LEUCEMIA LINFOBLASTICA ACUTA



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LEUCEMIA LINFOBLASTICA ACUTA F.Casale LEUCEMIE IN ETA PEDIATRICA Epidemiologia 35-40% di tutti i tumori infantili 36-42 nuovi casi/anno/milione di bambini (0-15 anni) LEUCEMIE ACUTE 95-97% linfoblastiche (LLA) 80-85 % non-linfoblastiche (LAnL) 15-20% LEUCEMIE CRONICHE 3-5%

LEUCEMIA LINFOBLASTICA ACUTA Definizione Malattia linfoproliferativa originata da un primitivo disordine della emopoiesi, che si manifesta con una proliferazione neoplastica, clonale, automantenuta, di precursori della linea linfoide, a livello midollare. LEUCEMIA LINFOBLASTICA ACUTA (LLA) Epidemiologia La leucemia linfoblastica acuta (LLA)è la più frequente neoplasia dell età pediatrica,costituendo più di un terzo di tutti i tumori dell infanzia e circa l 80 % di tutti i casi di leucemia acuta. Incidenza annuale Picco d incidenza 39 nuovi casi /1.000.000 di soggetti di età inferiore a 15 anni tra 2 e 5 anni di età Rapporto M/F 1,2-1,4 / 1

Presentazione clinica La sintomatologia della LLA è rappresentata da segni legati alla infiltrazione midollare e da segni legati alle localizzazioni extramidollari. Sintomi da infiltrazione midollare o segni da spiazzamento Astenia, anoressia, pallore da anemia 90% Infezione e/o febbre 70% Emorragie da piastrinopenia 50% Dolori ossei 75% Sintomi da localizzazione extra-midollare Splenomegalia- Epatomegalia 74-85% Linfoadenomegalia 75% Lesioni ossee 25% SNC Testicoli - Occhi 5% alla diagnosi rare alla diagnosi

Meningosi Leucemia SNC Sintomatologia meningea, papilledema Esame del liquor: > pressione, > proteine, < glucosio, presenza di blasti (alla citocentrifuga) Infiltrazione parenchimale : Emiparesi, paralisi dei nervi cranici, convulsioni. Sindrome cerebellare Sindrome ipotalamica Sindrome spinale atassia,discinesie,ipotonia,ipereflessia. bulimia, >peso, irsutismo, diabete insipido. parestesie, sciatalgia,incontinenza sfinterica Complicanze vita-limitanti alla diagnosi Compromissione dello stato ematologico: (anemia grave, infezioni severe, emorragie, trombosi, leucostasi a livello di vari organi o apparati) Infiltrazione diretta di organi da parte di cellule leucemiche (ad es.rene) Sindrome da lisi tumorale (nei casi di iperleucocitosi e di importante carico leucemico)

Sangue periferico: Midollo: Valutazione emato-midollare GR,Hb,P 90% N GB 45%, 28%, # 27% Morfologia Blasti 90% Infiltrazione blastica più o meno completa (> 25%) NB E necessario effettuare sia sul sangue periferico che midollare studi morfologici,immunologici,citogenetici,biochimici e biologico-molecolari per una precisa caratterizzazione della forma leucemica Inquadramento della malattia Diagnosi sicura Ematologica e midollare Valutazione della estensione Clinicostrumentale Precisa definizione delle caratteristiche biologiche

Conferma Diagnostica Momento fondamentale dell iter diagnostico Agoaspirato midollare * Esame morfologico * Citochimica * Tipizzazione immunofenotipica * Citogenetica e studi di biologia molecolare Classificazione citomorfologica della leucemia linfoblastica acuta (sec FAB) L1 (85%) L2 (14%) L3 (1%) Dimensioni cellulari Cromatina nucleare Morfologia nucleare Nucleoli + ++ +++ omogenea variabile finemente stipata ed omogenea regolare - irregolare + regolare ++ Volume citoplasma Basofilia citoplasma - + - + ++ + - ++ Vacuoli citoplasma + - + - ++

Classificazione citomorfologica sec. FAB Reazioni citochimiche dei blasti leucemici Perossidasi PAS Linfoblasto Mieloblasto Monoblasto - - + Naftol-AS-Cl-Acesterasi α- Naftil-Acetato esterasi - + +/- + - - +/- Fosfatasi acida +* + *nelle LAL T + + -

Criteri immunologici per la classificazione della leucemia acuta linfoblastica Linea B CD1 CD2 cycd3 CD3 CD7 CD10 CD19 CD20 cyigm sigm Pre-pre B - - - - - - + - - - Common - - - - - + + +/- - - Pre-B - - - - - + + +/- + - B matura - - - - - +/- + + +/- + Linea T Pre T - +/- + - + - - - - - T intermedia + + + + + - - - - - T matura - + -/+ + + - - - - - Criteri immunologici per la classificazione delle leucemie acute LAM LHM* LHL** Linea B Pos LAM Mieloperossidasi Pre-pre B e Pos Neg CD13, CD33,VIM 2 CD10 + e/ocd19+ CD19 cigm CD15,CD41,CD42 e LLA CD24 CD10 TdT+ e/o CD7+ e/o Neg CD4+ e/o CD2+ pre-pre B + Common Pos CD3 citoplasmatico 1 markers mieloide CD19 CD10,CD19 o LLA Common o CD10 LHM* =Leucemia acuta T-LLA + ibrida mieloide Pre-B 2 3 markers mieloidi +/-CD10, +cig M LHL** =Leucemia acuta ibrida linfoide LAB =Leucemia acuta biclonale 2 popolazioni di blasti differenti LLA e LAM B matura Pos SmIg Neg cigm LLA Linea T Pre T T intermedia T matura Pos cy CD3 CD7 TdT Neg CD19 HLA-Dr

Anomalie citogenetiche nelle LLA Nel 90% delle leucemie linfoblastiche acute sono presenti alterazioni cromosomiche Alterazioni cromosomiche numeriche Iperdiploidia DNA index 1,16 Ipodiploidia DNA index < 1,16 Near-aploidia Alterazioni cromosomiche strutturali (traslocazioni 40%) t(9;22) (q 34;q11) t(8;14) (q24;q32) t(1;19)(q23;p13) t(4;11)(q21;q23) LLA pre B o c. o T (4-5%) LLA- B (2%) LLA pre-b (4-7%) LLA pre-pre B (2%) Biologia Molecolare e Citogenetica nelle LLA Oncogeni coinvolti Bcr / abl Myc E2a / pbx Bcr / abl Mll /AF4 Bcr / abl Alterazione cromosomica t(9;22) (q 34;q11) del 6(q21;p25); del 12(p) t(8;14) (q24;q32) t(2;8) (p12;q24) t(8;22) (q24;q11) t(1;19)(q23;p13) t(9;22) (q 34;q11) del 9(p-) t(4;11)(q21;q23) t(9;22) (q 34;q11) Neoplasia LLA-Common LLA- B LLA-pre B LLA pre-pre B LLA-ibride Alt.regol.LMO 2 t(11;14)(p13;q11) del 6(p21;p25); inv 14(q21:q32) LLA- T

Fattori prognostici Parametri clinici e/o biologici presenti nel paziente alla diagnosi e correlati con l outcome Utilizzati per stratificare i pazienti in fasce di rischio al fine di modulare l aggressività del trattamento. Anni 70 Guarigione ad ogni costo Anni 80 Qualità della guarigione Principali fattori prognostici nella LLA favorevoli Fattori demografici: sfavorevoli Razza Bianca Nera Età 2-7 anni < 2, > 10 anni Sesso Femminile Maschile Clinico-ematologici: GB all esordio <10.000/mmc >50.000/mmc Hb <7 g/dl >10 g/dl Conta piastrinica >100.000/mmc <100.000/mmc Adenomegalia assente presente Epatosplenomegalia assente presente Massa mediastinica assente presente Sindrome leucemia/linfoma assente presente

Principali fattori prognostici nella LLA favorevoli Morfol,citoch,citogenetici: sfavorevoli Citomorfologia L1 L2 o L3 PAS positivo negativo Citogenetica iperdiploidia t (4;11),(8;14),(9;22) DNA index elevato basso Immunologici: Markers di superficie LLA CD10 + LLA T o B cells Fattori dinamici: Risposta alla prefase cortisonica Blasti periferici al g 8 <1000/mmc Blasti periferici al g 8 >1000/mmc Risposta precoce all induzione RC al g 14 Blasti nel midollo al g 14 >25% MRM alla fine della induzione negativa positiva Prognosi della LLA del bambino 70% di guarigioni Progressi della terapia specifica Miglioramento della terapia di supporto Più accurata stratificazione dei pazienti Accresciuta esperienza e preparazione del personale sanitario.

Moderna strategia terapeutica della LAL del bambino Fasi terapeutiche fondamentali Chemioterapia di induzione Obiettivo indurre la Remissione Completa Normalizzazione dell ematopoiesi Scomparsa di tutte le localizzazioni della malattia Chemioterapia post-remissionale (Consolidamento e Reinduzione) Obiettivi -evitare la selezione di cloni cellulari resistenti -continuare la citoriduzione Chemioterapia di mantenimento 10 12 c.l./mmc 10 10 c.l./mmc 10 10 c.l./mmc Obiettivo -eradicare la malattia residua 10 0 c.l./mmc Trattamento profilattico delle localizzazioni neuromeningee Durata del trattamento 2 anni Stratificazione dei pazienti in fasce di rischio Gruppo di rischio standard basso ( SR) Pazienti con buona risposta alla prefase cortisonica (PGR) Blasti periferici all 8 g < 1000/mmc; Remissione citomorfologica completa dopo la prima fase di induzione Blasti midollari al 33 g < 5/mmc; Assenza di traslocazioni t(9;22) o t(4;11); MRM negativa sia dopo la prima fase (33 g) che la seconda fase (78 g) di induzione Gruppo di rischio intermedio (MR) Pazienti che presentano tutte le condizioni precedenti ad eccezione della MRM che deve essere positiva ma < 10-3, per tutti i markers testati,al 33 g e negativa al 78 g della t. di induzione Gruppo di rischio alto (HR) Pazienti con cattiva risposta alla prefase cortisonica (PPR) Blasti periferici all 8 g >1000/mmc oppure Mancata remissione completa dopo la prima fase di induzione Blasti midollari al 33 g > 5/mmc oppure Presenza di traslocazioni t(9;22) o t(4;11) oppure MRM positiva 10-3 dopo la seconda fase (78 g) della t. di induzione

Evoluzione del trattamento I^ Fase (Ia) di Induzione a 4 farmaci in tutti i gruppi di rischio Introduzione della Fase Ib di Induzione Intensificazione del consolidamento Introduzione della reinduzione Modifica delle modalità di profilassi SNC in rapporto al rischio

PROTOCOLLO AIEOP/BFM 2000 Terapia di induzione Fase 1 a Prefase cortisonica con PDN per 7 giorni Terapia citostatica con VCR,DNB,L-Asparaginasi PDN o DXM per 29 giorni Fase 1 b Terapia citostatica con CMP,C-ARA,6-MP per 30 giorni Criteri di definizione di remissione completa Assenza di tutti i sintomi attribuibili alla leucemia Normale quadro ematologico periferico (Hb >10 g%, P > 75.000/mmc, PN > 500/mmc) Sufficiente cellularità midollare (assenza di blasti o blasti<5%, buona rappresentazione delle tre serie parenchimali)

Terapia di consolidamento Scopi Minimizzare lo sviluppo di cellule resistenti Agire sulla malattia residua minima Modalità Consolidamento Reinduzione MTX-HD,ARA-C, 6-MP etc VCR,DXM,Antracicline, L-ASPA,CMP,ARA-C,6-TG Le modalità variano in rapporto alla fascia di rischio Profilassi delle complicanze SNC Necessaria Localizzazioni neurologiche in RC emato-midollare >60% Tali localizzazioni precedono di poco una blastizzazione midollare Recidive frequenti Efficace Riduzione delle complicanze dal 60 al 5-10%

Profilassi delle complicanze SNC Rachicentesi medicate con citostatici Chemioterapia sistemica ad alte dosi Radioterapia craniale solo in pazienti selezionati (pazienti stratificati nella fascia ad alto rischio e nelle LAL T-cells con GB >100.000/mmc) Terapia di mantenimento o citoriduttrice complementare Obiettivi Bloccare la crescita leucemica Continuare la citoriduzione, fino allo azzeramento delle cellule leucemiche Modalità 6-MP + MTX fino al completamento di due anni di trattamento (per tutte le fasce di rischio)