La ricerca di un vaccino antimeningococco B. Maria Grazia Pizza. Roma, 5 luglio 2005
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1 La ricerca di un vaccino antimeningococco B Maria Grazia Pizza Roma, 5 luglio 2005
2 Le meningiti batteriche potranno presto essere eliminate MenC Disponibile dal 2000 MenY, W, A In sviluppo /E fattibile! capsula polisaccaride Carrier Polisaccaride o oligosaccaride coniugato MenB????? L ultimo ostacolo..
3 La capsula polisaccaridica del MenB è un self antigen Il polisaccaride della capsula del sierogruppo B è un polimero dell acido polisialico presente anche nelle glicoproteine di adesione CAM (Cell Adhesion Molecules), espresse nel periodo pre- e post-natale e dai tessuti neuronali adulti.
4 Approcci per un vaccino contro MenB Basati sulla capsula Vaccini polisaccaridici Rischio di autoimmunità Basati su antigeni Vaccini OMV (Cuban, Norwegian) Vaccini ricombinanti multivalenti OMP (RIVM) Transferrin-binding proteins H.8, NspA surface antigen Variabilità antigenica Protezione solo contro il ceppo omologo (OMV)
5 OMV vaccine preparation blebbing meningococcus extracted OMV vesicles purified LPS-depleted OMV OMV
6 Outer membrane proteins vesiclebased vaccines (OMV): Rappresentano i vaccini ideali nel caso di epidemie di tipo clonale. Efficaci solo contro il ceppo omologo. Durante gli anni 80, molte prove di cliniche di efficacia sono state condotte in Brasile, Cile, Norvegia e Cuba con vaccine basati su ceppi diversi. Dopo due dosi l efficacia verso il ceppo omologo è >70% ma solo negli adulti. Sono necessarie 3 dosi per avere protezione nei bambini contro il ceppo omologo.
7 casi/ New Zealand Notified Meningococcal Rates 2001 Northland North West Auckland Central Auckland South Auckland Waikato Tauranga Rotorua Eastern Bay of Plenty Gisborne Nelson-Marlborough West Coast Wairarapa Hutt Wellington Canterbury South Canterbury Southland Otago casi/100000
8 Un vaccino per la Nuova Zelanda Un vaccino tailor made è stato sviluppato, specifico per il ceppo MenBNZ. Progetto di collaborazione tra il Ministero della salute della Nuova Zelanda, Chiron e l NIPH norvegese. Programma di ummunizzazione per tutte le fasce di età al di sotto dei 20 anni.
9 Un nuovo approccio per un vaccino contro menb
10 Reverse vaccinology
11 Vaccino Men B:un approccio genomico 600 potenziali candidati identificati 350 proteine espresse in E.coli 344 proteine purificate ed usate per immunizzare topi 91 nuove proteine, esposte in superficie, identificate 28 nuove proteine con attività battericida antigeni migliori
12 Problema di variabilità antigenica La maggiorpartedegliantigeninotimostrano variabilità antigenica e non rappresentano dei candidati ideali per lo sviluppo di un vaccino capace di proteggere contro i vari ceppi di meningococco B Sono gli antigeni identificati conservati in termini di sequenza?
13 Albero filogenetico
14 Alcuni antigeni sono ben conservati..
15 altri sono più variabili
16 Inoltre.. Sono gli antigeni conservati capaci di indurre una risposta battericida contro ceppi diversi? Un vaccino basato su una combinazione di antigeni potrebbe essere capace di proteggere contro ceppi diversi di meningococco B.
17 GNA 1870, uno dei nuovi antigeni identificati dall analisi del genoma di Neisseria meningitidis MC58 Predetta come proteina di superficie di 274 aa. Caratterizzata da un tipico motivo di lipoproteine, con un lipo-box : Leu-X-X-Cys Bassa omologia con un dominio di TfbA (Transferrin binding protein) di Actinobacillus pleuropneumoniae E una lipoproteina esposta in superficie Non lega la trasferrina umana Induce anticorpi battericidi E espressa da tutti i ceppi di Neisseria analizzati
18 E conservato in sequenza? Il gene è stato amplificato in circa 150 ceppi di Neisseria % % % L attività battericida è variante specifica: anticorpi contro ciascuna variante inducono battericidia solo verso il ceppo omologo. Sieri policlonali ed un anticorpo monoclonale sono stati usati per mappare gli epitopi lineari e conformazionali.
19 Map of the regions containing epitopes A B C Gli epitopi battericidi sono localizzati prevalentemente nel dominio BC. dodecapeptides BCA MC58 aa numbering A B C AB BC Freund s Alum <4 16 <4 <4 <4 512 <4 < Full length
20 Conclusioni Mediante l approccio di reverse vaccinology siamo riusciti ad identificare degli antigeni esposti sulla superficie del batterio, conservati e capaci di indurre una risposta battericida contro vari ceppi di meningococco. Il vaccino finale sarà basato su una combinazione di antigeni. Prove cliniche sono in corso per valutare l immunogenicità nell uomo e la capacità di proteggere contro ceppi diversi.
21 Conclusioni La meningite batterica sarà eliminata negli anni futuri
22 Il gruppo MenB Biochemistry Silvana Savino Laura Ciucchi Daniele Veggi Elena Cartocci Gene variability Maurizio Comanducci Stefania Bambini Francesca Morandi Serology Marzia M. Giuliani Brunella Brunelli Alessia Biolchi Laura Santini Enrico Luzzi Barbara Galli Francesca Ferlicca Bioinformatics Vega Masignani Maria Scarselli Molecular biology Beatrice Aricò Federica Di Marcello Davide Serruto Barbara Capecchi Genetics Jeannette Adu-Bobie Rino Rappuoli
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