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1 Puoi iniziare con un laser e aggiungere gli altri quando serviranno. NovoCyte TM, la nuova frontiera della citofluorimetria in ricerca. E con i reagenti ebioscience Affymetrix, completiamo l offerta facendoti risparmiare il budget! Con ebioscience, il citofluorimetro lo paghi ancora meno. Novocyte 1000 Novocyte 2000 Novocyte 2060 Novocyte laser 3 colori 2 laser 4 colori 2 laser 6 colori 3 laser 13 colori Tutti i sistemi sono aggiornabili sino alla configurazione a tre laser. Comprende installazione completa, Starter Kit fluidica, software gratuito tre licenze. Campionatore opzionale Porta la citofluorimetria ad un nuovo livello: analizzare l mrna e le proteine simultaneamente nella singola cellula. Human e Mouse sono da oggi disponibili presso Prodotti Gianni, il distributore esclusivo in Italia.

2 POTENTE. INTUITIVO. PERSONALIZZABILE. Il citofluorimetro NovoCyte TM soddisfa l'intera gamma delle esigenze legate alle analisi cellulari multiparametriche. ACEA offre NovoCyte TM il citofluorimetro dalle alte prestazioni ad un costo contenuto: Potente : Intuitivo: Personalizzabile: Fino a 15 parametri rilevati con maggiore sensibilità e risoluzione Manutenzione dello strumento automatizzata e capacità di analisi avanzata dei dati per un migliore utilizzo da 1 a 3 laser, filtri intercambiabili, opzioni multiple di campionamento e formati di analisi flessibili. CANALI DI RILEVAMENTO DI FLUORESCENZA CONFIGURABILI PER UNA MAGGIORE FLESSIBILITÀ VOLTAGGIO PMT OTTIMIZZATO & RANGE DI RILEVAMENTO DINAMICO A 24 BIT 13 CANALI FLUORESCENTI DI DETECTION: OPZIONI MULTI-LASER OFFRONO FLESSIBILITÀ DI SCELTA (405NM, 488 NM, 640NM) SISTEMA FLUIDICO VOLUMETRICO PER UNA MAGGIORE PRECISIONE E FACILITÀ DI MANUTENZIONE DESIGN OTTICO INNOVATIVO & SIGNAL DETECTION AVANZATA

3 CARATTERISTICHE TECNICHE

4 ENTER A NEW DIMENSION OF SINGLE-CELL ANALYSIS Questo sistema innovativo Affymetrix ebioscience permette di studiare l mrna e proteine con un analisi citofluorimetrica a livello della singola cellula. Il test permette di profilare RNA ed espressione proteica all interno di singole cellule abbattendo il limite tipico della citofluorimetria: rimanere a livello anticorpale della superficie delle cellule. I progetti di ricerca di immunologi, ricercatori che lavorano sulle staminali, oncologi e non solo possono tranne un enorme vantaggio dal PrimeFlowTM. Questo nuovo metodo di analisi impiega una tecnica di fluorescent in situ hybridization (FISH) brevettata, che consente il rilevamento simultaneo fino a un massimo di tre trascritti di RNA in una singola cellula utilizzando un citofluorimetro standard. Il rilevamento dell RNA può essere abbinato all uso di anticorpi coniugati utilizzati a livello della superficie cellulare o intracellulare per una migliore comprensione delle dinamiche. Il test utilizza gli stessi principi del ViewRNA Affymetrix (ex Panomics), prodotto collaudato e ampiamente citato in letteratura, progettato per l'analisi microscopica di RNA in cellule e tessuti. PrimeFlow TM combina oligonucleotidi specifici marcati con segnale ramificato (bdna) per rilevare con precisione l'espressione genica a livello di singola cellula. L espressione di RNA abbinata alla rilevazione della proteina genera dati multi parametrici in popolazioni cellulari eterogenee e offre informazioni dettagliate a livello della singola cellula. Al contrario, microarray e sequenziamento sono in grado di fornire dati completi di espressione genica a livello globale del campione, senza poter rivelare effetti a livello di specifici sottoinsiemi cellulari. Utilizzando il PrimeFlow RNA Assay, invece, possono essere analizzati i livelli di espressione e trascrizione relativi a cellule specifiche o a sottoinsiemi di cellule, valutando nel tempo la regolazione della trascrizione e l'espressione delle proteine. Tali informazioni uniche e preziose possono rispondere a domande in precedenza senza risposta e avere implicazioni importanti in svariati campi della ricerca. Con PrimeFlow RNA Assay è possibile: Osservare l eterogeneità dell'espressione genica a livello di singola cellula Confrontare la cinetica di RNA e proteina nella stessa cellula Rilevare RNA non codificante in sottoinsiemi cellulari Valutare RNA virale in cellule infettate Analizzare i livelli di espressione di mrna laddove ci sia carenza di anticorpi commerciali

5 PROCEDURA Preparazione del campione: - Colorazione anticorpo sulla superficie cellulare (opzionale) - Fissazione e permeabilizzazione - Colorazione anticorpo intracellulare (opzionale) e ibridizzazione con la sonda mrna-specifica - Amplificazione del segnale con bdna - Analisi citofluorimetrica Ibridizzazione del target Una sonda specifica contenente coppie di oligonucleotidi ibridizza con la regione specifica della sequenza di RNA. L amplificazione del segnale necessita che ogni metà dell oligo leghi l RNA target nella posizione adiacente. Attualmente sono disponibili tre tipi di sonde: Alexa Fluor 647 (Tipo 1 Probe Sets), Alexa Fluor 488 (Tipe 4 Probe Sets) e Alexa Fluor 750 (Tipe 6 Probe Sets). Quando si cerca più di un mrna target in un singolo campione, ogni set di sonde deve essere differente per poter distinguere il segnale. Amplificazione del Segnale Usa la tecnologia bdna e si ottiene con una serie di ibridizzazioni sequenziali che formano una struttura ad albero. Molecole di pre-amplificazione ibridizzano sulle rispettive coppie di sonde oligo, formando il tronco dell albero. Molte molecole di amplificazione ibridizzano sulle rispettive molecole di pre-amplificazione creando i rami. In ultimo, molte sonde ibridizzano sugli amplificatori formando le foglie. Un sistema completo di amplificazione contiene 400 siti di legame con le sonde, con una potenziale amplificazione di volte. Analisi in Fluorescenza L mrna target si ottiene analizzando il campione con un citofluorimetro standard (laser a 488 nm e filtri appropriati) per catturare il segnale fluorescente. INFORMAZIONI PER L ORDINE I kit Assay sono disponibili nei formati 40 e 100 test e nelle varianti Human (codice BMS ) e Mouse (BMS ). Oltre sonde sono già disponibili e, senza variazioni di prezzo, è possibile richiedere lo sviluppo di sonde su misura (minimo d ordine al primo acquisto 100 test).

6 TUTTO QUELLO CHE TI SERVE PER LA CITOFLUORIMETRIA. In Prodotti Gianni trovi anche Oltre ANTICORPI PRIMARI PER CITOFLUORIMETRO, purificati o disponibili con tutte le marcature (dall UV al rosso) per uomo e per tutte le specie animali, adatti a qualunque citofluorimetro. BUFFER e SOLUZIONI ISOTYPE CONTROLS, migliaia disponibili in tutte le marcature FIXABLE VIABILITY DYES per analisi live/dead coniugate con diversi fluorofori SISTEMA SU BIGLIE per analisi MULTIPARAMETRICHE al citofluorimetro. Da Abcam 150 analiti per human, 50 mouse e 30 rat (fino a 24 target simultanei con solo 15 µl di campione). BIGLIE DI CONTA E DI COMPENSAZIONE UNIVERSALI disponibili anche per il laser violetto

7 BUFFER DI EBIOSCIENCE Descrizione Codice Descrizione Codice 10X RBC Lysis Buffer (Multi-species) BMS Fixation/Permeabilization Diluent BMS step Fix/Lyse Solution (10X) BMS Flow Cytometry Staining Buffer BMS X RBC Lysis Buffer BMS Foxp3 / Transcription Factor BMS Fixation/Permeabilization Concentrate and Diluent Binding Buffer for Annexin V BMSBMS500BB Foxp3 / Transcription Factor Staining BMS Buffer Set BrdU Staining Buffer Set for Flow BMS IC Fixation Buffer BMS Cytometry Brefeldin A Solution (1000X) BMS Intracellular Fixation & BMS Permeabilization Buffer (plus Brefeldin A) Cell Stimulation Cocktail (500X) BMS Intracellular Fixation & BMS Permeabilization Buffer Set Cell Stimulation Cocktail (plus BMS Lipopolysaccharide (LPS) Solution BMS protein transport inhibitors) (500X) (500X) CellVue Diluent C (For CellVue Cell BMS Monensin Solution (1000X) BMS Labeling Kits) efluor NC Flow Cytometry Staining BMS Permeabilization Buffer (10X) BMS Buffer (5X) (Discontinued) Fixation/Permeabilization Concentrate BMS Protein Transport Inhibitor Cocktail (500X) BMS FIXABLE VIABILITY DYE DI EBIOSCIENCE I Fixable Viability efluor Dyes offrono il vantaggio significativo rispetto ai coloranti convenzionali di etichettare irreversibilmente le cellule morte prima dei passaggi di fissaggio e permeabilizzazione necessari per la colorazione dei target intracellulari. Descrizione Codice 100 test Codice 500 test Fixable Viability Dye efluor 450 BMS BMS Fixable Viability Dye efluor 660 BMS BMS Fixable Viability Dye efluor 780 BMS BMS Fixable Viability Dye efluor 506 BMS BMS Fixable Viability Dye efluor 520 BMS BMS Fixable Viability Dye efluor 455UV BMS BMS Descrizione Sample Pack Fixable Viability Dye efluor 506/780 BMS

8 BEAD-BASED MULTIPLEX IMMUNOASSAYS DI ABCAM Quantificare contemporaneamente fino a 24 proteine in un campione 15μl Selezionare il proprio pannello multiplex scegliendo tra oltre 150 diverse proteine Analizzare su qualsiasi citofluorimetro Disponibile per uomo, topo e ratto Reagenti premiscelati disponibili per i pannelli multiplex I Bead-based Multiplex Immunoassays di Abcam sono progettati per la misurazione quantitativa simultanea di fino a 24 proteine, in un campione da 15 ìl, in un unico pozzetto o vial. Questi test hanno un flusso di lavoro semplice, il lavaggio può essere effettuato con qualsiasi washer e il campione analizzato su qualsiasi citofluorimetro con laser blu (488nm) in grado di rilevare FS, SS, PE e PECy5 (e/o PECy7). I saggi usano 24 diversi set di beads, codificate da due dimensioni e 12 intensità di fluorescenza. L'analisi dei dati è semplice grazie al software raccomandato (FCAP Array TM ) o ad altri pacchetti software simili. Disponibili test per oltre 150 proteine human, 50 mouse e 30 rat. I saggi sono compatibili con campioni di cellule surnatanti, siero, plasma, lisati cellulari o tissutali e altri fluidi corporei. Typical Assay Performance Sensitivity (limit of detection) - < 4 pg/ml Quantitation range: o Lower limit - <10 pg/ml o Upper limit - >2,000 pg/ml Standard dose recovery: % Precision: o Intra-assay CV: < 10% o Inter-assay CV: < 20% BEADS PER CONTA E PER COMPENSAZIONE DI EBIOSCIENCE Descrizione Codice Q.tà 123count ebeads 10 * 2^10 BMS test Conta assoluta di cellule o altre particelle tramite citofluorimetro OneComp ebeads BMS test Biglie universali utilizzabili in compensazione con tutti i fluorocromi eccitati da laser blu (488 nm), verde (532 nm), giallo-verde (561 nm) e rosso (633- BMS test 635 nm) UltraComp ebeads BMS test Biglie universali utilizzabili in compensazione con tutti i fluorocromi eccitati dalla laser con luce ultravioletta (355 nm), viola (405 nm), blu (488 nm), verde (532 nm), verde - giallo (561 nm) e rosso ( nm) BMS test

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