Binding Properties and Diels Alder Activity. of an Efficient Antibody Catalyst
|
|
- Gianmaria Miele
- 8 anni fa
- Visualizzazioni
Transcript
1 Diss. ETH No Binding Properties and Diels Alder Activity of an Efficient Antibody Catalyst A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZURICH for the degree of Doctor of Natural Sciences presented by Andrea Piatesi Dipl. Natw. ETH born April 21, 1975 citizen of Lugano (TI) accepted on the recommendation of Prof. Dr. Donald Hilvert, examiner Prof. Dr. Dario Neri, co examiner Zurich, 2003
2 Summary This thesis describes the binding and catalytic properties of one of the most efficient Diels Alderase antibodies known. Catalytic antibody 1E9 is indeed able to accelerate the inverse electron demand [4+2] cycloaddition between tetrachlorothiophene dioxide and N ethylmaleimide with very high efficiency (EM of 1000 M) compared to other reported Diels Alder catalysts. This antibody was raised against a hexachloronorbornene hapten, which is an excellent mimic of the transition state of the catalyzed cycloaddition. Moreover, the recently solved crystal structure of 1E9 in complex with its hapten reveals almost perfect shape complementarity between protein and ligand. Therefore, 1E9 represents an ideal model system for the elucidation of the relationship between binding energy and catalysis of this important pericyclic process, for which Nature seems to provide only a limited number of catalysts. Detailed mechanistic characterization of 1E9 requires access to a considerable amount of protein. Chapter 2 is therefore focused on the generation of recombinant chimeric Fab versions of this antibody. Using the Canonical Sequence Approximation Approach it has been possible to identify 1E9 variants with increased stability and up to 25 fold improved yield compared to the parent antibody. The Met H87 Thr/Gly L63 Ser mutant can be obtained in useful amounts ( 4 mg/l fermentation culture) and exhibits binding and kinetic properties identical to those of the original IgG representing an excellent starting point for the investigation of this catalyst by sitedirected mutagenesis (Chapter 2). Antibody 1E9 shares its basic scaffold with a class of antibodies that recognizes small hydrophobic ligands such as anti progesterone antibody DB3, which was shown to cross react with structurally distinct steroids, and Diels Alderase antibody 39 A11, which was raised against a bicyclo[2.2.2]octene derivative. It has been suggested that the germ line precursor of these antibodies (VGAM3.8 and VK5.1 gene families) encode a promiscuous hydrophobic binding iii
3 pocket containing a conserved hydrogen bond donor for the ligand (Asn H35 ) and that its diversification during affinity maturation affords high affinity receptors for a large array of structurally diverse molecules. Comparison of the crystal structures of these affinity matured antibodies suggested that the Ser L89 Phe and Trp H47 Leu somatic mutations in 1E9 were largely responsible for the major changes in the shape of the binding pocket, while the CDR H3 residues at position H97, H100 and H100b seemed to modulate the complementarity more subtly. To explore the relationship between hapten complementarity and catalytic efficiency in 1E9, the residues that line the binding pocket have been mutagenized, introducing amino acids characteristic of the germ line sequence or of the structurally related antibodies DB3 and 39 A11. These results confirm the importance of somatic mutations at positions L89 and H47 for binding and catalysis by 1E9, as well as the role of highly conserved Asn H35 as an essential proton donor. They also show that, despite nearly perfect shape complementarity in the starting antibody, significant improvements in catalytic efficacy can still be achieved by mutation within the CDR H3 loop lining the active site (Chapter 3). The close relationship between 1E9 and the steroid binder antibody DB3 raises the provocative question whether it is possible to interconvert two affinity matured antibodies and, if so, how much sequence information is required to effect the conversion. The heavy and light chain sequences of both antibodies are, respectively, 80% and 89% identical, differing in total by 36 mutations. Despite the high degree of sequence identity, the shapes of their active sites differ substantially and the only two common residues that line both active sites are the highly conserved Asn H35 and Trp H50. Furthermore, DB3 does not accelerate the reaction catalyzed by 1E9, but both antibodies, besides binding their respective haptens with nanomolar affinities, crossreact with each other s ligand, although with much lower affinities. In an attempt to define the minimal set of changes required to interconvert 1E9 into DB3, the active site residues of the former have been sequentially replaced with the ones present in the latter. This study allowed the identification of two active site mutations iv
4 (Leu H47 Trp and Arg H100 Trp) which, when combined, turn Diels Alderase antibody 1E9 into a high affinity steroid binder with exactly the same recognition properties as DB3 (Chapter 4). Although 1E9 is one of the most efficient Diels Alderase antibodies known, it is unlikely to be fully evolved due to the intrinsic limitations of the immune system in generating highly diverse binding pockets for a specific ligand (Chapter 4). Given the already excellent fit between the hapten and the protein scaffold in this system, mutations that would improve the binding affinity for the hexachloronorbornene hapten, and therefore the catalytic efficiency (Chapter 3), are likely to be distant from the active site and difficult to predict in a rational manner. In Chapter 5, the feasibility of using yeast cell surface display and fluorescence activated cell sorting as a strategy to optimize the binding properties of catalytic antibody 1E9 has been established. After just two affinity mutagenesis steps and six kinetic screens by fluorescence activated cell sorting, it has been possible to evolve scfv 1E9 variants with up to 10 fold increased hapten affinity compared to the parent antibody. v
5 Sommario Questa tesi descrive le proprietà riconoscitive e catalitiche di uno fra i più efficienti anticorpi capaci di catalizzare la reazione di Diels Alder. L anticorpo catalitico 1E9 é infatti in grado di accelerare la cicloaddizione [4+2] a domanda elettronica inversa fra il diossido di tetraclorotiofene e l N etilmaleimmide molto più efficacemente (EM pari a 1000 M) rispetto ad altri biocatalizzatori conosciuti. Questo anticorpo è stato generato contro l aptene esacloronorbornene che è un eccellente analogo dello stato di transizione della suddetta reazione di cicloaddizione. La struttura a raggi X del complesso 1E9 aptene rivela, inoltre, un alto grado di complementarità fra il sito attivo dell anticorpo ed il legante. Considerando tutto ciò, 1E9 rappresenta un modello ideale per elucidare il rapporto fra l energia di legame e la catalisi di questo processo periciclico, del quale in Natura esistono solo pochi esempi. Studi meccanicistici su 1E9 richiedono una quantità considerevole di proteina. Il capitolo 2 è perciò centrato sulla produzione in E. coli di frammenti Fab di questo anticorpo. L uso del Canonical Sequence Approximation Approach ha permesso di individuare varianti di 1E9 significativamente più stabili e la cui produzione ha portato a rese fino a 25 volte maggiori rispetto all anticorpo originario. Il mutante Met H87 Thr/Gly L63 Ser può essere ottenuto in quantità rilevanti ( 4 mg/l di cultura fermentativa) ed esibisce le stesse proprietà riconoscitive e catalitiche dell immunoglobulina originale, rappresentando così un eccellente punto di partenza per lo studio di questo anticorpo attraverso mutagenesi. 1E9 condivide la propria struttura con una classe di anticorpi che legano piccole molecole idrofobe come ad esempio l anticorpo anti progesterone DB3, che è in grado di riconoscere steroidi strutturalmente distinti, e l anticorpo Diels Alderasi 39 A11, che è stato ottenuto contro un derivato del biciclo[2.2.2]ottene. È stato proposto che i geni precursori di questi anticorpi (VGAM3.8 e V κ 5.1) codifichino un sito attivo promiscuo ed idrofobo provvisto di un donatore di legame ad idrogeno vii
6 per l aptene (Asn H35 ) e che la sua diversificazione attraverso la maturazione somatica generi recettori ad alta affinità per un vasto numero di molecole strutturalmente diverse. Un confronto tra le strutture a raggi X di questi anticorpi maturi indica che le due mutazioni somatiche Ser L89 Phe e Trp H47 Leu presenti in 1E9 sono largamente responsabili delle marcate differenze di forma dei loro siti attivi. Nel sito attivo di 1E9, i residui H97, H100 e H100b appartenenti al loop CDR H3, sembrano tuttavia svolgere un ruolo più marginale nel riconoscimento dell aptene. Al fine di esplorare la relazione fra complementarità di forma ed efficienza catalitica, i residui presenti nel sito attivo di 1E9 sono stati mutati introducendo aminoacidi caratteristici del suo precursore, di DB3 e 39 A11 (Capitolo 3). I risultati ottenuti confermano l importanza delle mutazioni somatiche alle posizioni L89 e H47 per le peculiari proprietà di 1E9, così come il ruolo essenziale di Asn H35 nel donare un legame ad idrogeno strategico. Questi studi mostrano inoltre che, malgrado l alta complementarità di forma fra sito attivo e aptene, sono possibili miglioramenti significativi dell affinità di legame e dell efficienza catalitica introducendo mutazioni nel loop CDR H3. La forte somiglianza fra 1E9 e l anticorpo anti steroidale DB3 fa sorgere l interrogativo se sia possibile interconvertire questi due anticorpi maturi e, se sì, quanta informazione sia necessaria per effettuare la trasformazione. Le sequenze delle catene pesanti e leggere di entrambi gli anticorpi sono identiche, rispettivamente, per l 80% e l 89% e si differenziano per un totale di 36 mutazioni. La forma dei loro siti attivi, nonostante l alto grado di identicità delle sequenze, differisce sostanzialmente ed i soli due residui comuni sono l onnipresente Asn H35 e il Trp H50. Un ulteriore differenza è rappresentata dal fatto che, nonostante i due anticorpi siano in grado di riconoscere l aptene della controparte, sia pur con minor affinità, DB3 non accelera la cicloaddizione catalizzata da 1E9. Nel tentativo di definire un set minimo di mutazioni sufficiente a interconvertire 1E9 in DB3, i residui appartenenti al sito attivo del primo sono stati sequenzilamente sostituiti con quelli del secondo. Questa analisi sistematica ha permesso di individuare due mutazioni (Leu H47 Trp e Arg H100 Trp) che, se combinate, sono sufficienti a generare una variante viii
7 di 1E9 con le stesse proprietà riconoscitive dell anticorpo anti steroidale DB3 (Capitolo 4). 1E9 é fra i più efficienti anticorpi in grado di catalizzare la reazione di Diels Alder, tuttavia è improbabile che possa essere perfettamente evoluto a causa delle difficoltà intrinseche del sistema immunitario nel generare siti attivi altamente diversificati per uno specifico aptene (Capitolo 4). Dato l eccellente grado di complementarità fra aptene e proteina nel caso di 1E9, è probabile che mutazioni distanti dal sito attivo possano contribuire ad un miglioramento del legame con il legante e, in ultima analisi, portare ad un incremento dell efficienza catalitica. Tuttavia, prevedere razionalmente questo tipo di sostituzioni non è possibile. Il capitolo 5 dimostra la validità del yeast cell surface display unito a uno screening tramite fluorescence activated cell sorting (FACS) come strategia per ottimizzare le proprietà riconoscitive di 1E9 verso il proprio aptene. Dopo solo due cicli di errorprone PCR e sei screens cinetici usando FACS è stato possibile evolvere frammenti scfv di 1E9 con affinità di legame fino a 10 volte superiore rispetto all anticorpo originario. ix
Estendere Lean e Operational Excellence a tutta la Supply Chain
Estendere Lean e Operational Excellence a tutta la Supply Chain Prof. Alberto Portioli Staudacher www.lean-excellence.it Dipartimento Ing. Gestionale Politecnico di Milano alberto.portioli@polimi.it Lean
DettagliMechanisms of neuronal apoptosis and axon growth. presented by. Dipl. accepted on the recommendation of. Valeria Gagliardini. Bioc.hemi.
Diss. ETH N 13375 Mechanisms of neuronal apoptosis and axon growth A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZÜRICH for the degree of Doctor of Natural Science presented by
DettagliGstarCAD 2010 Features
GstarCAD 2010 Features Unrivaled Compatibility with AutoCAD-Without data loss&re-learning cost Support AutoCAD R2.5~2010 GstarCAD 2010 uses the latest ODA library and can open AutoCAD R2.5~2010 DWG file.
DettagliFigura 1. Rappresentazione della doppia elica di DNA e struttura delle differenti basi.
Sommario La molecola di DNA è deputata a conservare le informazioni genetiche necessarie per lo sviluppo ed il funzionamento degli organismi viventi. Poiché contiene le istruzioni per la costruzione delle
DettagliPezzi da ritagliare, modellare e incollare nell ordine numerico indicato.
La nuova Treddì Paper è un prodotto assolutamente innovativo rispetto ai classici Kit per il découpage 3D. Mentre i classici prodotti in commercio sono realizzati in cartoncino, la Treddì è in carta di
DettagliComputational and Mathematical Studies on Cellular Signal Initiation at the Receptors Level
Diss. ETH No. 21021 Computational and Mathematical Studies on Cellular Signal Initiation at the Receptors Level A dissertation submitted to ETH Zurich for the degree of Doctor of Sciences presented by
DettagliFinlabo Market Update (17/12/2014)
Finlabo Market Update (17/12/2014) 1 STOXX600 Europe Lo STOXX600 si è portato su un importante livello rappresentato dalla trend-line dinamica. Crediamo che da questi livelli possa partire un rimbalzo
DettagliMacromolecole Biologiche. I domini (III)
I domini (III) Domini α/β La cross over connection è l unità costitutiva su cui si basa la topologia di 3 tipi di domini α/β osservati nelle proteine: - α/β barrel - motivi ricchi di Leu (fold a ferro
DettagliI motivi generalmente si combinano a formare strutture globulari compatte, chiamate domini. Una proteina può essere costituita da uno o più domini.
I motivi generalmente si combinano a formare strutture globulari compatte, chiamate domini. Una proteina può essere costituita da uno o più domini. I domini sono definiti come una catena polipeptidica
DettagliDiss: ETH. 26- Okt. 1990. Cat_. presented by. Dipl. ETH Natw. Accepted on the recommendation of. Diss. ETH No 9131
Diss: ETH 26- Okt. 1990 Diss. ETH No 9131 CHROMATIN STRUCTURE DURING TRANSCRIPTION IN THE YEAST SACCHAROMYCES CEREVISIAE A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZÜRICH for
DettagliIl differenziamento cellulare
Liceo Classico M. Pagano Campobasso Docente: prof.ssa Patrizia PARADISO Allieve (cl. II sez. B e C): BARONE Silvia Antonella DI FABIO Angelica DI MARZO Isabella IANIRO Laura LAUDATI Federica PETRILLO Rosanna
DettagliResearch Collection. A low-power CMOS Bluetooth transceiver. Doctoral Thesis. ETH Library. Author(s): Beffa, Federico. Publication Date: 2003
Research Collection Doctoral Thesis A low-power CMOS Bluetooth transceiver Author(s): Beffa, Federico Publication Date: 2003 Permanent Link: https://doi.org/10.3929/ethz-a-004629477 Rights / License: In
DettagliANTIVIRALCD8 T CELL RESPONSE: ROLE OF PERSISTENTANTIGEN AND OFT HELP. for the degree of Doctor of Natural Sciences. Presentedby PAOLAAGNELLINI
DISS. ETH NO. 17413 ANTIVIRALCD8 T CELL RESPONSE: ROLE OF PERSISTENTANTIGEN AND OFT HELP A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGYZÜRICH for the degree of Doctor of Natural
DettagliGraphs: Cycles. Tecniche di Programmazione A.A. 2012/2013
Graphs: Cycles Tecniche di Programmazione Summary Definitions Algorithms 2 Definitions Graphs: Cycles Cycle A cycle of a graph, sometimes also called a circuit, is a subset of the edge set of that forms
DettagliTHINKING DIGITAL SYNCHRONIZING WITH THE FUTURE PENSIERO DIGITALE: SINCRONIZZARSI COL FUTURO
THINKING DIGITAL SYNCHRONIZING WITH THE FUTURE PENSIERO DIGITALE: SINCRONIZZARSI COL FUTURO A STEP FORWARD IN THE EVOLUTION Projecta Engineering developed in Sassuolo, in constant contact with the most
DettagliCalcolo efficienza energetica secondo Regolamento UE n. 327/2011 Energy efficiency calculation according to EU Regulation no.
Calcolo efficienza energetica secondo Regolamento UE n. 327/2011 Energy efficiency calculation according to EU Regulation no. 327/2011 In base alla direttiva ErP e al regolamento UE n. 327/2011, si impone
DettagliElectronic Supplementary Information for: protein KLHL40 changes upon nemaline myopathy. associated mutation
Electronic Supplementary Material (ESI) for RSC Advances. This journal is The Royal Society of Chemistry 2016 Electronic Supplementary Information for: The dynamics of the β-propeller domain in Kelch protein
DettagliDomanda. L approccio interprofessionale in sanità: razionale ed evidenze. Programma. Programma
Domanda L approccio interprofessionale in sanità: razionale ed evidenze Perché è necessario un approccio interprofessionale in sanità? Giorgio Bedogni Unità di Epidemiologia Clinica Centro Studi Fegato
DettagliLa qualità vista dal monitor
La qualità vista dal monitor F. Paolo Alesi - V Corso di aggiornamento sui farmaci - Qualità e competenza Roma, 4 ottobre 2012 Monitoraggio La supervisione dell'andamento di uno studio clinico per garantire
DettagliREGISTRATION GUIDE TO RESHELL SOFTWARE
REGISTRATION GUIDE TO RESHELL SOFTWARE INDEX: 1. GENERAL INFORMATION 2. REGISTRATION GUIDE 1. GENERAL INFORMATION This guide contains the correct procedure for entering the software page http://software.roenest.com/
DettagliAPI e socket per lo sviluppo di applicazioni Web Based
API e socket per lo sviluppo di applicazioni Web Based Cosa sono le API? Consideriamo il problema di un programmatore che voglia sviluppare un applicativo che faccia uso dei servizi messi a disposizione
DettagliA dissertation submitted to ETH ZURICH. for the degree of Doctor of Sciences. presented by DAVIDE MERCURIO
DISS. ETH NO. 19321 DISCRETE DYNAMIC EVENT TREE MODELING AND ANALYSIS OF NUCLEAR POWER PLANT CREWS FOR SAFETY ASSESSMENT A dissertation submitted to ETH ZURICH for the degree of Doctor of Sciences presented
Dettagli/. ^y^cr-^a. Bandwidth and Energy Efficiency. Continuous-Phase Modulation. and Coding for. 2?.g. g& presented by Bixio E. Rimoldi. dipl. El. Ing.
Diss. ETH No.8629 /. ^y^cr-^a 2?.g. g& Continuous-Phase Modulation and Coding for Bandwidth and Energy Efficiency A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZÜRICH for the degree
DettagliIntroduzione Kerberos. Orazio Battaglia
Orazio Battaglia Il protocollo Kerberos è stato sviluppato dal MIT (Massachusetts Institute of Tecnology) Iniziato a sviluppare negli anni 80 è stato rilasciato come Open Source nel 1987 ed è diventato
Dettagliformati > formats Esagono 15 15x17 (6 x6.7 ) Esagono 5 5x5,7 (2 x2.2 ) Optical Mod. A 15x17 (6 x6.7 ) Optical Mod. B 15x17 (6 x6.
Catalogo Catalogue >2 Assecondando l evoluzione della piastrella diamantata a rivestimento, è giunto il momento per ETRURIA design di pensare anche al pavimento. La prima idea è quella di portare il diamantato
DettagliCANCRO DEL POLMONE. 1. Epidemiologia 2. Anatomia Patologica 3. Clinica. 4. Diagnostica 5. Stadiazione 6. Tecnica Chirurgica.
CANCRO DEL POLMONE Prof. Francesco PUMA CANCRO DEL POLMONE 1. Epidemiologia 2. Anatomia Patologica 3. Clinica 4. Diagnostica 5. Stadiazione 6. Tecnica Chirurgica Iter Diagnostico A Stadiazione Istotipo
DettagliOnda. A = ampiezza. = lunghezza d onda distanza tra due max o min successivi. = frequenza numero di oscillazioni in 1 sec. Lunghezza d'onda e Ampiezza
Onda A Lunghezza d'onda e Ampiezza = lunghezza d onda distanza tra due max o min successivi A = ampiezza = frequenza numero di oscillazioni in 1 sec. c = velocità di propagazione della luce nel vuoto (3
DettagliLA SOLUZIONE PER I VOSTRI PROBLEMI
Conservatori serie MULTIPLUS I MULTIPLUS sono impianti studiati e realizzati da ACF per soddisfare l esigenza di quegli operatori che desiderino effettuare sia il ciclo di abbattimento-surgelazione sia
DettagliExamples of chemical equivalence
hemical equivalence Two spins are chemically equivalent if: There is a symmetry operation that exchange their positions, or There is a dynamic process between two or more energetically equivalent conformations
DettagliData Alignment and (Geo)Referencing (sometimes Registration process)
Data Alignment and (Geo)Referencing (sometimes Registration process) All data aquired from a scan position are refered to an intrinsic reference system (even if more than one scan has been performed) Data
DettagliWe take care of your buildings
We take care of your buildings Che cos è il Building Management Il Building Management è una disciplina di derivazione anglosassone, che individua un edificio come un entità che necessita di un insieme
DettagliCombinazioni serie IL-MIL + MOT
Combinazioni tra riduttori serie IL-MIL e MOT Combined series IL-MIL + MOT reduction units Combinazioni serie IL-MIL + MOT Sono disponibili varie combinazioni tra riduttori a vite senza fine con limitatore
DettagliBiologia Molecolare. CDLM in CTF 2010-2011 L analisi del genoma
Biologia Molecolare CDLM in CTF 2010-2011 L analisi del genoma L analisi del genoma n La tipizzazione del DNA n La genomica e la bioinformatica n La genomica funzionale La tipizzazione del DNA DNA Fingerprinting
DettagliUniversità di Roma Tor Vergata - Corso di Laurea in Scienze Biologiche - Immunologia Molecolare - dott. Claudio PIOLI - a.a.
Anticorpi generalità Riconoscimento antigene Anticorpi Molecole MHC Recettore per l Ag dei linfociti T (TCR) Anticorpi riconoscono diversi tipi di strutture antigeniche macromolecole proteine, lipidi,
DettagliQuality Certificates
Quality Certificates Le più importanti certificazioni aziendali, di processo e di prodotto, a testimonianza del nostro costante impegno ed elevato livello di competenze. Qualità * certificata * Certified
DettagliDr Mila Milani. Comparatives and Superlatives
Dr Mila Milani Comparatives and Superlatives Comparatives are particular forms of some adjectives and adverbs, used when making a comparison between two elements: Learning Spanish is easier than learning
DettagliINFORMAZIONE AGLI UTENTI DI APPARECCHIATURE DOMESTICHE O PROFESSIONALI
INFORMAZIONE AGLI UTENTI DI APPARECCHIATURE DOMESTICHE O PROFESSIONALI Ai sensi dell art. 13 del Decreto Legislativo 25 luglio 2005, n. 151 "Attuazione delle Direttive 2002/95/CE, 2002/96/CE e 2003/108/CE,
DettagliM/S CERAMICA SCARABEO Località Pian del Trullo 01034 Fabrica di Roma (VT), ITALY. 01034 Fabrica di Roma (VT), ITALY. C. A. Sig.
M/S C. A. Sig. Calisti Giampaolo RAPPORTO DI PROVA del LABORATORIO TECNOLOGICO N 65d/2013 in accordo con la norma UNI EN 14688 sul lavabo LUNA TECHNOLOGIAL LABORATORY TEST REPORT N 65d/2013 in compliance
DettagliResearch Collection. Statistical decisions based directly on the likelihood function. Doctoral Thesis. ETH Library. Author(s): Cattaneo, Marco E.G.V.
Research Collection Doctoral Thesis Statistical decisions based directly on the likelihood function Author(s): Cattaneo, Marco E.G.V. Publication Date: 2007 Permanent Link: https://doi.org/10.3929/ethz-a-005463829
DettagliFinite Model Theory / Descriptive Complexity: bin
, CMPSCI 601: Recall From Last Time Lecture 19 Finite Model Theory / Descriptive Compleity: Th: FO L DSPACE Fagin s Th: NP SO. bin is quantifier-free.!#"$&% ('*), 1 Space 0 1 ) % Time $ "$ $ $ "$ $.....
DettagliCOMPARATIVE ANALYSIS OF mrna TARGETS FOR HUMAN PUF-FAMILY RNA-BINDING PROTEINS
DISS. ETH NO. 18803 COMPARATIVE ANALYSIS OF mrna TARGETS FOR HUMAN PUF-FAMILY RNA-BINDING PROTEINS A dissertation submitted to ETH ZURICH for the degree of Doctor of Sciences presented by ALESSIA GALGANO
DettagliPrincipi di Chimica Organica
Gianluca Giorgi Università degli Studi di Siena Dipartimento di Biotecnologie, Chimica e Farmacia via Aldo Moro 53100 Siena Tel. 0577-234241 e-mail:gianluca.giorgi@unisi.it Corsi di laurea in Scienze Ambientali
DettagliSezione 1 / Section 1. Elementi d identità: il marchio Elements of identity: the logo
Sezione 1 / Section 1 2 Elementi d identità: il marchio Elements of identity: the logo Elements of identity: the logo Indice 2.01 Elementi d identità 2.02 Versioni declinabili 2.03 Versioni A e A1, a colori
DettagliCompatibilità del Portale Piaggio con Internet Explorer 10 e 11. Internet Explorer 10
Italiano: Explorer 10 pagina 1, Explorer 11 pagina 2 English: Explorer 10 page 3 and 4, Explorer 11 page 5. Compatibilità del Portale Piaggio con Internet Explorer 10 e 11 Internet Explorer 10 Con l introduzione
DettagliStudio e implementazione di un OCR per auto-tele-lettura dei contatori di gas e acqua
POLITECNICO DI MILANO Corso di Laurea in Ingegneria Informatica Dipartimento di Elettronica e Informazione Studio e implementazione di un OCR per auto-tele-lettura dei contatori di gas e acqua AI & R Lab
DettagliANTIBODY PHAGE TECHNOLOGY: LIBRARY CONSTRUCTION AND APPLICATIONS
DISS. ETH NO. 18497 ANTIBODY PHAGE TECHNOLOGY: LIBRARY CONSTRUCTION AND APPLICATIONS A dissertation submitted to the ETH ZURICH for the degree of Doctor of Sciences presented by Valeria Lovato Laurea in
DettagliAVERE 30 ANNI E VIVERE CON LA MAMMA BIBLIOTECA BIETTI ITALIAN EDITION
AVERE 30 ANNI E VIVERE CON LA MAMMA BIBLIOTECA BIETTI ITALIAN EDITION READ ONLINE AND DOWNLOAD EBOOK : AVERE 30 ANNI E VIVERE CON LA MAMMA BIBLIOTECA BIETTI ITALIAN EDITION PDF Click button to download
DettagliPannello Lexan BIPV. 14 Gennaio 2013
Pannello Lexan BIPV 14 Gennaio 2013 PANELLO LEXAN* BIPV Il pannello Lexan BIPV (Building Integrated Photovoltaic panel) è la combinazione di una lastra in policarbonato Lexan* con un pannello fotovoltaico
DettagliUtilizzo e valutazione dell'offerta pubblica e privata di servizi radiotelevisivi nel 2017
Utilizzo e valutazione dell'offerta pubblica e privata di servizi radiotelevisivi nel 2017 Rapporto finale Benjamin Fretwurst, Céline Murri, Thomas Friemel, Heinz Bonfadelli Panoramica grafica 3 Fretwurst/Murri/Friemel/Bonfadelli
DettagliIl gis nelle indagini del territorio: Ricostruzione tridimensionale del sottosuolo
Il gis nelle indagini del territorio: Ricostruzione tridimensionale del sottosuolo A. Genito, L. Donate Blázquez, U. Malvone, Strago S.p.a. andrea.genito@strago.it laura.donate@strago.it ubaldo.malvone@strago.it
DettagliNonlinear Dynamics in Chemical Systems. Distillation Columns and Aggregation Units.
Diss. ETH No. 15304 Nonlinear Dynamics in Chemical Systems. Distillation Columns and Aggregation Units. A dissertation submitted to the Swiss Federal Institute of Technology (ETH) Zurich for the degree
DettagliSynthesis and Reactivity of Silica-Grafted Iridium Pincer Complexes
DISS. T N. 21754 Synthesis and eactivity of lica-grafted idium incer Complexes A dissertation submitted to T ZUIC for the degree of DCT F SCINCS resented by MATIN IMLDI Dottore magistrale in Scienze Chimiche,
DettagliRegulation of Neural Crest Stem Cell Development. Stine Büchmann-Møller
Diss ETH No. 18562 Regulation of Neural Crest Stem Cell Development A dissertation submitted to the SWISS FEDERAL INSTITUTE OF TECHNOLOGY ZURICH for the degree of Doctor of Sciences presented by Stine
Dettaglila struttura tridimensionale può essere ottenuta solo per Un intero dominio in genere da 50 a 300 residui
Durante la traduzione l informazione di ripiegamento codificata nella sequenza aminoacidica diventa disponibile in maniera vettoriale la struttura tridimensionale può essere ottenuta solo per Un intero
DettagliProf. Maria Nicola GADALETA
Prof. Maria Nicola GADALETA Email: m.n.gadaleta@biologia.uniba.it Facoltà di Scienze Biotecnologiche Corso di Laurea in Biotecnologie Sanitarie e Farmaceutiche Biochimica e Biotecnologie Biochimiche DISPENSA
DettagliInformazione e salute : l esperienza di Corriere salute.it
Comunicazione sociale per la salute SALUTE 2.0 ESPERIENZE E INTERROGATIVI VENERDI 26 NOVEMBRE 2010 Biblioteca Universitaria di Bologna - Bologna Informazione e salute : l esperienza di Corriere salute.it
DettagliLe Biomolecole I parte. Lezioni d'autore di Giorgio Benedetti
Le Biomolecole I parte Lezioni d'autore di Giorgio Benedetti LE BIOMOLECOLE Le biomolecole, presenti in tutti gli esseri viventi, sono molecole composte principalmente da carbonio, idrogeno, azoto e ossigeno.
Dettagli4 6 7 7 8 8 9 10 11 14 15 17 21 25 Riassunto Realizzazione di un Sistema Informativo Territoriale per la sorveglianza sanitaria della fauna nel Parco Nazionale della Majella tramite software Open Source
DettagliBiodiversità delle popolazioni microbiche: tra adattamento e biotecnologia
Biodiversità delle popolazioni microbiche: tra adattamento e biotecnologia Lorenzo Morelli Istituto di Microbiologia Facoltà di Agraria UCSC Piacenza In questa presentazione Peculiarità del genoma dei
DettagliU Corso di italiano, Lezione Quindici
1 U Corso di italiano, Lezione Quindici U Buongiorno, anche in questa lezione iniziamo con qualche dialogo formale M Good morning, in this lesson as well, let s start with some formal dialogues U Buongiorno,
DettagliM/S AMARU' GIOVANNI VIA S. ERASMO snc 02010 VASCHE DI CASTEL S. ANGELO (RI) ITALY
M/S 02010 VASCHE DI CASTEL S. ANGELO (RI) ITALY RAPPORTO DI PROVA del LABORATORIO TECNOLOGICO N 49/2012 in accordo con la norma UNI EN 14688 TECHNOLOGIAL LABORATORY TEST REPORT N 49/2012 In compliance
DettagliCopyright 2012 Binary System srl 29122 Piacenza ITALIA Via Coppalati, 6 P.IVA 01614510335 - info@binarysystem.eu http://www.binarysystem.
CRWM CRWM (Web Content Relationship Management) has the main features for managing customer relationships from the first contact to after sales. The main functions of the application include: managing
DettagliAccesso Mul*plo - modelli
Accesso Mul*plo - modelli Conceptual Model of Mul/ple Access A B C D Station A Station B Station C Station D Master Channel The Master does not know if and how many packets are present in each queue (i.e.,
DettagliEpithelial-Mesenchymal Transition in Cancer. Relevance of Periostin Splice Variants
DISS. ETH NO. 19590 Epithelial-Mesenchymal Transition in Cancer Relevance of Periostin Splice Variants A dissertation submitted to the ETH Zurich For the degree of Doctor of Sciences Presented by Laura
DettagliCAMBIO DATI PERSONALI - Italy
CAMBIO DATI PERSONALI - Italy Istruzioni Per La Compilazione Del Modulo / Instructions: : Questo modulo è utilizzato per modificare i dati personali. ATTENZIONE! Si prega di compilare esclusivamente la
DettagliAttuatore a relè Manuale di istruzioni
Attuatore a relè Manuale di istruzioni www.ecodhome.com 1 Sommario 3 Introduzione 4 Descrizione e specifiche prodotto 5 Installazione 6 Funzionamento 6 Garanzia 2 Introduzione SmartDHOME vi ringrazia per
DettagliLa Sua banca dovrá registrare il mandato di addebito nei propri sistemi prima di poter iniziare o attivare qualsiasi transazione
To: Agenti che partecipano al BSP Italia Date: 28 Ottobre 2015 Explore Our Products Subject: Addebito diretto SEPA B2B Informazione importante sulla procedura Gentili Agenti, Con riferimento alla procedura
DettagliSponsorship opportunities
The success of the previous two European Workshops on Focused Ultrasound Therapy, has led us to organize a third conference which will take place in London, October 15-16, 2015. The congress will take
DettagliEmissions-Controlled Diesel Engine
Diss. ETH No. 18214 Emissions-Controlled Diesel Engine A dissertation submitted to the Swiss Federal Institute of Technology Zurich for the degree of Doctor of Sciences presented by Ezio Alfieri Dipl.
DettagliATTESTATO DELL ATTIVITÀ DI VOLONTARIATO CERTIFICATE OF VOLUNTARY ACTIVITIES
ASSOCIAZIONE CONSORTI DIPENDENTI MINISTERO AFFARI ESTERI ATTESTATO DELL ATTIVITÀ DI VOLONTARIATO CERTIFICATE OF VOLUNTARY ACTIVITIES ASSOCIAZIONE CONSORT I DIPENDENTI MINISTE RO AFFARI ESTER I ATTESTATO
DettagliScritto da DEApress Lunedì 14 Aprile 2014 12:03 - Ultimo aggiornamento Martedì 26 Maggio 2015 09:34
This week I have been walking round San Marco and surrounding areas to find things that catch my eye to take pictures of. These pictures were of various things but majority included people. The reason
DettagliVolvo Simulated Operator training. Volvo Construction Equipment
Volvo Simulated Operator training 1 It doesn t matter how many sensors, systems and technology a machine has, our customers can t get the most out of them unless they know how to use them. Eco Operator
DettagliTACTÒ TASTIERA EFFETTO HALL KEY PAD HALL EFFECT
TACTÒ TASTIERA EFFETTO HALL KEY PAD HALL EFFECT edizione/edition 04-03 DESCRIZIONE DESCRIPTION DESCRIZIONE La nuova tastiera COBO è stata studiata per ottimizzare gli spazi all interno delle cabine moderne.
DettagliGRAFICO DI FUNZIONI GONIOMETRICHE
GRAFICO DI FUNZIONI GONIOMETRICHE y = A* sen x ( ω + ϕ ) Prerequisiti e Strumenti Obiettivi Tempi di lavoro Problema stimolo Descrizione consegne Verifica e valutazione Prerequisiti Prerequisiti disciplinari:
DettagliVLSI Circuits for Cryptographic Authentication
Diss. ETH No. 19351 VLSI Circuits for Cryptographic Authentication A dissertation submitted to ETH ZURICH for the degree of Doctor of Sciences presented by LUCA HENZEN Dipl. El.-Ing. ETH (MSc ETH) born
DettagliDISS. ETH NO. 22010 PHYSICAL AND CHEMICAL GELS. A thesis submitted to attain the degree of. DOCTOR OF SCIENCES of ETH ZURICH. (Dr. Sc.
DISS. ETH NO. 22010 PHYSICAL AND CHEMICAL GELS A thesis submitted to attain the degree of DOCTOR OF SCIENCES of ETH ZURICH (Dr. Sc. ETH Zurich) Presented by Stefano Lazzari M.Sc. in Chemical Engineering,
DettagliPATENTS. December 12, 2011
December 12, 2011 80% of world new information in chemistry is published in research articles or patents Source: Chemical Abstracts Service Sources of original scientific information in the fields of applied
DettagliScheduling. Scheduler. Class 1 Class 2 Class 3 Class 4. Scheduler. Class 1 Class 2 Class 3 Class 4. Scheduler. Class 1 Class 2 Class 3 Class 4
Course of Multimedia Internet (Sub-course Reti Internet Multimediali ), AA 2010-2011 Prof. 4. Scheduling Pag. 1 Scheduling In other architectures, buffering and service occur on a per-flow basis That is,
DettagliProgettazione e analisi strutturale di un generatore solare d'alta potenza per veicoli spaziali UNIVERSITÀ DI PISA. Facoltà di Ingegneria
UNIVERSITÀ DI PISA Facoltà di Ingegneria Corso di Laurea Specialistica in Ingegneria Aerospaziale Tesi di laurea Specialistica Progettazione e analisi strutturale di un generatore solare d'alta potenza
DettagliMark Scheme (Results) Summer 2007
Mark Scheme (Results) Summer 2007 GCE GCE Italian (6566/02) Edexcel Limited. Registered in England and Wales No. 4496750 Registered Office: One90 High Holborn, London WC1V 7BH 6566/02 Reading and Writing
DettagliMacromolecole Biologiche. I domini (I)
I domini (I) I domini I motivi generalmente si combinano a formare strutture globulari compatte, chiamate domini. Una proteina può essere costituita da uno o più domini. I domini sono definiti come una
DettagliLA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO TESTAMENTO VERSIONE RIVEDUTA BY GIOVANNI LUZZI
Read Online and Download Ebook LA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO TESTAMENTO VERSIONE RIVEDUTA BY GIOVANNI LUZZI DOWNLOAD EBOOK : LA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO Click link bellow and
DettagliUNIVERSITÀ DI PISA FACOLTÀ DI INGEGNERIA
UNIVERSITÀ DI PISA FACOLTÀ DI INGEGNERIA CORSO DI LAUREA IN INGEGNERIA DELLE TELECOMUNICAZIONI Tesi di Laurea Analisi statistica di propagazione di campo elettromagnetico in ambiente urbano. Relatori:
DettagliTancredi Mangano Volti in trappola, 1994-ongoing series
Tancredi Mangano Volti in trappola, 1994-ongoing series La serie di Volti in trappola nasce da una lunga procedura. Dopo avere emulsionato col nerofumo una serie di lastrine di vetro e aver preso con queste
DettagliLA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO TESTAMENTO VERSIONE RIVEDUTA BY GIOVANNI LUZZI
Read Online and Download Ebook LA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO TESTAMENTO VERSIONE RIVEDUTA BY GIOVANNI LUZZI DOWNLOAD EBOOK : LA SACRA BIBBIA: OSSIA L'ANTICO E IL NUOVO Click link bellow and
DettagliPortale Materiali Grafiche Tamburini. Grafiche Tamburini Materials Portal
Portale Materiali Grafiche Tamburini Documentazione utente italiano pag. 2 Grafiche Tamburini Materials Portal English user guide page 6 pag. 1 Introduzione Il Portale Materiali è il Sistema Web di Grafiche
DettagliStruttura secondaria
Struttura secondaria Struttura localmente ordinata Polimeri lineari ad unità monomeriche asimmetriche elica j = 0,1,2,..., N N = numero di residui z j = h z j + z 0 x j = r cos (j2p h z /P + d 0 ) y j
DettagliINTRODUZIONE AL SISTEMA IMMUNITARIO
INTRODUZIONE AL SISTEMA IMMUNITARIO PERCHE STUDIAMO IL SISTEMA IMMUNITARIO? L IMPORTANZA DEL SISTEMA IMMUNITARIO! THE IMMUNE SYSTEM HAS EVOLVED FOR THE PROTECTION AGAINST PATHOGENS Microorganisms come
DettagliUTILIZZATORI A VALLE: COME RENDERE NOTI GLI USI AI FORNITORI
UTILIZZATORI A VALLE: COME RENDERE NOTI GLI USI AI FORNITORI Un utilizzatore a valle di sostanze chimiche dovrebbe informare i propri fornitori riguardo al suo utilizzo delle sostanze (come tali o all
DettagliDe-constructing and Reconstructing. Life. (smontare e costruire oggetti biologici)
De-constructing and Reconstructing Life (smontare e costruire oggetti biologici) ogni oggetto biologico rappresenta un particolare stato di aggregazione e di organizzazione della materia, corrispondente
Dettagli07150 - METODOL.E DETERMINAZ. QUANTITATIVE D'AZIENDA
Testi del Syllabus Docente AZZALI STEFANO Matricola: 004466 Anno offerta: 2014/2015 Insegnamento: 07150 - METODOL.E DETERMINAZ. QUANTITATIVE D'AZIENDA Corso di studio: 3004 - ECONOMIA E MANAGEMENT Anno
DettagliPROTEINE RESPIRATORIE DEI VERTEBRATI EMOGLOBINA E MIOGLOBINA
PROTEINE RESPIRATORIE DEI VERTEBRATI EMOGLOBINA E MIOGLOBINA Svolgono la loro funzione legando reversibilmente l OSSIGENO. Aumentano la solubilità dell ossigeno nel plasma, da 3ml/L a 220 ml/l. La mioglobina
DettagliSingle-rate three-color marker (srtcm)
3. Markers Pag. 1 The Single Rate Three Color Marker (srtcm) can be used as component in a Diffserv traffic conditioner The srtcm meters a traffic stream and marks its packets according to three traffic
DettagliCHIMICA ORGANICA: IBRIDAZIONE & RISONANZA IBRIDIZZAZIONE. un atomo compie all atto di formazione di un composto al fine di formare un maggior
CHIMICA ORGANICA: IBRIDAZIONE & RISONANZA IBRIDIZZAZIONE L ibridizzazione o ibridazione è una ricombinazione dei propri orbitali atomici che un atomo compie all atto di formazione di un composto al fine
DettagliESPERIENZA ITALIA GUIDELINES
ESPERIENZA ITALIA GUIDELINES Il 150 dell unità d Italia rappresenta un evento di cruciale importanza per Torino e il Piemonte. La prima capitale d Italia, come già fece nel 1911 e nel 1961 per il Cinquantenario
DettagliTutti i contenuti sono di proprietà letteraria riservata di Roberta Cocco e protetti dal diritto d autore. Si ricorda che il materiale didattico è
Il potere del brand risiede nella mente dei consumatori Il modello CBBE affronta la brand equity dal punto di vista del consumatore. Esso parte dal presupposto che per avere successo l impresa deve conoscere
DettagliLe Ig sono glicoproteine costituite da 4 catene polipeptidiche:
Struttura delle Ig Le Ig sono glicoproteine costituite da 4 catene polipeptidiche: 2 catene pesanti H (heavy( heavy) di P.M. 50.000 D, formate da c/a 450 amminoacidi 2 catene leggere L (light) Di P.M.
DettagliPentair ensures that all of its pumps (see Annex) affected by the above mentioned Regulation meet the 0,1 MEI rating.
DIRECTIVE 29/125/EC - REGULATION EU 547/212 Pentair informs you about the new requirements set by Directive 29/125/EC and its Regulation EU 547/212 regarding pumps for water. Here below you find a brief
DettagliDNA-Encoded Chemical Libraries
DISS. ETH NO. 18153 DNA-Encoded Chemical Libraries A dissertation submitted to the ETH Zurich For the degree of Doctor of Sciences Presented by Luca Mannocci Dott. Chim. Università degli Studi di Pisa
DettagliEsercitazioni di Genomica
Esercitazioni di Genomica Bioinformatica ai tempi del NGS, PhD CRIBI Biotechnology Center, University of Padua BMR Genomics srl, Spin-Off Giovanni Birolo, PhD CRIBI Biotechnology Center, University of
Dettagli