Corso di Elementi di Bioinformatica
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- Leone Isidoro Bettini
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1 Corso di Elementi di Bioinformatica Laurea Triennale in Informatica I dati e le banche dati in Bioinformatica Anno Accademico Docente del laboratorio: Raffaella Rizzi 1
2 Il DNA (oggetto biologico) Il DNA è una catena polinucleotidica che contiene le informazioni per la sintesi di RNA e di proteine. Il mattoncino che compone una catena di DNA prende il nome di nucleotide. D b P D: deossiribosio (zucchero pentoso) P: gruppo fosfato b: base azotata
3 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D b P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi:
4 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D A P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A)
5 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D G P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G)
6 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D C P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C)
7 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D T P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) - timina (T)
8 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D T P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) purine - guanina (G) - citosina (C) - timina (T)
9 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D T P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) pirimidine - timina (T)
10 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) D T P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) - timina (T)
11 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) 3 D T 5 P D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) - timina (T)
12 Il DNA (oggetto biologico) Il nucleotide ( mattoncino del DNA) 3 5 D direzione 5 3 P T D: zucchero pentoso (deossiribosio) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) - timina (T)
13 Il DNA (oggetto biologico) 3 D T P P D D A C La sequenza delle basi azotate elencate dal 5 al 3 fornisce la sequenza primaria di una catena di DNA Nell esempio della figura si legge quindi CAT (e non TAC) 5 P
14 Il DNA (oggetto biologico) 3 D T In termini informatici è nucleotide uguale a base azotata P P D D A C La sequenza delle basi azotate elencate dal 5 al 3 fornisce la sequenza primaria di una catena di DNA Nell esempio della figura si legge quindi CAT (e non TAC) 5 P
15 Il DNA (oggetto biologico) P 5 3 D T A D P P D A T D P P D C G D 3 5 P
16 Il DNA (oggetto biologico) P 5 3 D T A D P D A T D P A è complementare a T C è complementare a G P P D C G D 3 5 P
17 Il DNA (oggetto biologico) 3 D T A D P 5 strand (reverse) P P D A T D P P strand + (forward) 5 P D C G D 3
18 Il DNA (oggetto biologico) 3 D T A D P 5 strand (reverse) P P D A T D P P Catena forward è CAT D strand + (forward) 5 P C G D 3
19 Il DNA (oggetto biologico) 3 P D T A D P P 5 strand (reverse) Catena reverse è ATG D A T D P P strand + (forward) 5 P D C G D 3
20 Il DNA (dato informatico) La sequenza primaria di un catena di DNA è dunque rappresentata tramite una stringa di simboli appartenenti all alfabeto Σ={A,C,G,T}
21 Il DNA (dato informatico) La sequenza primaria di un catena di DNA è dunque rappresentata tramite una stringa di simboli appartenenti all alfabeto Σ={A,C,G,T} Data una delle due sequenze della doppia elica del DNA ottengo la sequenza appaiata eseguendo un operazione di reverse&complement, cioé: si trasformano le basi secondo la regola (complemento): A->T, T->A, C->G, G->C si inverte la sequenza (cioé la si legge al contrario)
22 Il DNA (dato informatico) Esempio di Reverse&Complement: ACGTAGGATGGACGATGACGATGACGAT
23 Il DNA (dato informatico) Esempio di Reverse&Complement: ACGTAGGATGGACGATGACGATGACGAT complement TGCATCCTACCTGCTACTGCTACTGCTA
24 Il DNA (dato informatico) Esempio di Reverse&Complement: ACGTAGGATGGACGATGACGATGACGAT complement TGCATCCTACCTGCTACTGCTACTGCTA reverse ATCGTCATCGTCATCGTCCATCCTACGT
25 L RNA (oggetto biologico) Il nucleotide (il mattoncino dell RNA) R b P D: ribosio (zucchero pentoso) P: gruppo fosfato b: base azotata di quattro tipi: - adenina (A) - guanina (G) - citosina (C) - uracile (U) uracile al posto della timina (T)
26 L RNA (dato informatico) La sequenza primaria di un catena di RNA è rappresentata tramite una stringa simboli appartenenti all alfabeto Σ={A,C,G,U} L RNA si trova in catene singole
27 La proteina Una proteina è una sequenza di amminoacidi, e dal punto di vista informatico, la sua sequenza primaria è rappresentata come una stringa definita su un alfabeto di 20 simboli.
28 Il sequenziamento Il dato informatico viene prodotto tramite sequenziamento, che significa: è determinare la struttura primaria delle molecole biologiche (DNA/RNA e proteine) è sequenza delle basi {A,C,G,T U} per DNA e RNA è sequenza degli amminoacidi per le proteine Glu Ile Phe Thr Val His
29 Il sequenziamento Cosa si ottiene dal sequenziamento di una molecola biologica? è single-end read DNA/RNA GTTGTGCAGTGACGGA
30 Il sequenziamento Cosa si ottiene dal sequenziamento di una molecola di DNA/RNA è paired-end read (o mate-pair) insertion size DNA/RNA A B
31 Il sequenziamento Cosa si ottiene dal sequenziamento di una molecola di DNA/RNA è paired-end read (o mate-pair) insertion size DNA/RNA A B A = B
32 Il sequenziamento Cosa si ottiene dal sequenziamento di una molecola di DNA/RNA è paired-end read (o mate-pair) insertion size DNA/RNA A B A = B
33 Il sequenziamento Cosa si ottiene dal sequenziamento di una molecola di DNA/RNA è paired-end read (o mate-pair) insertion size DNA/RNA agttgcgt A aatgcctg B agttgcgt gtccgtaa A = B
34 Sanger VS Next-Generation Sequencing Metodo Sanger Metodi Next-Generation Sequencing ð Piuttosto costoso (centinaia di milioni di dollari per Human Genome Project) ð Processa pochissimi reads in un run (copertura relativamente bassa) ð Lunghezza dei reads fino a 1000 bp ð Qualità elevata ð Poco costoso (attorno al milione di dollari per sequenziare il genoma umano) ð Processa tanti reads in un run (milioni) (copertura da 10 a 100 volte superiore quella Sanger) ð Reads relativamente corti ð Qualità relativamente bassa
35 Il sequenziamento Attenzione agli errori di sequenziamento!!! Inoltre, le stringhe che rappresentano DNA e RNA sono in realtà definite su di un alfabeto esteso che prende il nome di IUPAC code
36 IUPAC code per DNA SIMBOLO DESCRIZIONE A Adenine C Cytosine G Guanine T Thymine R Purine (A or G) Y Pyrimidine (C or T) M C or A K T, or G W T, or A S C or G B C, T or G (not A) D A, T or G (not C) H A, T or C (not G) V A, C or G (not T) N any base (A, C, G, T)
37 IUPAC code per RNA SIMBOLO DESCRIZIONE A Adenine C Cytosine G Guanine U Uracil R Purine (A or G) Y Pyrimidine (C or U) M C or A K U or G W U or A S C or G B C, U or G (not A) D A, U or G (not C) H A, U or C (not G) V A, C or G (not U) N any base (A, C, G or U)
38 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine.
39 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. La sequenza genomica di un gene è la sequenza nucleotidica del locus di DNA del gene.
40 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. La sequenza genomica di un gene è la sequenza nucleotidica del locus di DNA del gene. La sequenza genomica di un gene è una sottostringa di DNA genomico
41 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. La sequenza genomica di un gene è la sequenza nucleotidica del locus di DNA del gene; in genere viene messa a disposizione in formato FASTA che: è un formato di puro testo nato all interno del software di allineamento FASTA è pensato per memorizzare una sequenza e qualche informazione aggiuntiva è un formato standard di input di molti tools di analisi di sequenze ha estensione *.fa oppure *.fasta
42 Formato FASTA (esempio) >X dna:chromosome chromosome:grch38:x: : :1 GGGGGCAACGGTCACCTGATCTGCGGCTGTCGAGGCCGCTGAGGCAGTGGAGGCTGAGGC TATGATGGCGGCCATGGCGACGGCTCGAGTGCGGATGGGGCCGCGGTGCGCCCAGGCGCT CTGGCGCATGCCGTGGCTGCCGGTGTTTTTGTCGTTGGCGGCGGCGGCGGCGGCGGCAGC GGCGGAGCAGCAGGTCCCGCTGGTGCTGTGGTCGAGTGACCGGTGAGCGGGCCGGGGTGG GATGCGCTGTGGCGGCTGAGGCGCCCTCGCCCGACTCCGGCGCTGTCCTAGGCGAGGGGT GGTGAGGCCCGGAGGTGGACTGTTCCTTGCTCGGGGGCTCGCAGCGAATCTGCCGGCGAC AGAGCTCCAGTCCACATGCGCCCCCGTCTGACAGCACCTCTTCTGTGCCCTGCCAGGGAC TTGTGGGCTCCTGCGGCCGACACTCATGAAGGCCACATCACCAGCGACTTGCAGCTCTCT ACCTACTTAGATCCCGCCCTGGAGCTGGGTCCCAGGAATGTGCTGCTGTTCCTGCAGGAC AAGGTGCGCCCGCCCCAGCCCACTCTCCCCCGGTCATCGGGAGGCAGCCAGGCCCCCTCC CCCCATGACACTGACGCCCATTCCCCAAGGGAAGCTTCAGTGACCTTGTCCCAACTGTAG GGAGGTGTGGGTCGTCTCATGGGAAGGCCTGTAGTAAACGCTTCAGTGGGCATGGCGACA GCCTCGGAAATGGCACCAACTTGATTGGAGGAAGCGACGGACCAGAGGCCAGGTACCTAC TGAGTACCAAGCACTTTGGATATCTGACTTAGTCCAATATGGTGGGTGGGGATTATCGTC [ ]
43 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. Un gene viene identificato tramite il suo HUGO NAME ( Esempio di HUGO NAME: ATP6AP1 (ATPase, H+ transporting, lysosomal accessory protein 1)
44 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. Entrambe le catene di DNA genomico contengono geni. 5 strand + (forward) 3 3 strand - (reverse) 5
45 Cos è un gene? Un gene è una regione (locus) di DNA genomico che codifica proteine. Entrambe le catene di DNA genomico contengono geni. 5 strand + (forward) 3 3 strand - (reverse) 5 direzione di trascrizione
46 Espressione di un gene DNA
47 Espressione di un gene DNA La barra verde rappresenta la stringa di DNA del locus genomico del gene (sequenza genomica)
48 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon
49 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon splice site (confine esone-introne) 3 splice site (confine introne-esone) Esone = regione codificante Introne = regione non-codificante
50 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3
51 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 Il pre-mrna è una copia della sequenza di DNA del gene (a meno della sostituzione di T con U)
52 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 SPLICING mrna exon 1 exon 2 exon 3 (trascritto)
53 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 SPLICING mrna (trascritto)
54 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 SPLICING mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUG [stop] [stop] UAG UAA UGA
55 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 SPLICING mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUG [stop] [stop] start codon stop codon UAG UAA UGA
56 Espressione di un gene DNA 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon TRASCRIZIONE pre-mrna 5 exon 1 intron1 exon 2 intron2 exon 3 3 SPLICING mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUG [stop] [stop] 5 UTR 3 UTR UAG UAA UGA
57 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Codice genetico da Wikipedia
58 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Proteina: Met Codice genetico da Wikipedia
59 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Proteina: Met Pro Codice genetico da Wikipedia
60 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Proteina: Met Pro Ser Codice genetico da Wikipedia
61 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Proteina: Met Pro Ser Asp Codice genetico da Wikipedia
62 Espressione di un gene mrna (trascritto) CDS (coding sequence) AUGCCAAGCGAUUAG Met Pro Ser Asp [stop] Codice genetico da Wikipedia
63 Pattern di un introne 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 Introne canonico % GT AG Introni non canonici GC 0.69 % AG AT 0.05 % AC ALTRO 0.02 % Burset et al., Nucleic Acids Res. 2000, 28:
64 Alternative Splicing (AS) Gene1 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna ref
65 Alternative Splicing (AS) Gene1 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna ref mrna1 exon 1 exon 1 intron retention exon 2 exon 3
66 Alternative Splicing (AS) Gene1 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna ref mrna1 exon 1 exon 1 exon 2 exon 3 mrna2 exon 1 exon skipping exon 3
67 Alternative Splicing (AS) Gene1 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna ref mrna1 exon 1 exon 1 exon 2 exon 3 mrna2 exon 1 exon 3 mrna3 exon 1 5 competing exon 2 exon 3
68 Alternative Splicing (AS) Gene1 5 exon 1 exon 2 exon 3 3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna ref mrna1 exon 1 exon 1 exon 2 exon 3 mrna2 exon 1 exon 3 mrna3 exon 1 exon 2 exon 3 mrna4 exon 1 exon 2 exon 3 3 competing
69 Alternative Splicing (AS) Gene2 5 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 3 mrna ref exon 1 exon 2 exon 3 exon 4
70 Alternative Splicing (AS) Gene2 exon 1 5 exon 2 exon 3 exon 4 3 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna ref mrna1 exon 1 exon 3 exon 4 mrna2 exon 1 exon 2 exon 4
71 Alternative Splicing (AS) Gene2 exon 1 5 exon 2 exon 3 exon 4 3 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna ref mrna1 exon 1 exon 3 exon 4 mrna2 exon 1 exon 2 exon 4 mutually exclusive exons
72 Alternative Splicing (AS) Gene2 exon 1 exon 2 exon 3 exon mrna ref exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna1 exon 1 exon 3 exon 4 mrna2 exon 1 exon 2 exon 4 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna3 multiple poly(a) sites
73 Alternative Splicing (AS) Gene2 5 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 3 mrna ref exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna1 exon 1 exon 3 exon 4 mrna2 exon 1 exon 2 exon 4 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna3 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna4 multiple promoters
74 Alternative Splicing (AS) Gene2 5 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 3 mrna ref exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna1 exon 1 exon 3 exon 4 Isoforma = uno dei trascritti (mrna) che il gene è in grado di trascrivere (oppure una delle proteine che il gene è in grado di esprimere) mrna2 exon 1 exon 2 exon 4 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna3 exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 mrna4 multiple promoters
75 Dati importanti Dati fondamentali in Bioinformatica sono i dati ottenuti dal sequenziamento di trascritto (frammenti di trascritto) che prendono il nome di: q EST (Expressed Sequence Tag) se ottenuti con metodo Sanger q RNA-seq se ottenuti tramite una delle tecnologie NGS
76 EST vs RNA-seq Metodo Sanger ð Piuttosto costoso (centinaia di milioni di dollari per Human Genome Project) ð Processa pochissimi reads in un run (copertura relativamente bassa) ð Lunghezza dei reads fino a 1000 bp ð Qualità elevata Metodi NGS ð Poco costoso (attorno al milione di dollari per sequenziare il genoma umano) ð Processa tanti reads in un run (milioni) (copertura da 10 a 100 volte superiore quella Sanger) ð Reads relativamente corti ð Qualità relativamente bassa
77 EST vs RNA-seq Metodo Sanger ð Piuttosto costoso (centinaia di milioni di dollari per Human Genome Project) Expressed Sequence Tag (EST) ð Processa pochissimi reads in un run (copertura relativamente bassa) ð Lunghezza dei reads fino a 1000 bp ð Qualità elevata Metodi NGS ð Poco costoso (attorno al milione di dollari per sequenziare il genoma umano) ð Processa tanti reads in un run (milioni) (copertura da 10 a 100 RNA-seq volte superiore quella Sanger) ð Reads relativamente corti ð Qualità relativamente bassa
78 Risorse WEB in Bioinformatica Quali risorse il WEB ci mette a disposizione? Banche dati genomiche Sistemi integrati Browser Genomici Tools
79 Risorse WEB in Bioinformatica Quali risorse il WEB ci mette a disposizione? Banche dati genomiche Sistemi integrati Browser Genomici Tools
80 Banche dati genomiche Scopo? archiviare e diffondere i dati ottenuti da esperimenti biologici Quali oggetti sono contenuti? Sequenze nucleotidiche (DNA, RNA) Geni Trascritti Expressed Sequence Tag (EST) Proteine SNPs (Single Nucleotide Polymorphism) strutture proteiche 3D e altro ancora
81 Banche dati genomiche come risorsa di dati, hanno la necessità di: correlare dati diversi ridurre la ridondanza dei dati ridurre la non uniformità stesso ID per lo stesso oggetto stesso livello di qualità In una parola: (necessità di) integrazione
82 Banche dati genomiche Non è detto che siano DB relazionali Oggetto contenuto = entry identificata univocamente da un ID entry = text file in un formato che sia: human-readable facile da trattare (parsing con Perl, Phyton, Ruby, etc.) flessibile Due tipi principali di banche: primarie oggetti di tipo eterogeneo archiviati con un minimo di informazione (ad esempio sequenze nucleotidiche) specializzate: oggetti omogenei per tassonomia, funzione, etc. (ad esempio frammenti di trascritto)
83 Banche dati genomiche Le storiche banche primarie di sequenze nucleotidiche sono: EMBL Data Bank sviluppata da EMBL-EBI (European Bioinformatics Institute, parte dell European Molecular Biology Laboratory, EMBL) formato entry file: EMBL
84 Banche dati genomiche Le storiche banche primarie di sequenze nucleotidiche sono: EMBL Data Bank sviluppata da EMBL-EBI (European Bioinformatics Institute, parte dell European Molecular Biology Laboratory, EMBL) GenBank formato entry file: EMBL sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA) formato entry file: GenBank
85 Banche dati genomiche Le storiche banche primarie di sequenze nucleotidiche sono: DDBJ DNA Data Bank of Japan sviluppata dal National Institute of Genetics in Mishima formato entry file: GenBank
86 Banche dati genomiche Le storiche banche primarie di sequenze nucleotidiche sono: DDBJ DNA Data Bank of Japan sviluppata dal National Institute of Genetics in Mishima formato entry file: GenBank L ID univoco che identifica le sequenze all interno di queste banche prende il nome di Accession Number
87 Banche dati genomiche Le storiche banche primarie di sequenze nucleotidiche sono: DDBJ DNA Data Bank of Japan sviluppata dal National Institute of Genetics in Mishima formato entry file: GenBank
88 Banche dati genomiche Esercizio q Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da EMBL ( scaricarla sia in formato EMBL che in formato FASTA
89 Banche dati genomiche Esercizio þ q Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da EMBL ( scaricarla sia in formato EMBL che in formato FASTA Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da GenBank (
90 Banche dati genomiche Esercizio q þ q Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da EMBL ( scaricarla sia in formato EMBL che in formato FASTA Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da GenBank ( Recuperare la sequenza con Accession Number M10051 da DDBJ (
91 Banche dati genomiche Una delle banche principali di sequenze proteiche è: UniProt fusione di SwissProt + TrEMBL + PIR sviluppata da un consorzio di: EMBL-EBI PIR (Protein Information Resource) SIB (Swiss Institute of Bioinformatics)
92 Banche dati genomiche Una delle banche principali di sequenze proteiche è: UniProt fusione di SwissProt + TrEMBL + PIR sviluppata da un consorzio di: EMBL-EBI PIR (Protein Information Resource) SIB (Swiss Institute of Bioinformatics) L ID univoco che identifica le sequenze all interno di queste banche prende il nome di Accession Number
93 Banche dati genomiche Esercizio q q Recuperare da UniProt la proteina con Accession Number P63104 ( Individuare lo HUGO NAME del gene che codifica tale proteina
94 Banche dati genomiche Esercizio q q Recuperare da UniProt la proteina con Accession Number P63104 ( Individuare lo HUGO NAME del gene che codifica tale proteina Il gene è YWHAZ
95 Banche dati genomiche Esercizio þ þ q q Recuperare da UniProt la proteina con Accession Number P63104 ( Individuare lo HUGO NAME del gene che codifica tale proteina Individuare le isoforme del gene e scaricare la loro sequenza di amminoacidi in formato FASTA Usare BLAST (Basic Local Alignment Search Tool) per cercare in UniProt le proteine simili
96 Banche dati genomiche Banche specializzate: UniGene banca di trascritti (EST e mrna) mette a disposizione i trascritti raggruppati per gene e per organismo (cluster) sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA) formato entry file: FASTA
97 Banche dati genomiche Banche specializzate: dbest banca di sequenze EST sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)
98 Banche dati genomiche Banche specializzate: dbest banca di sequenze EST sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA) RefSeq banca di sequenze annotate (genomi, cromosomi, mrna e proteine) sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)
99 Banche dati genomiche Esercizio q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( NB: I clusters UniGene hanno un identificatore univoco del tipo [org]. [dd], dove [org] è un codice a due lettere che specifica l organismo (ad esempio, Hs per uomo, Mm per topo, Rn per ratto, etc.), e [dd] è una stringa di cifre 0-9. Ad esempio Hs è l identificatore del cluster relativo al gene umano INSR
100 Banche dati genomiche Esercizio þ q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( Estrarre l identificatore gb (GenBank ID), la lunghezza e l orientamento della prima sequenza EST presente in tale cluster NB: Il GenBank ID di una sequenza in un cluster UniGene è ricavabile dall header FASTA nel campo /gb=xxxxx La lunghezza L di una sequenza in un cluster UniGene è ricavabile dall header FASTA nel campo /len=l L orientamento di una sequenza in un cluster UniGene è ricavabile dall header FASTA nel campo /clone_end=[5 3 ] (5 significa che la sequenza è orientata 3 5, e 3 significa che la sequenza è orientata 5 3.
101 Banche dati genomiche Esercizio þ þ q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( Estrarre l identificatore gb (GenBank ID), la lunghezza e l orientamento della prima sequenza EST presente in tale cluster Eseguire una nuova interrogazione di UniGene, inserendo il GenBank ID dell EST trovato al punto precedente
102 Banche dati genomiche Esercizio þ þ q q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( Estrarre l identificatore gb (GenBank ID), la lunghezza e l orientamento della prima sequenza EST presente in tale cluster Eseguire una nuova interrogazione di UniGene, inserendo il GenBank ID dell EST trovato al punto precedente Cercare lo stesso GenBank ID nella banca dati dbest (
103 Banche dati genomiche Esercizio þ þ q þ q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( Estrarre l identificatore gb (GenBank ID), la lunghezza e l orientamento della prima sequenza EST presente in tale cluster Eseguire una nuova interrogazione di UniGene, inserendo il GenBank ID dell EST trovato al punto precedente Cercare lo stesso GenBank ID nella banca dati dbest ( Cercare nel cluster UniGene appena scaricato, gli mrna che appartengono anche alla banca RefSeq ( NB: Il GenBank ID di sequenze che sono mrna provenienti dalla banca RefSeq, inizia con NM_
104 Banche dati genomiche Esercizio þ þ q þ þ q Cercare i clusters UniGene associati al gene con HUGO NAME ATP6AP1 e scaricare il cluster relativo all uomo ( Estrarre l identificatore gb (GenBank ID), la lunghezza e l orientamento della prima sequenza EST presente in tale cluster Eseguire una nuova interrogazione di UniGene, inserendo il GenBank ID dell EST trovato al punto precedente Cercare lo stesso GenBank ID nella banca dati dbest ( Cercare nel cluster UniGene appena scaricato, gli mrna che appartengono anche alla banca RefSeq ( Cercare uno di tali mrna sia in dbest che in RefSeq
105 Banche Dati Biologiche Altre banche specializzate: Entrez Gene banca di geni sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA) dbsnp banca di SNPs (Single Polymorphism Nucleotide) sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)
106 Banche Dati Biologiche Altre banche specializzate: UTRdb banca di regioni UTR in mrna di organismi eucarioti sviluppata da ITB-CNR di Bari (Istituto di Tecnologie Biomediche del CNR)
107 Banche Dati Biologiche Altre banche specializzate: PubMed banca di riferimenti bibliografici sviluppata da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA) PDB (Protein Data Bank) banca di strutture proteiche 3D
108 Sistemi integrati Sistemi per interrogare contemporaneamente più banche dati. SRS Entrez sviluppato EMBL-EBI (European Bioinformatics Institute) sviluppato da NCBI (National Center for Biotechnology Information, USA)
109 Sistemi integrati Esercizio q Usare Entrez per ottenere la sequenza nucleotidica con Accession Number M10051 ( Usare Entrez per ottenere tutte le risorse in cui presente l mrna con GenBank ID NM_ (del gene umano ABCB10) e l EST con GenBank ID AW
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