Solventi (eluenti) per cromatografia :)"#$#%#1#5"#%+!()/$'"=%3.$#-.#5"#

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Tiziano Pandolfi
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1 Solventi (eluenti) per cromatografia!"#$#%&'%(#"$)*')%+,'-.#*/%&'%'&$)./$01$'%/%0/--)%(2#23 4'.*)#-/5) 6#"$/.*)$1$)%&'%./$0)5') 6)*1#5# 4*)$)7)$,') 8'.*)$),#"/5) 8'#"'*%#"#$#!"'*#%/.#"/") 9.#")5# :'$'&'5/!"/5)*) ;#"/5)*) 9.<1/ 9.'&)%/.#"'.) :)"#$#%#*1#5"#%+!()*/$'"=%3.$#-.#5"#

3 Cromatografia su strato sottile (TLC) +<1/5"'"=%&'%./,(')5#%BCDECC%,A3 4$),/")A$/7'/%&'%/&-)$0',#5")%-)*'&)D*'<1'&)% F*%-)*>#5"#%/""$/>#$-)%*?/&-)$0#5"#%(#$%./('**/$'"= F*%-)*'&)%/&-)$0#5"#%G%&'-"#-)%-1%15%-1(()$")%+>#"$)%)%/**1,'5')3%#% *)%-(#--)$#%G%&'%CHIJ,,%(#$%*#%6K4%/5/*'"'.L#%#%MI,,%(#$%*#%6K4% ($#(/$/"'>#

4 Esecuzione pratica di una TLC

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7 " Metodo di separazione CROMATOGRAFIA DI RIPARTIZIONE Ripartizione delle sostanze da separare tra due diverse fasi in base alla loro solubilità Fase stazionaria: liquida Fase mobile: liquida o gassosa Fase mobile Tipo di cromatografia (tecnica) A/-%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%P4 *'<1'&/./$"/H%.)*)55/H%Q:K4

8 Cromatografia: Processo in continuo con fase mobile in contatto con la fase stazionaria

9 Le concentrazioni di A nella fase mobile, [A] m, e nella fase stazionaria, [A] s, sono legate al coefficiente di ripartizione K A m/s K A m/s = [A] m /[A] s Coefficiente di ripartizione tanto maggiore quanto maggiore è l affinità del soluto A per la fase mobile [A] s = [A] m / K A m/s All equilibrio esiste una correlazione lineare tra le concentrazioni di A nelle due fasi

10 Il composto A si ripartisce tra le due fasi in funzione di K A m/s! La fase mobile fluisce lungo colonna trasportando la sostanza A disciolta in essa! Quando la soluzione incontra la fase stazionaria, A si ripartisce tra le due fasi fino a raggiungere l equilibrio! La fase stazionaria in cui era stato deposto A entra in contatto con la faes mibile fresca, ed anche in questo caso A si ripartisce tra le due fasi fino a raggiungere l equilibrio

11 ! Il composto A si trova ripartito tra le due fasi in corrispondenza di una nuova posizione all interno della colonna!il processo si ripete in continuo con il risultato che A cammina attraverso la colonna trasportato dalla fase mobile Il numero di volte che A si ripartisce tra le due fasi viene definito piatto teorico La velocità con cui A si muove attraverso la colonna dipende dalla velocità di flusso della fase mobile e dall affinità relativa di A per le due fasi, ossia dal suo coefficiente di ripartizione In questo modo si possono separare due composti A e B caratterizzati da coefficienti di ripartizione diversi

12 P9N4OR;96RPO9SF9%+P43 #N)*'&'%.)5%($)($'#"=%/&-)$0#5"'%+.$),/")A$/7'/%A/-D-)*'&)%)%&'%/&-)$0',#5")%P43 PK4%G%*/%('U%1-/"/%'5%.L','./%)$A/5'./ K A m/s = [A] m /[A] s = [A] gas / [A] liquido 8)>#%X9Y A/- #%X9Y *'<1'&) -)5)%*#%.)5.#5"$/@')5'%&'%9%5#**/%7/-#%,)0'*#%#% 5#**/%7/-#%-"/@')5/$'/2%K/%.)5.#5"$/@')5#%5#**/%7/-#%-"/@')5/$'/%*'<1'&/% &'(#5&#%&/**/%-)*10'*'"=%&'%9%5#**/%7/-#%*'<1'&/%,#5"$#%*/%.)5.#5"$/@')5#% 5#**/%7/-#%,)0'*#%&'(#5&#%&/**/%>)*/"'*'"=%&'%9%.L#%&'(#5&#%&/**/%"#,(#$/"1$/%/**/%<1/*# />>'#5#%*/%-#(/$/@')5#%#%<1'5&'%*?/5/*'-'%PK4%

13 N"$1,#5"'%(#$%*#%/5/*'-'%P4%#%PK4 Gascromatografi

14 Componenti di un gascromatografo #F5'#"")$# #P/-%&'%"$/-()$")%+7/-#%,)0'*#3 #S)$5) #O'>#*/")$#% Vaporizzazione Iniettore Separazione Gas, colonna, forno Rilevazione (analisi) Rivelatore

15 F5'#"")$# 15/%,'.$)-'$'5A/2%Z)*1,'%"'('.'%CHBDBC%!* P/-%&'%"$/-()$") F*%A/-%&#>#%7*1'$#%-#,($#%/""$/>#$-)%*/%.)*)55/%#%-'%(1V%>/$'/$#%*/%>#*).'"=%&'%*1--) 4)*)55/ :)--)%#--#$#%)%',(/../"#%)%./('**/$' "'()%-'*'.# gascromatografia di adsorbimento "'()%-'*'.)5'%-1%-1(()$")%-)*'&)%+"10)%&'%>#"$)%)%-'*'.#%71-/3 gascromatografia di ripartizione

16 Le colonne capillari sono più efficienti delle colonne impaccate perché a parità di polarità della fase fissa hanno un numero maggiore di piatti teorici Maggiore efficienza nella separazione S/-#%-"/@')5/$'/ N'%()--)5)%-.#A*'#$#%&'>#$-#%7/-'%-"/@')5/$'#%.)5%&'>#$-#%./$/""#$'-"'.L#.),#%()*/$'"=%)%./(/.'"=%/&-)$0#5"#%'5%715@')5#%&#'%.),()-"'%.L#%-'%&#>)5)%-#(/$/$# K/%()*/$'"=%&#**/%7/-#%7'--/%&)>$#00#%#--#$#%-','*#%/%<1#**/%&#'%.),()-"'%&/%-#(/$/$# N'%()--)5)%1-/$#%.)*)55#%.L#%-#(/$/5)%($'5.'(/*,#5"#%'5%715@')5#%&#*% (15")%&'%#0)**'@')5#%&#*%.),()-") ])$,/*,#5"#%5#**#%.)*)55#%./('**/$'%-'%1"'*'@@/5)%()*'-'*)--/5'% &'>#$-/,#5"#%715@')5/*'@@/"'

17 Forno -'%>/$'/%*/%"#,(#$/"1$/%&#*%7)$5)%+&)>#%-'%"$)>/%*/%.)*)55/3%(#$%/1,#5"/$#% Rivelatore ^1/*'"/"'>/,#5"#%.L#%<1/5"'"/"'>/,#5"# #%/%.)5&1.'0'*'"=%"#$,'./%+6483

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

19 '5'#"")$# 4)*)55/_7)$5) $'>#*/")$# 95/*'-'%+"'()%#%<1/5"'"=%./,(')5#3

20 Esperienza di laboratorio CO 2 H OH acido benzoico 2-naftolo naftalene

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