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Cromatografia su strato sottile (TLC) 6#.5'./%$/('&/%(#$%*/%-#(/$/@')5#%#%*?/5/*'-'%<1/*'"/"'>/%&'%,'-.#*#% +<1/5"'"=%&'%./,(')5#%BCDECC%,A3 4$),/")A$/7'/%&'%/&-)$0',#5")%-)*'&)D*'<1'&)% F*%-)*>#5"#%/""$/>#$-)%*?/&-)$0#5"#%(#$%./('**/$'"= F*%-)*'&)%/&-)$0#5"#%G%&'-"#-)%-1%15%-1(()$")%+>#"$)%)%/**1,'5')3%#% *)%-(#--)$#%G%&'%CHIJ,,%(#$%*#%6K4%/5/*'"'.L#%#%MI,,%(#$%*#%6K4% ($#(/$/"'>#

Esecuzione pratica di una TLC

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" Metodo di separazione CROMATOGRAFIA DI RIPARTIZIONE Ripartizione delle sostanze da separare tra due diverse fasi in base alla loro solubilità Fase stazionaria: liquida Fase mobile: liquida o gassosa Fase mobile Tipo di cromatografia (tecnica) A/-%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%P4 *'<1'&/./$"/H%.)*)55/H%Q:K4

Cromatografia: Processo in continuo con fase mobile in contatto con la fase stazionaria

Le concentrazioni di A nella fase mobile, [A] m, e nella fase stazionaria, [A] s, sono legate al coefficiente di ripartizione K A m/s K A m/s = [A] m /[A] s Coefficiente di ripartizione tanto maggiore quanto maggiore è l affinità del soluto A per la fase mobile [A] s = [A] m / K A m/s All equilibrio esiste una correlazione lineare tra le concentrazioni di A nelle due fasi

Il composto A si ripartisce tra le due fasi in funzione di K A m/s! La fase mobile fluisce lungo colonna trasportando la sostanza A disciolta in essa! Quando la soluzione incontra la fase stazionaria, A si ripartisce tra le due fasi fino a raggiungere l equilibrio! La fase stazionaria in cui era stato deposto A entra in contatto con la faes mibile fresca, ed anche in questo caso A si ripartisce tra le due fasi fino a raggiungere l equilibrio

! Il composto A si trova ripartito tra le due fasi in corrispondenza di una nuova posizione all interno della colonna!il processo si ripete in continuo con il risultato che A cammina attraverso la colonna trasportato dalla fase mobile Il numero di volte che A si ripartisce tra le due fasi viene definito piatto teorico La velocità con cui A si muove attraverso la colonna dipende dalla velocità di flusso della fase mobile e dall affinità relativa di A per le due fasi, ossia dal suo coefficiente di ripartizione In questo modo si possono separare due composti A e B caratterizzati da coefficienti di ripartizione diversi

P9N4OR;96RPO9SF9%+P43 T5/%&#**#%"#.5'.L#%('U%1"'*'@@/"#%(#$%*/%-#(/$/@')5#%#%*?/5/*'-'%&'%-)-"/5@#%)$A/5'.L#.L#%()--)5)%#--#$#%>/()$'@@/"#%-#5@/%&#.),()-'@')5# F5%A/-.$),/")A$/7'/%-'%1"'*'@@/%.),#%7/-#%,)0'*#%15%A/-%#%*/%7/-#%7'--/%(1V%#--#$#W #N)*'&'%.)5%($)($'#"=%/&-)$0#5"'%+.$),/")A$/7'/%A/-D-)*'&)%)%&'%/&-)$0',#5")%P43 #K'<1'&'%5)5D>)*/"'*'%+.$),/")A$/7'/%A/-D*'<1'&)%)%&'%$'(/$"'@')5#%PK43 PK4%G%*/%('U%1-/"/%'5%.L','./%)$A/5'./ K A m/s = [A] m /[A] s = [A] gas / [A] liquido 8)>#%X9Y A/- #%X9Y *'<1'&) -)5)%*#%.)5.#5"$/@')5'%&'%9%5#**/%7/-#%,)0'*#%#% 5#**/%7/-#%-"/@')5/$'/2%K/%.)5.#5"$/@')5#%5#**/%7/-#%-"/@')5/$'/%*'<1'&/% &'(#5&#%&/**/%-)*10'*'"=%&'%9%5#**/%7/-#%*'<1'&/%,#5"$#%*/%.)5.#5"$/@')5#% 5#**/%7/-#%,)0'*#%&'(#5&#%&/**/%>)*/"'*'"=%&'%9%.L#%&'(#5&#%&/**/%"#,(#$/"1$/%/**/%<1/*# />>'#5#%*/%-#(/$/@')5#%#%<1'5&'%*?/5/*'-'%PK4%

N"$1,#5"'%(#$%*#%/5/*'-'%P4%#%PK4 Gascromatografi

Componenti di un gascromatografo #F5'#"")$# #P/-%&'%"$/-()$")%+7/-#%,)0'*#3 #4)*)55/%+"'()%#%.)5%&'>#$-#%7/-'%-"/@')5/$'#3 #S)$5) #O'>#*/")$#% Vaporizzazione Iniettore Separazione Gas, colonna, forno Rilevazione (analisi) Rivelatore

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gascromatografia di adsorbimento 4)*)55#%./('**/$'%&'/,#"$)%CHBDCHJ,,%*15AL#@@/%BCDBCC,H%7/-#%7'--/%(#**'.)*/%*'<1'&/ "'()%-'*'.)5'%-1%-1(()$")%-)*'&)%+"10)%&'%>#"$)%)%-'*'.#%71-/3 gascromatografia di ripartizione

Le colonne capillari sono più efficienti delle colonne impaccate perché a parità di polarità della fase fissa hanno un numero maggiore di piatti teorici Maggiore efficienza nella separazione S/-#%-"/@')5/$'/ N'%()--)5)%-.#A*'#$#%&'>#$-#%7/-'%-"/@')5/$'#%.)5%&'>#$-#%./$/""#$'-"'.L#.),#%()*/$'"=%)%./(/.'"=%/&-)$0#5"#%'5%715@')5#%&#'%.),()-"'%.L#%-'%&#>)5)%-#(/$/$# K/%()*/$'"=%&#**/%7/-#%7'--/%&)>$#00#%#--#$#%-','*#%/%<1#**/%&#'%.),()-"'%&/%-#(/$/$# N'%()--)5)%1-/$#%.)*)55#%.L#%-#(/$/5)%($'5.'(/*,#5"#%'5%715@')5#%&#*% (15")%&'%#0)**'@')5#%&#*%.),()-") ])$,/*,#5"#%5#**#%.)*)55#%./('**/$'%-'%1"'*'@@/5)%()*'-'*)--/5'% &'>#$-/,#5"#%715@')5/*'@@/"'

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Esperienza di laboratorio F&#5"'7'./@')5#%"$/,'"#%6K4%#%-#(/$/@')5#%&#'%.),()5#5"'%&'%15/%,'-.#*/% -7$1""/5&)%*#%&'>#$-#%($)($'#"=%/.'&)D0/-#%"$/,'"#%#-"$/@')5#%.)5%-)*>#5"' CO 2 H OH acido benzoico 2-naftolo naftalene