MICRO-RNA, markers di placca carotidea a rischio
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1 XVI CONGRESSO NAZIONALE Bologna, ttobre MICRO-RNA, markers di placca carotidea a rischio A.Cardini, E.Morlacchi, F.D Angelo, L.Zorzan,G.Spinetti,G.Lanza Unità Operativa di Chirurgia Vascolare Ospedale MultiMedica Castellanza Centro Ricerche Genetiche MultiLab IRCCS Multimedica
2 Razionale e obiettivo della ricerca E nota in letteratura la correlazione tra tipologia di placca carotidea e rischio di eventi ischemici cerebrovascolari. Recenti ricerche ipotizzano il ruolo attivo di alcuni micro RNA nell eziopatogenesi dell aterosclerosi. Obiettivo dello studio : cercare una correlazione tra tipizzazione micro-genica (mirna), tipologia di ateroma carotideo e rischio di eventi ischemici cerebrovascolari.
3 MiRs biogenesis, processing, function - Determinati mirna regolano la traduzione di mrna codificanti proteine che hanno un ruolo importante in processi quali l apoptosi, la proliferazione cellulare e l insorgenza di cancro (sopressori-oncogeni)
4 MiRs play a key role in human physiology
5 mi RNA e implicazioni TUMORI mir-15, mir-16 mir-155, mir-17-5p, mir-21,mir-183 mir-15, mir-16 e let-7 DIABETE mirna-375 SISTEMA NERVOSO (SCHIZOFRENIA) mir-132, mir-124, mir-134, mir-138 mirna oncogeni espressione ridotta nella leucemia linfatica cronica (Calin et al., 2002) mirna oncosoppressori in assenza diabete (morte cellule Beta) (Schickel et al, 2008) CARDIOPATIA mir-29,mir-133 mir-221, mir-222 mir-21 ATEROSCLEROSI mir-100, mir-127, mir-145, mir-133a e mir-133b (infiammazione, apoptosi, stress ossidativo, differenziazione e proliferazione cellule muscolari lisce, turnover collagene extracellulare, trombosi, alterazione del metabolismo del colesterolo) espressione ridotta nel rimodellamento post-ima, fibrosi cardiaca (van Rooij et al,pnas, Set2,2008) iperplasia neointimale, proliferazione cellule muscolari liscie (Liu et al, Circ Res 2009) iperespresso nel cuore scompensato e contribuisce all insufficienza cardiaca mediante la regolazione di un pathway di segnale di risposta allo stress, associato a cambiamenti nella struttura e nella funzione della muscolatura cardiaca oligonucleotide antisenso, anti-mir-21, denominato Antagomir (Ji et al, Circ Res 2007) ruolo importante nell evoluzione della placca aterosclerotica instabilità e rottura (Cipollone et al, Stroke 2011)
6 PAZIENTI TEA carotidea per stenosi = /> 70 % (m. NASCET) Controlli Soggetti senza stenosi carotidea (67.5%) 36 (72.0%) 14 (32.5%) 14 (28.0%) FATTORI di RISCHIO test Ipertensione arteriosa 38 (88%) 35 (70%) (p> 0.05) CAD 32 (74%) 32 (64%) (p>0.05) Fumo 28 (65%) 38 (76%) (p> 0.05) Dislipidemia 10 (23%) 14 (28%) (p> 0.05)
7 I 43 pazienti sottoposti a TEA carotidea sono stati classificati in sintomatici (TIA/minor stroke da < 3 mesi) asintomatici con placca soft : ecolucente > 30% aspetto macro e micro scopico con placca medium-hard : ecolucente < 30% aspetto macro e micro scopico 20 pz (46.5%) con placca soft 8 pz ( 40%) sintomatici 12 pz (60%) asintomatici 2 pz (8.7 %) sintomatici 23 pz (53.5 %) con placca medium hard 21pz ( 91.3%) asintomatici
8 Nel siero di tutti i pazienti ( operati e controlli ) e nelle placche dei pazienti operati di TEA carotidea sono stati testati i Relative Expression Levels (REL) dei seguenti mirna : mir 1 mir 133 mir 143 mir 145 mir Campione di Siero: Provetta con EDTA da 6 ml Centrifuga a 4 C e poi in Frigo a -40 C 2. Placca: Provetta con RNA later Prima notte a 4 C Da giorno dopo a -40 C 3. Pezzo di parete: Provetta con RNA later Prima notte a 4 C Da giorno dopo a -40 C
9 Relative Expression Level nel plasma mir 1 mir 133 sintom asintom sintom asintom soft medium hard controlli
10 Relative Expression Level nelle placche mir 1 mir 133 mir soft medium hard sintom asintom sintom asintom sintom asintom
11 Conclusioni dai dati in nostro possesso e da altri dati in letteratura i mir giocherebbero un ruolo significativo nell eziopatogenesi, progressione e caratterizzazione dell aterosclerosi, in particolare dell ateroma carotideo e quindi del suo profilo di rischio (influenzerebbero la diversificazione in placca soft o medium-hard e quindi a diverso profilo di rischio); in particolare la caratterizzazione in placca soft-sintomatica sarebbe influenzata da una down-regulation del mir 1 e soprattutto mir 133 nel sangue circolante e da una up-regulation del mir 1 nell ateroma e inoltre da una down-regulation del mir 145 nell ateroma; è opportuno confermare, in un campione più significativo di placche e siero, questi dati; sembrano aprirsi nuovi filoni di ricerca in campo gnoseologicodiagnostico (REL di alcuni mir nel siero markers di patologia e di profilo di rischio) e in futuro magari in campo applicativo terapeutico (bioingegneria genetica).
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