Bologna 24 settembre 2005
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- Amanda Belli
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1 MICROSCOPIA AUTOMAZIONE Alterazioni morfologiche Anisocitosi Poichilocitosi Inclusi eritrocitari ANISOCITOSI Microcitosi - Macrocitosi ANISOCROMIA Ipocromia - Ipercromia
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3 !"# ""#$##!!% LA DIAGNOSTICA SI ARTICOLA QUINDI IN SENSO PRETTAMENTE DIFFERRENZIALE PARAMETRI Più FREQUENTEMENTE USATI: RBC HB HCT MCV MCH MCHC Reticolociti
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5 Anni 80 - primi 90 Citometria a flusso: Volume del GR e concentrazione dell Hb (RDW e HDW): orientamento diagnostico e monitoraggio terapeutico delle anemie (D Onofrio G, Zini G et al. Arch Pathol Lab Med 1992)
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7 Hgb e Volume cellulari Diagnosi Anemia Monitoraggio Anemia Doppia emoglobina Informazioni accurate Più informazioni Basso review rate
8 Analisi RBC Macro 120fl Y asse: Volumi X asse: densità celllulare 60fl Micro Hgb.conc. 28g/dl 41g/dl Ipo Iper
9 Analisi RBC Normal β-thalassemia Trait Iron Deficiency Anemia (IDA) Sickle Cell Anemia
10 Analisi RBC Reticolocitosi Anemia sideropenica Trait Beta thalass.
11 Anemia sideropenica Quadro ematologico Hb ridotta MCH ridotto MCHC ridotto CHr ridotto HDW aumentato (anisocromia) % Hypo aumentata
12
13 Thalassemia o Anemia mediterranea Forma omozigote Thalassemia Major o Morbo di Cooley se i genitori sono entrambi portatori della malattia Forma eterozigote Thalassemia minor Thalassemia minima
14 Thalassemia o Anemia mediterranea Thalassemia Major quadro ematologico ridotto numero di globuli rossi (~ ) riduzione drastica dell Hb (< 8 g/dl) notevole aumento dell Hb F (~ 100%) MCV molto ridotto RDW molto aumentato (spiccata anisopoichilocitosi)
15 Thalassemia o Anemia mediterranea Thalassemia Minor forma eterozigote quadro ematologico MCV ridotto Hb ridotta Hb A 2 aumentata In questo tipo di anemia microcitica, l RDW è di norma basso,e l istogramma presenta una base ristretta, in quanto la popolazione eritrocitaria, pur essendo microcitica, è molto omogenea,ad indicare la natura genetica della patologia
16 MCV = 66 fl; M/H ratio = 2.05 Absence of Iron Deficiency (ß-Thalassemia trait)
17 LA DIAGNOSI DI PORTATORE DI TRATTO TALASSEMICO PUÒ ESSERE MOLTO FACILE PER I QUADRI CLASSICI MA MOLTO COMPLESSA IN SITUAZIONI ATIPICHE (δ( βtalassemie, αtalassemie, TALASSEMIE SILENTI )
18
19 !"#$$ $!#$$ " 1973 Mentzer MCV/RBC Srivastava MCH/RBC Fraser [MCV-(5xHb) (5xHb)-RBC-3.4] 1977 Shine & Lal MCV 2 x MCH/ England MCV-5 5 x HGB-RBC 1983 Bessman RDW/MCV 1984 Makris (MCV/RDW)/(MPV/PDW) 1987 Fossat RDW/HDW 1987 Ricerca RDW/RBC 1988 Green (MCV 2 xrdw-cv)/(hbx100)
20 !"#$$ $!#$$ " 1990 D Onofrio %MICRO/%HYPO 1991 Bruno 0,096MCV + 0,415RDW-cv 0,139RBC Danise %HYPO/%MICRO 1993 Colarco [+0,216*RBC+0,117*CHCM-0.029*MCV] 0.029*MCV] Telmissani MDHL=(MCH x RBC)/MCV 2002 Vicinanza DIBTT1 e DIBTT2 Rocco CHDW
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26 #/0) / # ' 1234 )56 C C AC C D E C C CC
27 $$%&&& Citometria a flusso: Volume e concentrazione dell Hb (eritrociti e reticolociti). I parametri reticolocitari sono indicatori precoci nel monitoraggio dell eritropoiesi midollare (trapianti di midollo, IRC in terapia con rhuepo, monitoraggio terapia marziale, autotrasfusioni, sferocitosi, anemia megaloblastica, anemia del prematuro, neoplasie, malattie croniche: AIDS, artrite reumatoide) Brugnara et al. Crit Rev Clin Lab Sci 2000; Mcdougall et al. Nephrol Dial Transplant 1998; Alan E. Mast et al. Blood 2002; Thomas C et al. Clin Chem 2002;
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30 High Angle (5-15 degrees) Oxazine 750 Absorption
31 &/ 1, 0H.A< 1.1:0H?< 1 31: 0H3< 1 > ) ) I!) )D(J:G;J6% 4
32 β G,5:" ED 0:"#1, 5 8,&8K. G,43L:8&+:+..
33 β + 7G%:2@:,2@:"2@:":7G#2:"# G%:0,5":1/ 1 1 :"# 0 1 MCVr G,43L:8&+:+.. CHDW
34 Best practice guideline for carrier identification and prenatal diagnosis of hemoglobinopaties J.Traeger-Synodinos, J.M.Old, M.Petrou, R.Galanello March 2002 Screening uso di tests biochimici semplici in determinate condizioni. Diagnosi definitiva Diagnosi definitiva uso di metodi di caratterizzazione del DNA o altre proteine
35 B " &K &.A
36 M JB #N:N%/ >) A %O!('. "+N/% & ( ))P%N"/ 9 : ::@/ "9/494
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41 ) *!+ The Importance and Challenge of Automatic Disease Pre-Classification Automatic disease pre-classification has a great potential as a practical tool to aid patient diagnosis This pre-classification may alert the medical staff to sample abnormality and would lead to rapid confirmatory testing Potentially leading to earlier diagnosis, more effective treatment Screening endemic populations at reduced cost Challenges Legal, financial, medico-cultural cultural issues Physician acceptance
42 β-thalassemia Accuracy of ADVIA Neural Network 100% 71% N=31 N=4 α 2 α 1 γ δ β α 2 α 1 X γ δ β α 2 α 1 γ δ β α 2 α 1 γ δ β X X β-thalassemia Heterozygote β-thalassemia Homozygote
43 IDA Combined With Hemoglobinopathy and Normal Accuracy of ADVIA Neural Network 100% 100% 98% 82% 83% N=17 N=17 N=17 N=49 N=176 IDA IDA + α-thalassemia-1 IDA + β-thalassemia Trait IDA + Hemoglobin E Trait Normal
44 ,- The European Neural Network Group (ENNG) was established in January sites in four countries agreed to participate in the ENNG (samples > 2.200) Goal was to collect sufficient ADVIA 120 CBC/Diff/Retic data to develop a neural network-based expert system for RBC disorders Based on successful Thailand study
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46 ( & K 0 C1 E T
47 Se Se tutti tutti gli gli elementi di di un un esame emocromocitometrico vengono considerati nel nel contesto clinico, possono fornire una una guida indispensabile alle alle possibili cause dell anemia del del paziente ed ed una una guida alla alla richiesta dei dei test test per per la la diagnosi definitiva. I I test test non non necessari non non solo solo aggiungono delle delle spese, ma ma possono condurre a delle delle diagnosi sbagliate ed ed in in alcuni casi casi ad ad inappropriati trattamenti. Ralph Carmel
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