Colliri Biologici : Autosiero e lisato piastrinico. Laura MAZZUCCO - Valeria BALBO SC MEDICINA TRASFUSIONALE AO ALESSANDRIA

Transcript

1 Colliri Biologici : Autosiero e lisato piastrinico Laura MAZZUCCO - Valeria BALBO SC MEDICINA TRASFUSIONALE AO ALESSANDRIA

2 Terapia biologica La medicina rigenerativa sfrutta le potenzialità biologiche delle cellule come terapia per la riparazione dei tessuti Il ripristino della funzionalità di un tessuto danneggiato non è però limitato alla compensazione della sua componente cellulare danneggiata, ma dipende anche dalla ristabilizzazione dell omeostasi e del microambiente cellulare.

3 Questo concetto di riportare alla normalità il microambiente della zona danneggiata di un tessuto è il target che si vuole raggiungere con le terapie biologiche con emocomponenti per uso non trasfusionale anche in ambito oculistico concetto che si rincorre da parecchi anni

4 PREMESSA : la caratteristica più importante di questi prodotti/preparati derivati da tessuti (sangue, sangue cordonale, membrana amniotica) è il rilascio nel sito di applicazione di un insieme di biomolecole che agiscono contemporaneamente attivando fenomeni autocrini e paracrini e creando un network di azioni che inducono poi l effetto biologico della riparazione / rigenerazione/ guarigione Network PF4 GF MMP GF GF IL GF FIBR TNF IL

5 Emocomponenti per uso topico - collirio..le frazioni del sangue che vengono utilizzate per i colliri biologici Siero Plasma Ricco di Piastrine sangue privo di anticoagulante parte non corpuscolata del sangue che si separa dopo la coagulazione Plasma sangue con anticoagulante matrice fluida che si separa dalla parte corpuscolata sangue con anticoagulante frazione di plasma che contiene un numero di piastrine superiore almeno di 4 volte il valore basale

6 Siero AUTO Siero COLLIRIO È sicuramente il primo emocomponente utilizzato come collirio,

7 AUTO Siero COLLIRIO Semplice e facile preparazione spesso fatta home made in modo un po grossolano diluito in fisiologica 10%, 20%, 30%, 50%????

8 AUTO Siero COLLIRIO Razionale scientifico...contiene molte proteine della matrice extracellulare Fibronectina Albumina Vitamina A Vitamina E VIT A ng/ml VIT E ng/ml FIBRONECTIN ng/ml 3,52±1,02 35,6±8,2 455,1±65,6 Table 1 from: Transfusion 2004; 44:

9 AUTO Siero COLLIRIO Razionale scientifico. Duplice Azione Rigenerante cellule 6 h 24 h matrice extracellulare

10 I GF sono molecole segnale che agiscono legandosi ai recettori di membrana delle cellule target attivando la trasduzione del segnale e quindi la gene regulation proliferazione, differenziazione, apoptosi della cellula

11 Pertanto per ovviare metodica di preparazione high variability DM 02 novembre 2015 CP deve contenere 1 x 10 6 piastrine /microlitro ± 20% STANDARD DI PRODOTTO

12 Preparazione dei colliri biologici da emocomponenti Obiettivi Ottimizzazione della preparazione dei prodotti Valutazioni in vitro dose/risposta Standardizzazione della preparazione Ricerca di un device adeguato alla somministrazione safe e monodose e di facile utilizzo per il paziente

13 Step 3 Preparazione autosiero collirio SIMT AO Alessandria arruolamento del paziente (consenso informato) prelievo venoso (48 ml) provetta dedicata (MD) lavorazione del campione sotto cappa a flusso laminare biohazard

14 Preparazione Concentrato Piastrinico collirio SIMT AO Alessandria 60 ml of anticoagulated (ACD-A) peripheral blood was collected from each patient and centrifuged to obtain autologous Platelet Rich Plasma. PRP was frozen and thawed (- 80 C /+37 C) to obtain platelets lysis (CP lys ). The preparation for eye drops was diluted with a sterile balanced saline solution final concentration and was aliquoted with specific device in 30 sterile doses, one dose per day, to be stored in the patients own freezer ( 20 C). All samples were subjected to microbiological control to verify the sterility.

15 Consegna al paziente. che utilizza a domicilio (max 30 dosi) Istruzioni per la conservazione Dosi non in uso -18 C Dosi in uso +4 / +8 C Mai lasciare a temperatura ambiente!!!!!

16 Decreto Ministeriale 2 novembre 2015 Art.20 - Allegato X definisce in modo dettagliato la preparazione e le caratteristiche degli emocomponenti per uso non trasfusionale. introducendo e definendo due nuovi prodotti: il Collirio di lisato piastrinico e il CP da sangue cordonale Maggio 2012

17

18 Utilizzo del sangue cordonale che non raggiunge i requisiti quantitativi previsti per il bancaggio Concentrato piastrinico Siero collirio CBPG Concentrato piastrinico collirio

19 uguale efficacia UCS migliora il controllo del dolore

20 IERI Si No Normativa Si No Caratteristiche di prodotto Si No Evidence base medicine? OGGI Si No Normativa Si No Caratteristiche di prodotto Si No Evidence base medicine