Citogenetica Emato-Oncologica 2013 Marco Mancini, Barbara Crescenzi, Sabine Anne Stioui
26 laboratori partecipanti 52 casi valutati
Casi da sottoporre al CEQ Il primo caso accettato nel mese di marzo 2012 Il secondo caso, con cariotipo anomalo, accettato nel mese di ottobre 2012 Tre immagini di metafasi e due cariotipi, ricostruiti da tali immagini + il relativo referto in formato pdf
Criteri di valutazione ricostruzione dei cariotipi/analisi del cariotipo completezza/appropriatezza Nel CEQ 2013 obbligatoria l indicazione dell analisi della tecnica di coltura utilizzata definizione del risultato (formula ISCN e descrizione) Valutazione appropriatezza più rigorosa interpretazione completezza/adeguatezza della refertazione tempi di refertazione
Performance sufficiente Score 6 su 12,5 Performance insufficiente Score < 6 su 12,5 Qualità del bandeggio inadeguata Interpretazione errata o assente Referto con informazioni incongruenti e/o privo di informazioni essenziali Analisi errata/non completa/non appropriata Formula ISCN errata/assente Descrizione risultato errata/assente
Performance dei laboratori partecipartecipanti al CEQ in citogenetica oncologica 2013 numero di laboratori 12 10 8 6 4 2 0 performance insufficiente 8,5-9,5 9,8-10,8 11-11,8 12-12,3 punteggio medio
Criteri di valutazione Qualità delle immagini CEQ 2013 CEQ 2012
Criteri di valutazione Ricostruzione del cariotipo 3 cariotipi: scambio di un cromosoma 1 cariotipo: alcuni cromosomi non riconoscibili per scarsa qualità del bandeggio
Criteri di valutazione Qualità delle immagini e ricostruzione del cariotipo Una buona qualità della morfologia dei cromosomi è un fattore critico per il successo dell analisi citogenetica Colture adatte alle differenti patologie e modalità di preparazioni adeguate dei campioni da analizzare facilitano il successo dell indagine citogenetica
Criteri di valutazione Formula ISCN CEQ 2012 44% 52% 4% formula corretta errori gravi errori minori
Criteri di valutazione Formula ISCN La stringa del cariotipo secondo l ISCN fornisce l immagine scritta delle anomalie cromosomiche identificate, internazionalmente interpretabile La nomenclatura ISCN è spesso un linguaggio comprensibile solo ai citogenetisti.
Criteri di valutazione Descrizione del risultato (52 referti)
Criteri di valutazione Descrizione del risultato (52 referti) Nel 2013 criteri più stringenti CEQ 2013 descrizione incompleta 40 descrizione non corretta e incompleta 4 CEQ 2012 15 2 descrizione non corretta e fuorviante 2 descrizione non corretta 1 descrizione completa e corretta 5 5 30
Descrizione del risultato Descrizione non corretta: presenza di cellule normali descritta come clone Descrizione incompleta: assenza di numero di cromosomi e/o tipo di riarrangiamento/i ritrovato/i e/o bracci, bande e punti di rottura coinvolti
Criteri di valutazione Referti CEQ 2013 CEQ 2012
Criteri di valutazione Interpretazione (52 referti)
Criteri di valutazione Tempi di refertazione CEQ 2013 CEQ 2012
Performance insufficiente assegnata a 5 laboratori 2 laboratori: descrizione del risultato errata e fuorviante per il clinico nel referto 3 laboratori: analisi non appropriata e risultato non attendibile
Esempio di referto poor
Secondo l ISCN la perdita di un cromosoma è clonale se evidenziata in 3 o più metafasi Interpretazione della perdita del cromosoma Y
Recurring chromosomal abnormalities and their frequency in the myelodysplastic syndromes at diagnosis (WHO Classification of Tumors of Haematopoietic and Lymphoid Tissues 2008) Abnormality MDS t-mds Abnormality MDS t-mds Unbalanced Balanced +8* -7 or del(7q) -5 or del(5q) del(20q)* -Y* i(17(q) or i(17p) -13 or del 13(q) del(11q) del(12p) or t(12p) del(9q) idic(x)(q13) 10% 10% 10% 5-8% 5% 3-5% 3% 3% 3% 1-2% 1-2% 50% 40% t(11;16)(q23;p13) t(3;21)(q26;q22) t(1;3)(p36;q21) t(2,11)(p21;q32) inv(3)(q21q26) t(6;9)(p23;q34) 1% 1% 1% 1% 3% 2% * In assenza di criteri morfologici, anomalie isolate non diagnostiche per SMD
Loss of the Y Chromosome Wong et al., 2008
Loss of the Y Chromosome Random mutation ETA 45,X,-Y 46,XY AML with -Y
Esempio di referto poor
Mieloma multiplo Incidenza di cariotipi anormali nel MM 30-40% Fase non proliferativa Fase attiva con poche cellule proliferanti Fase fulminante con un aumento delle plasmacellule blastiche
Mieloma multiplo Early myeloma Cellule stroma dipendenti In cultura apoptosi No metafasi informative Mieloma avanzato Cellule stroma indipendenti Proliferano in coltura metafasi anormali Metafasi anormali marker di malattia più avanzata
Esempio di referto poor CITOGENETICA ANALISI CROMOSOMICA BANDEGGIO - QFQ Materiale: MIDOLLO OSSEO Colture: ONC,24h Metafasi: 20 Risultato: 46,XY[20] CARIOTIPO MASCHILE NORMALE IBRIDAZIONE IN SITU (FISH) Sonda: 12, ATM (11q22.3),13q14, BCL1/IGH, IGH/BCL2, 17p13 Risultato: Assenza trisomia 12, normali le altre sequenze indagate ( ATM, 13q14, BCL1, IGH,BCL2, 17p13) nei 200 nuclei analizzati
Leucemia linfoide cronica Cellule linfoidi arrestate in fase G 0 -G 1 Se coltivate in assenza di mitogeni e citochine muoiono rapidamente Una stimolazione combinata con IL-2 e CpGoligonucleotidi può superare il difetto proliferativo
Ringraziamenti G.Floridia F.Censi, F.Tosto D.Taruscio Centro Nazionale Malattie Rare Istituto Superiore di Sanità