LINFONODO SENTINELLA LINEE GUIDA PIEMONTESI. Francesca Pietribiasi. 26 novembre Asl to 5 Anatomia Patologica Ospedale S. Croce Moncalieri (TO)

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1 LINFONODO SENTINELLA LINEE GUIDA PIEMONTESI Francesca Pietribiasi 26 novembre 2008 Asl to 5 Anatomia Patologica Ospedale S. Croce Moncalieri (TO)

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4 Scanner lavoro pathologica

5 METODO DI INVIO ogni LS va inviato fresco (o in FT) in contenitore separato ed etichettato tutti i LS sono trattati secondo il protocollo.

6 RIDUZIONE MACROSCOPICA Vanno eseguite sezioni perpendicolari all asse maggiore ad intervalli di 2 mm 2 mm

7 diametro 10 mm diametro 14 mm

8 PROTOCOLLO DI TAGLIO Metodo di processazione minimo: individuazione di tutte le metastasi >2mm (macromts); metodo di processazione ottimale: individuazione delle micromts (>0,2 <= 2mm); individuazione di ITC: multistep sectioning e ICC

9 PROTOCOLLO DI TAGLIO AL MICROTOMO serial step sectioning 1 e&e e 1 sezione bianca Salto di 100 micron 1 e&e e 1 sezione bianca Salto di 100 micron 1 e&e e 1 sezione bianca E così via fino ad esaurimento del materiale

10 Alla fine si otterranno 20 sezioni colorate con e&e e 20 sezioni bianche su cui fare eventuali approfondimenti con colorazioni immunoistochimiche. Le due sezioni colorate, distanti tra loro 100 micron, possono venir messe per comodità sullo stesso vetrino 2 sezioni 100µ 2 sezioni 100µ 2 sezioni 100µ

11 IMMUNOISTOCHIMICA (citocheratine ad ampio spettro) Utile per la diagnosi di micromts Evidenzia le ITC Raccomandata nei CLI Approfondimenti diagnostici in caso di malattia linfoproliferativa

12 J Clin Pathol 2006;59: (4%) (21%) (9%) (34%)

13 REFERTAZIONE ISTOPATOLOGICA (1) N. totale di LS esaminati Diametro massimo del LS Colore del LS (colorante vitale)

14 REFERTAZIONE ISTOPATOLOGICA (2) LS esaminato su sezioni in paraffina condotte ad intervalli di 100 microns fino all esaurimento del materiale incluso. Esame microscopico condotto su (n) sezioni colorate con ematossilina ed eosina e mediante immunocolorazioni (n) con anticorpi anticitocheratina (clone) su distretto superficiale, medio e profondo di taglio

15 REFERTAZIONE ISTOPATOLOGICA (3) Sede della mts Misurazione millimetrica della micromts Presenza di focolai multipli Lesione osservata in E&E e/o in IIC pn (sn) (tnm Vl ed.)

16 ESAME INTRAOPERATORIO Quando? In caso di effettiva necessità clinico-chirurgica con impatto sul trattamento immediato o in caso di linfonodi macroscopicamente sospetti Come? Apposizioni touch imprints /sezioni criostatiche/ scraping secondo le preferenze e l esperienza di ogni singolo centro

17 TNM classification of malignant tumours Sixth Edition 2002 pn1 mi: micrometastasis (larger than 0.2 mm, but none larger than 2 mm in greatest dimension)

18 Definizione di cellule tumorali isolate Isolated Tumour Cells (ITC) are single tumour cells or small cluster of cells not more than 0.2 mm in greatest dimension that are usually detected by immunohistochemistry or molecular methods, but which may be verified with H&E stains.

19 ITC micrometastasi

20 Significato biologico ITC? Isolated Tumour Cells (ITC) do not typically show: - evidence of metastatic activity (proliferation or stromal reaction) - or penetration of vascular or lymphatic sinus walls.

21 TNM 2002 pn0 (i-) (sn) no sentinel lymph node metastasis histologically, negative morphological findings for ITC pn0 (i+) (sn) no sentinel lymph node metastasis histologically, positive morphological findings for ITC

22 Scheda sull'attività dei Gruppi di lavoro: - TITOLO DEL LAVORO: Protocollo di studio Anatomo-Patologico del linfonodo sentinella - OBIETTIVO DEL LAVORO: La mancanza di linee guida standardizzate per l esame anatomo-patologico del linfonodo sentinella determina, come emerge dalla recente letteratura, risultati diversi tra i vari centri per quanto concerne la frequenza delle micrometastasi e delle cellule tumorali isolate. L obiettivo del gruppo di lavoro è quello di uniformare, nell ambito GISMa, la metodica di studio anatomo-patologico. -COORDINATORI: Referenti: Prof.ssa Anna Sapino (Torino) Prof.ssa Patrizia Querzoli (Ferrara). Dott.ssa Francesca Pietribiasi (Moncalieri) -INDIRIZZO PER INVIO CONTRIBUTI/COMMENTI: anna.sapino@unito.it, -tel: fax: francescapietribiasi@yahoo.it -grp@unife.it