Dalle prime diagnosi molecolari alla sperimentazione di nuove terapie: vent'anni di X fragile a Padova tra vecchi problemi e nuove sfide

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1 Dalle prime diagnosi molecolari alla sperimentazione di nuove terapie: vent'anni di X fragile a Padova tra vecchi problemi e nuove sfide Dr. Alessandra Murgia Clinica Pediatrica Dipartimento SDB Azienda ospedaliera Università degli Studi di Padova

2 Il nostro punto di vista: un ospedale pediatrico Com è cambiato l approccio alla diagnosi differenziale di ritardo dello sviluppo psicomotorio - disabilità intellettiva - disordini dello spettro autistico Com è cambiato la diagnosi molecolare di X fragile Cos abbiamo imparato del fenotipo e come è cambiato l approccio ad un sospetto clinico di sindrome X fragile I fenotipi associati: com è cambiata la consulenza familiare Quali i risultati diagnostici ottenuti Quali le sfide che ci attendono con conoscenze scientifiche e capacità diagnostiche così migliorate Cosa ci manca per affrontare le sfide future

3 La Pediatria di Padova è un Ospedale Pediatrico NEURORADIOLOGIA PSICHIATRIA INFANTILE/NEUROPSICOLOGIA NEUROLOGIA DELLO SVILUPPO NEUROFISIOLOGIA/EPILETTOLOGIA LABORATORIO GENETICA MOLECOLARE DEL NEUROSVILUPPO

4 La diagnosi differenziale nel ritardo globale dello sviluppo (GDD)/disabilità intellettiva/disordini dello spettro autistico (ASDs) VALUTAZIONE CLINICA VALUTAZIONE CLINICA/NEUROPSICOLOGICA NEURORADIOLOGICA CARIOTIPO PROFILO METABOLICO ANALISI CITOGENETICA DEL SITO FRAGILE X INDAGINI GENETICHE : CARIOTIPO Array CGH Test X Fragile

5 Com è cambiata la diagnosi genetica di X fragile ANALISI CITOGENETICA : la fragilità del cromosoma X IN SOGGETTI CON SINDROME DI MARTIN-BELL Lubs HL : Marker X chromosome in a family with males with mental retardation following an X-linked pattern Am J Hum Genet 1969

6 Fragile X genotype characterized by an unstable region of DNA.. Yu S et al. Science 1991 Identification of a gene (FMR-1) containing a CGG repeat coincident with a breakpoint cluster region exhibiting length variation in fragile X syndrome. Verkek AJ et al. Cell 1991 Instability of a 550-base pair DNA segment and abnormal methylation in fragile X syndrome. Oberle I et al. Science 1991 IL SOUTHERN BLOT DIAGNOSTICA MOLECOLARE DELLA SINDROME X FRAGILE: Espansione e Metilazione della regione FRAXA 1992

7 Amplificazione PCR delle ripetizioni CGG: il numero delle triplette ripetute Definizione precisa delle diverse categorie di alleli FMR1

8 IL TEST X FRAGILE OGGI Il numero di ripetizioni CGG la metilazione le interruzioni AGG

9 Un test rapido, sempre più preciso e affidabile, ma quello che si vede cambia con l avanzamento della tecnologia ed è sempre più complesso * Un test a costo contenuto

10 Cos abbiamo imparato del fenotipo X fragile?

11 Come è cambiato l approccio verso un sospetto clinico di sindrome X fragile?

12 Il % dei bambini con Sindrome X Fragile presenta un quadro di autismo/manifestazioni dello spettro autistico Il 2-8% dei bambini con autismo/manifestazioni dello spettro autistico ha la Sindrome X Fragile

13 Manifestazioni della sindrome X fragile in soggetti con premutazioni FMR1 Luca 5 anni, presenta ritardo globale dello sviluppo, con particolare riguardo al linguaggio, disturbo della relazione/socializzazione Simone 7 anni, è un bambino particolarmente timido, con difficoltà di socializzazione, difficoltà scolastiche. Facies caratteristica

14 La diagnosi è del 1994!

15 I fenotipi X Fragile: FXS FXPOI FXTAS Siamo proprio sicuri che il messaggio sia stato recepito?? La nostra casistica X fragile dal : 4800 soggetti testati Dal invii per POI: 4 positivi (2 con nota familiarità FXS) Dal invii per sospetto FXTAS: 3 positivi (due con nota familiarità FXS)

16 E cambiato l approccio alla consulenza familiare!! Il modello originale di step successivi per mutazioni diverse viene sostituito da un nuovo modello basato sul concetto di continuum di effetti che attraversa l intero spettro mutazionale

17 Quali risultati abbiamo ottenuto in termini diagnostici? La diagnosi eziologica di condizioni cliniche prima sconosciute La possibilità di fornire informazioni clinicamente utili circa il rischio di insufficienza ovarica precoce nelle donne portatrici di premutazione (NB: 1:209, Tassone et al Genome Medicine 2012 )

18 E la possibilità di una diagnosi precoce di Sindrome X Fragile!! A Padova età media alla diagnosi: : 11.7 aa : 8.7 aa : 5.7 aa Non è abbastanza!

19 A PADOVA DAL IN SOGGETTI MASCHI CON APPARENTE ASSENZA DI FAMILIARITA PER SINDROME X FRAGILE/DISABILITA INTELLETTIVA/ASDs MINORE ETA ALLA DIAGNOSI : 1 ANNO 10 ANNI 15 ANNI 11 ANNI 16 ANNI MAGGIORE ETA ALLA DIAGNOSI : 48 ANNI!

20 L ETA MEDIA ALLA DIAGNOSI NEGLI USA E CIRCA MESI PER I MASCHI E 42 MESI PER LE BAMBINE ODISSEA DIAGNOSTICA

21 Le sfide per il futuro?

22 Lo Screening! Earlier identification in the absence of systematic screening will likely continue to be a challenge. Quale popolazione? Quali mutazioni?

23 Terapie innovative! Modulatori epigenetici Agonisti dei recettori GABA Antagonisti dei recettori metabotropici del Glutammato Proteine target di FMRP Padova è uno dei tre centri Italiani che stanno conducendo Trial clinici con antagonisti dei recettori mglur in 8 soggetti adolescenti : AFQ056 (Novartis) Protocollo CAFQB2214 completato Protocollo CAFQ056B2278 in corso

24 Abbiamo fatto molta strada ma abbiamo bisogno di più formazione e informazione Maggiore conoscenza delle patologie associate a X fragile Maggiore attenzione diagnostica alla Sindrome X fragile Maggiore informazione sull importanza di una diagnosi precoce Maggiore informazione e maggiore sensibilità nei confronti delle possibili novità terapeutiche

25 Clinica Pediatrica Dipartimento SDB Azienda Ospedaliera e Università di Padova ROBERTA POLLI EMANUELA LEONARDI ELISA BETTELLA STEFANO SARTORI SILVIA ZANATO LARA DAL ZOTTO VALENTINA BOSCOLO MARCO RICCA MONICA MANTEGAZZA ALESSANDRA MURGIA