Paolo Chiarugi. U.O. Analisi Chimico-Cliniche. AOUP Pisa
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- Rosina Lentini
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1 VEQ Proteine Specifiche Ciclo 2018 Paolo Chiarugi U.O. Analisi Chimico-Cliniche AOUP Pisa
2 Proteine Specifiche o Aspecifiche? PROTEINA Val.Rif. (g/l) Sintesi Alfa 1 - Antitripsina 0,9-2,0 Fegato Alfa 1 Glicoproteina Acida 0,5-1,2 Fegato Alfa 2 - Macroglobulina 1,3 3,0 Fegato Aptoglobina 0,3 2,0 Fegato Beta 2 - Microglobulina 0,0008 0,0025 Ubiquitaria C3 0,9 1,8 Fegato C4 0,1 0,4 Fegato Ceruloplasmina 0,2 0,6 Fegato Cistatina C 0,0006 0,0014 Ubiquitaria Fattore Reumatoide <10 UI/mL S.I. IgA 0,7 4,0 S.I. IgE <0,00043 S.I. IgG 7 16 S.I. IgM 0,4 2,3 S.I. Kappa-Catena Leggera 2-4 S.I. Lambda-Catena Leggera 1 2,4 S.I. Proteina C Reattiva < 0,005 Fegato Prealbumina 0,2 0,4 Fegato Proteina Legante il Retinolo 0,03 0,06 Fegato Recettore Solubile Transferrina 0,0008 0,0018 Ubiquitaria Transferrina 2,0 3,6 Fegato
3 VEQ Proteine Specifiche
4 Frequenza di dosaggio PCR 97,4 Transferrina 82,3 Fattore Reumatoide 76,5 IgG 72,9 IgA 72,6 IgM 72,3 C4 57,7 C3 57,7 Alfa 1 Glicoproteina Acida 51 Beta 2 - Microglobulina 48,1 Aptoglobina 35,2 Prealbumina 27,1 Alfa 1 - Antitripsina IgE Ceruloplasmina Lambda - Catena Leggera Kappa - Catena Leggera Cistatina C Recettore Solubile Transferrina Alfa 2 - Macroglobulina Proteina Legante Retinolo Lambda - Catena Leggera (IMAGE) Kappa - Catena Leggera (IMAGE) 8,7 7,4 5,2 2,3 2,3 2,3 27,1 24,8 22,9 19,4 19,4 310 CENTRI PARTECIPANTI, 18 REGIONI: Lombardia: 47% Toscana: 20% Abruzzo: 7,5% Piemonte: 6% Marche: 5%
5 Metodi usati test, campioni 7 su 8 METODO % VARIANTI STRUMENTO e/o REAGENTE + USATO AGGLUTINAZIONE 0,3 8 SGM ITALIA CARD 0,1 4 I-CHROMA BODITECH CHEMILUM. 1,0 17 IMMULITE 2000 SIEMENS COLORIMETRICO 0,03 1 CHEMACOMP 100 G.D. DRY CHEMISTRY 0,2 1 VITROS ORTHO ELETTROCHEMIL. 0,4 2 ELECSYS ROCHE ELFA 0,9 1 VIDAS BIOMERIEUX FEIA 0,06 3 AUTOCAP PHARMACIA IMMUNODIFF. 1,4 6 LIOFILCHEM IMMUNOENZ. 0,08 7 CHORUS DIESSE IMMUNOFLUOR. 0,3 4 AIA TOSOH IMMUNOPREC. 0,03 1 NYCOCARD SENTINEL IMMUNOTURB. 66,3 167 COBAS ROCHE MEIA 0,005 1 AXSYM ABBOTT NEFELOMETRICO 28,4 34 B.N. SIEMENS
6 % Metodi usati per analisi TURBIDIM. NEFELOM. RID ALTRO Alfa 1 - Antitripsina Alfa 1 Glicoproteina Acida Alfa 2 - Macroglobulina Aptoglobina Beta 2 - Microglobulina C C Ceruloplasmina Cistatina C Fattore Reumatoide IgA IgE IgG IgM Kappa - Catena Leggera Kappa - Catena Leggera (IMAGE) Lambda - Catena Leggera Lambda - Catena Leggera (IMAGE) PCR Prealbumina Proteina Legante Retinolo Recettore Solubile Transferrina Transferrina
7 CRM 470: la nuova era delle proteine specifiche
8 Cause d inaccuratezza Trasferimento dei valori da CRM a calibratori e controlli Eterogeneità delle proteine Effetto matrice
9 ERM-DA470k/IFCC
10 Principali metodi usati IMMUNODIFFUSIONE RADIALE % VARIANTI STRUMENTO e/o REAGENTI + USATI 1,4 6 SIEMENS LIOFILCHEM MEDIC HUMATECH BIODEVICE NEFELOMETRIA 28,4 34 VISTA BN II IMAGE ARRAY 360 TURBIDIMETRIA 66,3 167 COBAS/MODULAR ARCHITECT ADVIA AU, LX, CX, DX ILAB KONELAB SIEMENS SIEMENS BECKMAN BECKMAN ROCHE ABBOTT SIEMENS BECKMAN IL/BIOKIT SCLAVO
11 Immunodiffusione Radiale
12 Nefelometria
13 Turbidimetria
14 Curva di Heidelberger-Kendall
15 CV (media) Alfa 1 - Antitripsina Alfa 1 Glicoproteina Acida Alfa 2 - Macroglobulina Aptoglobina Beta 2 - Microglobulina C3 C4 Ceruloplasmina Cistatina C Fattore Reumatoide
16 CV (media) IgA IgE IgG IgM Kappa - Cat.Leg. Rif. alle IgG Kappa - Catena Leggera Lambda - Cat.Leg. Rif. alle IgG Lambda - Catena Leggera PCR Prealbumina Proteina Legante il retinolo Recettore Solubile Transferrina Transferrina
17 CV 2018 Analita Media Min Max Alfa 1 - Antitripsina 5,3 2,8 8,5 Alfa 1 Glicoproteina Acida 6,6 3,3 12,6 Alfa 2 - Macroglobulina 5,8 3,4 8,2 Aptoglobina 4,9 2,3 10,6 Beta 2 - Microglobulina 8,5 3,2 20,3 C3 4,6 2,1 8,0 C4 5,3 2,6 10,5 Ceruloplasmina 8,6 2,9 27,3 Cistatina C 17,3 8,7 21,6 Fattore Reumatoide 9,6 2,6 27,8 IgA 4,3 1,9 8,4 IgE 8,8 2,4 26,4 IgG 4,2 1,4 10,3 IgM 4,9 2,3 11,2 Kappa - Catena Leggera 7,4 4,3 16,3 Lambda - Catena Leggera 7,5 4,1 14,5 PCR 5,2 1,8 8,9 Prealbumina 6,6 2,6 13,6 Recettore Solubile Transferrina 5,8 2,2 8,3 Transferrina 4,0 1,6 16,3
18 CV 2018 Metodo Media Min Max CHEMILUM. 12,9 7,2 20,3 ELETTROCHEMIL ROCHE 5,9 4,2 9,4 ELFA 12,9 5,6 26,4 IMMUNODIFF. 8,9 7,5 10,3 IMMUNOT.ROCHE COBAS /MODULAR 4,0 2,3 10,5 IMMUNOTURB ABBOTT ARCHITECT 4,4 3,3 6,2 IMMUNOTURB ADVIA SIEMENS 3,4 1,4 5,3 IMMUNOTURB BECKMAN RF LATEX 3,9 2,6 6,4 IMMUNOTURB SIEMENS 8,5 1,8 27,8 IMMUNOTURB. 7,5 2,7 24,7 IMMUNOTURB. ABBOTT ARCHITECT 3,6 1,6 7,0 IMMUNOTURB. ADVIA SIEMENS 3,2 1,6 4,7 IMMUNOTURB. BECKMAN AU 3,6 2,1 6,3 IMMUNOTURB. BECKMAN LX/CX/DX 3,6 2,1 6,6 IMMUNOTURB. I.L./BIOKIT 7,1 2,6 20,2 IMMUNOTURB.ABBOTT ARCHITECT 10,6 8,9 11,8 IMMUNOTURB.BECKMAN AU 3,0 2,4 3,5 IMMUNOTURB.ROCHE COBAS /MODULAR/INTEGRA 2,9 2,4 3,5 NEFEL. BECKMAN IMAGE 4,4 2,4 5,3 NEFELOM.BECKMAN IMAGE 4,5 3,7 5,2 NEFELOM. BECKMAN 5,9 3,7 10,5 NEFELOM. BECKMAN IMAGE 4,6 2,4 6,8 NEFELOM. SIEMENS 5,6 2,2 8,8 NEFELOM. SIEMENS BN 8,2 2,9 21,6 NEFELOMET.- BECKMAN 5,8 4,2 7,2 NEFELOMETRICO 6,3 2,4 27,3 NEFELOMETRICO BECKMAN 8,5 2,9 20,8 NEFELOMETRICO/BECKMAN 9,4 5,5 17,0
19 CV 2018 Analita Metodo MaxDiCV Fattore Reumatoide IMMUNOTURB SIEMENS 27,8 Ceruloplasmina NEFELOMETRICO 27,3 IgE ELFA 26,4 Fattore Reumatoide IMMUNOTURB. 24,7 Cistatina C NEFELOM. SIEMENS BN 21,6 Ceruloplasmina NEFELOMETRICO BECKMAN 20,8 Beta 2 - Microglobulina CHEMILUM. 20,3 Fattore Reumatoide IMMUNOTURB. I.L./BIOKIT 20,2 Fattore Reumatoide NEFELOM. SIEMENS BN 18,9 Alfa 1 - Antitripsina (Nefelom. Siemens) NEFELOMETRICO 18,9 IgE IMMUNOTURB. 17,3 Beta 2 - Microglobulina NEFELOMETRICO 17,3 Fattore Reumatoide NEFELOMETRICO/BECKMAN 17,0 Kappa - Catena Leggera IMMUNOTURB. 16,3 Transferrina NEFELOM. SIEMENS BN 16,3 Beta 2 - Microglobulina ELFA 16,1 Kappa - Catena Leggera NEFELOMETRICO 15,3 Ceruloplasmina IMMUNOTURB. 15,0 Lambda - Catena Leggera NEFELOMETRICO 14,5 Prealbumina NEFELOM. SIEMENS BN 13,6
20 IgG g/l 4 18 NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 1 NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 3 NEFELOM. TURBIDIM. RID Campione: 4 Media ±DS
21 CV% IgG CV B Nefelom. Turbidim. RID
22 PCR (Turbidim.) mg/l ROCHE SIEMENS IL Campione: 1 ROCHE SIEMENS IL Campione: ROCHE SIEMENS IL Campione: 3 ROCHE SIEMENS IL Campione: 4 Media ±DS
23 CV% PCR 0,5. CV B Roche Siemens IL
24 PCR ultrasensibile
25 Fattore Reumatoide
26 Fattore Reumatoide UI/mL 70 NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN. Campione: 1 NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN. Campione: NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN. Campione: 3 NEFELOM. TURBIDIM. AGGLUTIN. Campione: 4 Media ±DS
27 CV% Fattore Reumatoide Nefelom. Turbidim CV B
28 Fattore Reumatoide (Turbidim.) UI/mL 80 ROCHE SIEMENS BECKMAN Campione: 1 ROCHE SIEMENS BECKMAN Campione: ROCHE SIEMENS BECKMAN Campione: 3 ROCHE SIEMENS BECKMAN Campione: 4 Media ±DS
29 CV% Fattore Reumatoide (Turbidim.) Roche Siemens Beckman CV B
30 Fattore Reumatoide Standardizzazione non ERM-DA470 Non dosabile come IgM in unità di massa Persistenza di metodi qualitativi - semiquantitativi
31 CV% Recenti esordienti Recettore Solubile Transferrina Cistatina C CV B NEFELOMETRICO SIEMENS
32 Leggere le catene leggere CATENE LEGGERE LEGATE K(2-4)g/L (1-2,4)g/L LIBERE K(3-19)mg/L (6-26)mg/L POLICLONALI MONOCLONALI POLICLONALI MONOCLONALI ANTISIERI ANTI-CL TOTALI ANTISIERI ANTI-CL LIBERE
33 Leggere le catene leggere LEGATE POLICLONALI Dosaggio CL totali k o λ come se fossero tutte libere CATENE LEGGERE MONOCLONALI POLICLONALI ANTISIERI ANTI-CL TOTALI LIBERE MONOCLONALI Dosaggio immunoglobuline che montano CL k o λ Fattore di conversione = 150 (PM IgG ) / 46 (2xPM CL ) 3
34 Leggere le catene leggere
35 CV% Kappa catena leggera CV B K(nefelom.) K(turbidim.) K(rif.IgG)
36 CV% Lambda catena leggera L(nefelom.) L(turbidim.) L(rif.IgG) 6 4 CV B
37 CL totali Dosaggio CL totali. Utilità clinica: Rapporto k/ come indizio di monoclonalità Parametro di follow-up per CM già tipizzate
38 CL libere
39 CL libere
40 CL libere
41 CL libere: discrepanza tra letteratura e pratica Nonostante il crescente numero di pubblicazioni in materia e l adattabilità del metodo sui principali strumenti, la maggior parte dei laboratori ignora il dosaggio delle CLL nel siero continuando ad utilizzare il dosaggio di CL totali, equivoco e destinato ad obsolescenza.
42 e-prescription
43 CL libere: VEQ Variabilità fra strumenti Problema dell eccesso di antigene
44 Coming soon (?): Hevylite
45 Proteine specifiche: conclusioni Variabilità inter- e intra-metodo: Limiti di standardizzazione Metodi manuali Vecchie e nuove proteine: Nuove esigenze cliniche Svecchiamento del repertorio
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