Esame del liquido seminale: Criptozoospermia e Azoospermia Procedure di valutazione

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Ignazio Clemente Carella
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1 Esame del liquido seminale: Criptozoospermia e Azoospermia Procedure di valutazione Enza A Costantino Centro Interdipartimentale di Ricerca per la Tutela della Salute Sessuale Università di Bologna c/o Policlinico S. Orsola-Malpighi Bologna, 29 Gennaio 2011

2 DEFINIZIONI: La Criptozoospermia è la presenza di spermatozoi nel sedimento di un campione centrifugato La Azoospermia è l assenza di spermatozoi nel sedimento di un campione centrifugato (Eliasson,1981)

3 L assenza di spermatozoi dall eiaculato è un importante criterio di: diagnosi dell infertilità maschile prova del successo della vasectomia determinazione dell efficacia di un contraccettivo ormonale Cooper TG et al., J Androl. 2006

4 E importante tenere presente che: la presenza o meno di spermatozoi nel pellet dipende dalla velocità e dal tempo di centrifugazione e dal volume del pellet analizzato la centrifugazione a 3000g per 15 min può non essere in grado di sedimentare tutti gli spermatozoi (Corea, 2005) dopo la centrifugazione possono essere perse motilità e concentrazione (Cooper, 2006) Dipende se sono sufficienti i dati sulla presenza e motilità degli spermatozoi o se è richiesto un accurato numero

5 Quando NON è richiesta una accurata valutazione di un basso numero di spermatozoi Quando il numero di spermatozoi a 400x è <4 è sufficiente indicare che vi sono <2 x 10 6 /ml, con una nota che indichi se ci sono spermatozoi mobili o meno

6 Quando non vi sono spermatozoi nel preparato a fresco, il campione può essere centrifugato miscelare bene il campione prelevare una aliquota e centrifugare a 3000g per 15 min risospendere gli spermatozoi in 50 ul di plasma seminale porre una aliquota di pellet di 10 ul in un vetrino coprire con un coprioggetto 22 x 22 mm valutare attentamente l intero vetrino

7 La presenza di spermatozoi è indicazione di Criptozoospermia L assenza di spermatozoi suggerisce l Azoospermia L assenza di spermatozoi mobili nell aliquota esaminata non indica necessariamente che gli spermatozoi siano assenti in tutto il campione Dato che con la centrifugazione non tutti gli spermatozoi sedimentano non possiamo utilizzare questo metodo per determinare il numero di spermatozoi

8 Identificazione di spermatozoi mobili miscelare bene il campione prelevare una aliquota di 40 ul coprire con un coprioggetto 24 x 50 mm valutare attentamente l intero vetrino

9 Cosa succede se abbiamo la necessità di quantificare esattamente il numero di spermatozoi? Le alternative alla centrifugazione sono: l utilizzo di una bassa diluizione del liquido seminale l analisi di grandi volumi di liquido

10 Valutazione nell intera camera di Neubauer modificata Valutazione in vetrini monouso per grandi volumi (microscopia a fluorescenza) SENSIBILITA DEL METODO

11 Cooper TG et al., J Androl. 2006

12 Valutazione nell intera camera di Neubauer modificata Se si contano meno di 25 spermatozoi la concentrazione sarà < per ml Valutazione nei vetrini monouso (microscopia a fluorescenza) Se si contano meno di 25 spermatozoi la concentrazione sarà < per ml

13 COMMENTI DA RIPORTARE NELLA SCHEDA DEL PAZIENTE Contati troppo pochi spermatozoi per una accurata determinazione della concentrazione Calcolare e riportare sempre il numero totale di spermatozoi per eiaculato

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