1991 costituito da HBsAg ricombinante monovalente
49 VACCINO produzione del vaccino ricombinante HBV Gene S Plasmide + gene S Saccharomyces cerevisiae HBsAg
50 VACCINO profilassi pre - esposizione Marker Risultato Interpretazione HBsAg anti-hbc anti-hbs Negativo Negativo Positivo Soggetto immune per vaccinazione
51 non responders 5 10% delle persone non risponde alla vaccinazione con adeguati titoli anticorpali per cause genetiche, immunosoppressione, malattie croniche concomitanti non responders veri waning anti-hbs responders questi sembra siano comunque protetti verso la cronicizzazione Prevention of hepatitis B in nonresponders to initial hepatitis B virus vaccination Sjogren MH, Am J Med, 2005
52 profilassi post - esposizione VACCINO + HBIG in neonati da madri HBsAg positive in soggetti venuti a contatto con materiale infetto entro 1 settimana dalla esposizione, in sedi separate
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