Instrumentation Laboratory soddisfa oggi i bisogni di domani.

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1 Catalogo Emostasi

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3 La rilevazione del tempo di coagulazione è un elemento fondamentale all interno del percorso diagnostico delle patologie dell emostasi, del monitoraggio della terapia anticoagulante orale e del rischio operatorio. Instrumentation Laboratory è stata la prima azienda ad automatizzare queste analisi, dai test di routine a quelli specialistici anche di maggiore complessità. La nostra tecnologia brevettata ha consentito lo sviluppo di un sistema che, oltre ad essere eccezionalmente accurato, è semplice da usarsi ed affidabile. Il coagulometro ACL sin dalla sua introduzione ha ridefinito gli standard di precisione e ha semplificato lo studio dell emostasi. Oggi i coagulometri della Famiglia ACL TOP permettono la determinazione dei parametri della coagulazione e della fibrinolisi con metodi coagulativi, cromogenici ed immunologici: una tecnologia ad alti livelli alla portata di tutti. L ampia gamma di reagenti risponde alle necessità di qualsiasi laboratorista: da chi esegue solo i test di routine a chi esegue sofisticati test specialistici. Instrumentation Laboratory ha la risposta ad ogni domanda. Instrumentation Laboratory segue attentamente l evoluzione delle tecnologie e comprende la necessità di rendere alla portata di tutti anche le analisi più critiche. Il sistema portatile microinr consente il controllo della terapia anticoagulante orale (TAO) con una operatività semplice e sicura; il nuovissimo ACL AcuStar porta nel Laboratorio di Emostasi la tecnologia della chemiluminescenza per eseguire in completa automazione test ad alta specializzazione con una sensibilità superiore ad ogni altro metodo oggi in uso; Anthema rappresenta la soluzione per la gestione della TAO, abbinando la praticità del web alla solidità dell algoritmo PARMA. L attenzione delle persone, la qualità dei servizi, essere accanto quotidianamente a chi lavora in Laboratorio, il miglioramento continuo della qualità con obiettivi di efficacia ed efficienza, in due parole: Avere Cura. Instrumentation Laboratory soddisfa oggi i bisogni di domani.

4 LOTTO UNICO REGIONALE - LA GARANZIA DI FORNIRVI SEMPRE IL MEGLIO Lotto unico regionale Da alcuni anni Instrumentation Laboratory ha attivato un importante servizio che ha l obiettivo di rispondere ad una precisa richiesta degli utilizzatori: poter utilizzare un lotto di reagente o di controllo o di altro materiale per il più lungo tempo possibile. I motivi di questa richiesta sono evidenti agli occhi di tutti. Molti parametri dell emostasi devono essere calibrati e la calibrazione deve essere eseguita ad ogni cambiamento di lotto: avere un lotto che duri a lungo riduce la frequenza delle calibrazioni. È buona norma che i Laboratori verifichino, ad ogni cambio di lotto, gli intervalli di normalità di tutti i parametri dell emostasi: avere un lotto che duri a lungo riduce il numero degli interventi sugli intervalli di normalità. Queste sono solo due delle attività che comportano un uso di tempo e di risorse che potrebbero essere utilizzate in altro modo. Instrumentation Laboratory garantisce che dal momento in cui la prima confezione di un lotto entra nel canale distributivo fino a quando l ultima confezione dello stesso lotto lascia il Centro di Distribuzione di Cavenago Brianza non saranno trascorsi meno di dodici mesi. Questo servizio tutela tutti gli utilizzatori dei sistemi IL: sia chi ha elevati carichi di lavoro sia chi esegue solo pochi esami al giorno. A testimonianza dei continui sforzi profusi e a garanzia di tutti gli utilizzatori, Instrumentation Laboratory rende disponibile periodicamente una tabella che riporta - per tutti materiali gestiti a lotto unico - il residuo periodo di distribuzione del lotto attualmente in uso. Vantaggi Riduzione del numero di calibrazioni Riduzione degli sprechi di materiale Meno variabili per il programma di controllo di qualità Risparmio di tempo per il personale del Laboratorio Ottimizzazione delle risorse del Laboratorio Servizio certificato È un servizio integrato per la diagnostica in vitro fornito in conformità alla norma UNI EN ISO 9001:2008 Certificato N SISTEMA DI GESTIONE QUALITÀ CERTIFICATO REAGENTI EMOSTASI: SITUAZIONE PRODOTTI GESTITI A LOTTO Cod. Prodotto Descrizione Cod. Lotto Anno 1 Anno 2 Nominale Reagenti PT PT-HS PLUS GIOVANNI RPT 2G 20 ml MATTEO RPT 2G 8 ml LUCA Reagenti APTT APTT-SP SPATTY SynthAsIL LISA Altri Test Routine Fib-Clauss CLAUDIO Fib-Clauss XL CLAUDIONE AT Liquida LIQUIDA AT Liquida LIQUIDINA AT Liquida XL LIQUIDONA Antitrombina MARK D-Dimero DIMERO D-Dimer HS DUDU Test Speciali Protein C KIWI Protein S Free LIBERA APC-R V UMEA Factor VIII EIGHT Factor IX NINE Omocisteina MACISTE SCT SIMONETTA Cal & Controls Cal.Plasma CALICE Cont. Low Abn ROBIN Cont. High Abn HOOD Cont. Normal SHERWOOD Controlli D-D DICO CQ Livello 1 SUPER CQ Livello 2 DUPER Esempio di distribuzione regionale. Le barre colorate rappresentano il periodo di distribuzione di ciascun lotto 2

5 Test di Routine RecombiPlasTin 2G PT-Fibrinogeno HS Plus APTT-SP APTT SynthAsIL APTT SynthAFax Fibrinogeno Clauss - Fibrinogeno Clauss XL Q.F.A. Thrombin (Bovine) 2 ml 5 ml Plasma di Controllo Fibrinogeno (livello basso) Tempo di Trombina Antitrombina Liquida D-Dimer D-Dimer HS Controlli per D-Dimero Trombofilia Proteina C ProClot Proteina S Libera Protein S Activity Factor V Leiden (APC Resistance V) COATEST APC Resistance COATEST APC Resistance Control Plasma Level 1 e Level Omocisteina Controlli per Omocisteina ThromboPath Fibrinolisi Plasminogeno Inibitore della Plasmina Diagnostica APS drvvt Screen e drvvt Confirm Silica Clotting Time LA Negative Control e LA Positive Control Quanta Lite ACA Screen III Quanta Lite ACA IgG - IgM - IgA Quanta Lite β2gpi Screening Quanta Lite β2gpi IgG - IgM - IgA HIT ed Eparina HIT - Ab(PF4-H) Controlli per HIT - Ab(PF4-H) Liquid Anti-Xa Calibratori per Eparina Liquida Controlli per Eparina a basso peso molecolare (LMWH) Controlli per Eparina non frazionata (UFH) Diagnostica Fattore von Willebrand von Willebrand Factor Antigene von Willebrand Factor Attività von Willebrand Factor Attività Cofattore Ristocetinico Fattori Coagulazione Plasma Carente di Fattore II - V - VII e X Plasma Carente di Fattore VIII - IX - XI e XII Fattore VII COATEST Fattore VIII COAMATIC Fattore XIII Antigene Calibranti e Controlli Plasma Calibrante Plasma di Controllo Normale Plasma di Controllo Anormale Basso Plasma di Controllo Anormale Alto Plasma di Controllo Special Test Plasma di Controllo Special Test QCP WEB e Valutazione Esterna Qualità QCP Web Plasma Coagulation Control Level I Plasma Coagulation Control Level II Coagulation Proficiency InterLab Valutazione Esterna di Qualità TAO Soluzioni Diluente Fattori Diluente ProClot Emulsione di Riferimento Wash-R Soluzioni di Lavaggio (Rinse Solution) Soluzione Detergente (Clean A) Soluzione Detergente (Clean B) Strumenti Famiglia ACL TOP ACL ELITE PRO ACL AcuStar ACL AcuStar: Reagenti, Controlli e Consumabili GeneXpert Xpert HemosIL FII/FV e Controlli Terapia Anticoagulante Orale PARMA Anthema microinr Avere Cura Servizi Certificazione L esperto risponde

6 TEST DI ROUTINE RecombiPlasTin 2G Utilizzo: Tromboplastina ad elevata sensibilità contenente RTF umano per la determinazione del PT e del fibrinogeno (con metodo PT-derivato). Il reagente è utilizzabile anche per la valutazione dei fattori della via estrinseca della coagulazione e per il monitoraggio della TAO. RecombiPlasTin 2G è un prodotto di seconda generazione e sostituisce il kit RecombiPlasTin. Principio: Il reagente tromboplastina è una preparazione liposomica che contiene fattore tissutale ricombinante umano rilipidato in una miscela sintetica di fosfolipidi. Tromboplastina (RTF): 5 x 8 ml, liofilizzato Tampone: 5 x 8 ml, liquido Tromboplastina (RTF): 5 x 20 ml, liofilizzato Tampone: 5 x 20 ml, liquido Volume Luca 8 ml Matteo 20 ml Fattore tissutale umano e tecnologia ricombinante ISI vicino a 1.00 Il valore di ISI di ogni lotto è titolato e certificato da tre Laboratori CISMEL seguendo i protocolli OMS Ideale per il monitoraggio della TAO Alta sensibilità alla carenza dei fattori della via estrinseca Insensibile fino a 1.0 U/mL di eparina Uniformità tra lotti PT-Fibrinogeno HS Plus Utilizzo: Tromboplastina di estrazione per la determinazione del PT e del fibrinogeno (con metodo PT-derivato). Il reagente è utilizzabile anche per la valutazione dei fattori della via estrinseca della coagulazione e per il monitoraggio della TAO. Principio: Il reagente PT-Fibrinogen HS Plus contiene tromboplastina calcica estratta da cervello di coniglio ad elevata sensibilità con una miscela di fosfolipidi. Tromboplastina: 5 x 8,5 ml, liofilizzato Tampone: 5 x 8,5 ml, liquido Giovanni Tromboplastina calcica estratta da cervello di coniglio ISI vicino a 1.10 Per ogni lotto ISI titolata e certificata da tre Laboratori CISMEL seguendo i protocolli OMS Ideale per il monitoraggio della TAO Buona sensibilità alla carenze dei fattori della via estrinseca Insensibile fino a 0.5 U/mL di eparina 4

7 APTT-SP Utilizzo: APTT-SP è un reagente da utilizzare per la determinazione in vitro del test APTT nel plasma umano, per la valutazione della via intrinseca coagulativa e per il monitoraggio dei pazienti in terapia eparinica non frazionata. Studi dedicati hanno dimostrato la sensibilità dell APTT-SP alla diminuzione di concentrazione di fattori della via intrinseca in campioni con APTT patologico, quando i livelli dei fattori VIII, IX, XI e XII sono nell intervallo 30-60%. Il reagente ha una buona sensibilità all eparina ed è estremamente sensibile alla presenza di LAC. Principio: Il reagente APTT contenuto nel kit APTT-SP contiene fosfolipidi sintetici e silice micronizzata come attivatore che assicurano una elevata riproducibilità e stabilità del prodotto. APTT reagente: 5 x 9 ml, liquido Cloruro di Calcio: 5 x 8 ml, liquido Spatty Tecnologia con fosfolipidi sintetici Silice micronizzata come attivatore Buona sensibilità alla carenza di fattori della via intrinseca Eccellente sensibilità all eparina Estremamente sensibile alla presenza LAC Forma liquida: pronta all uso APTT SynthAsIL Utilizzo: SynthAsIL è un reagente di elevato standard qualitativo contenente fosfolipidi sintetici per la determinazione in vitro del test APTT nel plasma umano, per la valutazione della via intrinseca coagulativa e per il monitoraggio dei pazienti in terapia eparinica non frazionata. Il reagente è sensibile alla diminuzione della concentrazione dei fattori della coagulazione della fase di contatto, di quelli della via intrinseca e comune, agli effetti anticoagulanti dell eparina e alla presenza di inibitori in particolare di LAC. Principio: Il reagente APTT contenuto nel kit SynthAsIL è un prodotto liquido tamponato che contiene fosfolipidi sintetici come sostituto piastrinico e una silice colloidale a ridotta sedimentazione per un ottimale attivazione della fase di contatto della coagulazione. APTT reagente: 5 x 10 ml, liquido Cloruro di Calcio: 5 x 10 ml, liquido Lisa Tecnologia con fosfolipidi sintetici Silice micronizzata come attivatore Sensibilità all attivazione della fase di contatto Eccellente sensibilità all eparina Buona sensibilità alla presenza di LAC Forma liquida: pronta all uso APTT SynthAFax Utilizzo: SynthAFax è un reagente di elevato standard qualitativo contenente fosfolipidi sintetici per la determinazione in vitro del test APTT nel plasma umano, per la valutazione della via intrinseca coagulativa e per il monitoraggio dei pazienti in terapia eparinica non frazionata. Il reattivo SynthAFax è sensibile alla diminuzione della concentrazione dei fattori della coagulazione della fase di contatto, di quelli delle vie intrinseca e comune e agli effetti anticoagulanti dell eparina non frazionata. Principio: Il reagente APTT contenuto nel kit SynthAFax è un prodotto liquido tamponato che contiene fosfolipidi sintetici come sostituto piastrinico e un attivatore plasmatico solubile, l acido ellagico, per un ottimale attivazione della fase di contatto della coagulazione. APTT reagente: 5 x 10 ml, liquido Cloruro di Calcio: 5 x 10 ml, liquido Matilde Tecnologia con fosfolipidi sintetici Acido ellagico come attivatore Sensibilità ai fattori VIII e IX Buona sensibilità all eparina Discreta sensibilità alla presenza di LAC Forma liquida: pronta all uso TEST DI ROUTINE 5

8 TEST DI ROUTINE Fibrinogeno Clauss Fibrinogeno Clauss XL Utilizzo: Trombina bovina purificata (35 UNIH/ml) per la determinazione quantitativa del fibrinogeno secondo il metodo Clauss nel plasma umano. Il fibrinogeno è un utile indicatore per la valutazione di diverse patologie quali la DIC, le malattie epatiche, gli stati infiammatori e i tumori. Alti valori di fibrinogeno sono associati ad un incremento del rischio di malattie cardiovascolari. Principio: Un eccesso di trombina, aggiunta al plasma diluito in esame, converte il fibrinogeno in fibrina. In tali condizioni la velocità della reazione dipende direttamente dalla concentrazione di fibrinogeno del campione in esame. Trombina: 10 x 2 ml, liofilizzata Trombina: 10 x 5 ml, liofilizzata Claudio Claudione Trombina purificata Insensibile all eparina fino a 1 U/mL Ottimo range di linearità Q.F.A. Thrombin (Bovine) - 2 ml Q.F.A. Thrombin (Bovine) - 5 ml Utilizzo: Trombina bovina purificata (100 UNIH/ml) per la determinazione quantitativa del fibrinogeno secondo il metodo di Clauss nel plasma umano. Il fibrinogeno è un utile indicatore per la valutazione di diverse patologie quali la DIC, le malattie epatiche, gli stati infiammatori e i tumori. Alti valori di fibrinogeno sono associati ad un incremento del rischio di malattie cardiovascolari. Principio: Metodo per la determinazione quantitativa del fibrinogeno nel plasma utilizzando trombina che, aggiunta in eccesso al plasma diluito in esame, converte il fibrinogeno in fibrina. La velocità della reazione dipende dalla concentrazione di fibrinogeno del campione in esame. Trombina: 10 x 2 ml, liofilizzata Trombina: 10 x 5 ml, liofilizzata Sandro Sandrone Trombina purificata Origine bovina Buona stabilità Plasma di Controllo Fibrinogeno (livello basso) Utilizzo: Plasma patologico per il controllo di qualità nella determinazione del fibrinogeno. L impiego di un plasma a titolo noto è essenziale per monitorare l accuratezza e la precisione del sistema e del metodo di analisi per la determinazione del fibrinogeno. Principio: Il Plasma di controllo anormale del Fibrinogeno è preparato utilizzando plasma umano citratato ottenuto da donatori sani e modificato, attraverso un processo dedicato, per simulare un campione con livelli ridotti di fibrinogeno. I valori sono riconducibili agli Standard Internazionali forniti dal NIBSC, seguendo le raccomandazioni del OMS. Controllo Fibrinogeno: 10 x 1 ml, liofilizzato Lanci Controllo con range patologico utilizzabile nell esecuzione del test del fibrinogeno basato sul metodo PT Controllo con range patologico utilizzabile nell esecuzione del test del fibrinogeno secondo il metodo di Clauss Riconducibile agli Standard Internazionali forniti dal NIBSC 6

9 Tempo di Trombina Utilizzo: Kit per la determinazione quantitativa del tempo di trombina nel plasma umano. L analisi viene solitamente eseguita per la valutazione della DIC, per il monitoraggio della terapia eparinica e trombolitica, per il rilevamento della presenza di FDP e di anomalie del fibrinogeno ereditarie o acquisite e per il controllo della iperfibrinolisi. Principio: Il fibrinogeno presente nel plasma in esame è trasformato in fibrina e il tempo di formazione del coagulo viene misurato a partire dall aggiunta di trombina bovina purificata. Le differenti ricostituzioni della trombina permettono all operatore di ottenere i range di normalità desiderati. Con una ricostituzione dedicata, è possibile controllare la terapia eparinica. Trombina: 4 x 2, 5 o 8 ml, liofilizzata Tampone: 1 x 9 ml, liquido Titty Trombina purificata Differenti ricostituzioni in base al range di normalità desiderato Ricostituzione specifica per la terapia eparinica Antitrombina Liquida Utilizzo: Per la determinazione quantitativa della AT nel plasma umano. Il kit può essere utilizzato per escludere o diagnosticare le carenze ereditarie in pazienti con tendenza a episodi tromboembolici, in fase pre-operatoria, prima della prescrizione di contraccettivi orali, nei casi di DIC, nelle sindromi nefrotiche e nelle malattie epatiche, durante i trattamenti con eparina o concentrati di antitrombina. Principio: Il reagente è basato sull idrolisi di un substrato cromogenico sintetico e sulla inattivazione del FXa. Il metodo è quindi specifico e non è influenzato dalla presenza del cofattore eparinico II. I livelli di AT sono misurati automaticamente in due fasi: 1. Incubazione del plasma con il reattivo FXa in presenza di eparina. 2. Determinazione dell attività residua del FXa con un substrato cromogenico. La paranitroanilina rilasciata è monitorata cineticamente a 405 nm ed è inversamente proporzionale al livello di AT nel campione. FXa con eparina: 2 x 2 ml, liquido Substrato Cromogenico S-2765: 2 x 2 ml, liquido FXa con eparina: 4 x 4.5 ml, liquido Substrato Cromogenico S-2765: 4 x 4.5 ml, liquido Volume Liquidina ml Liquidona ml Kit bilanciati per ACL Classici, ACL Advance e Famiglia ACL TOP Reazione basata sul fattore Xa Reagente liquido, pronto all uso Insensibile al cofattore eparinico II Kit ottimizzati per i diversi carichi di lavoro dei Laboratori Antitrombina Liquida Utilizzo: Per la determinazione quantitativa della AT nel plasma umano. Il kit può essere utilizzato per escludere o diagnosticare le carenze ereditarie in pazienti con tendenza a episodi tromboembolici, in fase pre-operatoria, prima della prescrizione di contraccettivi orali, nei casi di DIC, nelle sindromi nefrotiche e nelle malattie epatiche, durante i trattamenti con eparina o concentrati di antitrombina. Principio: Il reagente è basato sull idrolisi di un substrato cromogenico sintetico e sulla inattivazione del FXa. Il metodo è quindi specifico e non è influenzato dalla presenza del cofattore eparinico II. I livelli di AT sono misurati automaticamente in due fasi: 1. Incubazione del plasma con il reattivo FXa in presenza di eparina. 2. Determinazione dell attività residua del FXa con un substrato cromogenico. La paranitroanilina rilasciata è monitorata cineticamente a 405 nm ed è inversamente proporzionale al livello di AT nel campione. FXa con eparina: 4 x 4 ml, liquido Substrato Cromogenico S-2765: 2 x 2 ml, liquido Volume Liquida ml Kit bilanciato per ACL 9000/10000 e ACL ELITE PRO Reazione basata sul fattore Xa Reagente liquido, pronto all uso Insensibile al cofattore eparinico II TEST DI ROUTINE Liquidina AT Liquida Liquidona AT Liquida Liquida AT Liquida ACL Classici ACL 9000/10000/Elite PRO ACL Advance Famiglia ACL TOP 7

10 TEST DI ROUTINE D-Dimer Utilizzo: Test immunologico automatico al lattice ottimizzato per la determinazione quantitativa del D-Dimero nel plasma umano citratato sui sistemi di coagulazione IL. Il kit può essere utilizzato, insieme allo score di Wells, per l esclusione della diagnosi di tromboembolismo venoso (TEV) in pazienti con sospetta trombosi venosa profonda (TVP) ed embolia polmonare (EP). Principio: Il reagente al lattice contenuto nel kit D-Dimer è una sospensione di particelle di polistirene legate a MAb altamente specifici per il dominio DD. Quando un plasma contenente DD, viene miscelato ai reattivi contenuti nel kit le particelle di lattice agglutinano. La torbidità della miscela di reazione aumenta proporzionalmente alla concentrazione di DD presente nel plasma del campione; il grado di agglutinazione è determinato misurando la diminuzione della luce trasmessa a 405 nm (aumento dell assorbanza) causata dagli aggregati. Lattice: 4 x 3 ml, liofilizzato Tampone: 4 x 9 ml, liquido Calibrante: 2 x 1 ml, liofilizzato Dimero Completamente automatizzato Risultato ottenuto in meno di 7 minuti 100% di valore negativo predittivo per VTE con cut-off a 230 ng/ml Linearità fino a 5250 ng/ml con rerun automatico D-Dimer HS Utilizzo: Test immunologico automatico al lattice ottimizzato per la determinazione quantitativa del D-Dimero nel plasma umano citratato sulla Famiglia ACL TOP. Il kit può essere utilizzato, insieme allo score di Wells, per l esclusione della diagnosi di tromboembolismo venoso (TEV) in pazienti con sospetta trombosi venosa profonda (TVP) ed embolia polmonare (EP). Principio: Il reagente al lattice contenuto nel kit D-Dimero HS è una sospensione di particelle di polistirene di grandezza uniforme legate al frammento F(ab )2 di Mab altamente specifici per il dominio del DD contenuto nei derivati solubili della fibrina. L uso del frammento F(ab )2 consente di determinare il DD in modo più specifico eliminando l interferenza di alcuni fattori endogeni come il fattore reumatoide. Quando un plasma contenente DD viene miscelato ai reattivi contenuti nel kit le particelle di lattice agglutinano. La torbidità della miscela di reazione aumenta proporzionalmente alla concentrazione di DD presente nel plasma del campione; il grado di agglutinazione è determinato misurando la diminuzione della luce trasmessa a 671 nm (aumento dell assorbanza) causata dagli aggregati. Lattice: 3 x 2 ml, liofilizzato Tampone: 3 x 8 ml, liquido Calibrante: 2 x 1 ml, liofilizzato Dudu Altamente sensibile, completamente automatizzato Risultato ottenuto in meno di 5 minuti 100% di valore negativo predittivo per VTE con cut-off a 230 ng/ml su analizzatori Famiglia ACL TOP Linearità fino a ng/ml con rerun automatico Controlli per D-Dimero Utilizzo: Per il controllo di qualità del test D-Dimero (DD). Nella confezione sono presenti controlli di qualità a due livelli: il Controllo a Livello Basso per la stima della precisione e dell accuratezza del test a livelli di DD al limite del valore soglia e il Controllo a Livello Alto per la stima della precisione e dell accuratezza del test a livelli di DD patologici. Per un programma di controllo di qualità completo si raccomanda l uso di entrambi i controlli. I controlli sono utilizzati anche per il programma di controllo qualità intra e inter-laboratorio (QCP web). Principio: I Controlli per il DD sono preparati attraverso un processo dedicato e contengono concentrazioni diverse di DD parzialmente purificato, ottenuto dalla digestione, da parte della plasmina, di fibrina umana stabilizzata dal fattore XIII attivato con legami crociati. Controllo Livello Basso: 5 x 1 ml, liofilizzato Controllo Livello Alto: 5 x 1 ml, liofilizzato Dico In un unico kit controlli con range a livello soglia e patologico Utilizzati anche per il QCP web 8

11 TROMBOFILIA Proteina C Utilizzo: Per la determinazione quantitativa della PC nel plasma umano. L attivazione della PC in vivo è svolta dalla trombina in presenza di trombomodulina. L attivazione della PC in vitro può essere svolta da una frazione proteica ottenuta dal veleno del serpente Agkistrodon contortrix contortrix (Protac ). La carenza congenita di PC è spesso associata a fenomeni di trombosi venose ricorrenti ed embolia polmonare, specialmente in soggetti giovani. Carenze acquisite di PC sono associate a disordini epatici (epatite, cirrosi, ecc.), terapia anticoagulante orale e DIC. Principio: Il reagente si basa sull idrolisi di un substrato cromogenico sintetico da parte della APC presente nel campione; l attivazione della PC endogena avviene utilizzando un attivatore specifico. La paranitroanilina rilasciata è monitorata cineticamente a 405 nm ed è direttamente proporzionale al livello di PC presente nel campione. Attivatore PC: 2 x 2.5 ml, liofilizzato Substrato Cromogenico S-2366: 2 x 2.5 ml, liofilizzato Diluente: 1 x 8 ml, liquido ProClot Utilizzo: Kit per la determinazione automatica della PC funzionale con metodo coagulativo nel plasma umano. Principio: Il kit ProClot è utilizzato per la determinazione funzionale della PC coagulativa, mediate il test APTT in presenza di APC. L attivazione in vitro diretta e specifica della PC nei campioni di plasma è svolta da una glicoproteina estratta dal veleno del serpente Agkistrodon contortrix contortrix (Protac ), che permette di effettuare l intero processo di attivazione in pochi minuti. L effetto anticoagulante è proporzionale all allungamento del tempo di coagulazione. L utilizzo del test APTT per misurare l effetto anticoagulante della APC è indicato per la sua sensibilità ai fattori V e VIII. Il test ProClot è insensibile all eparina fina a 2 U/mL. Attivatore PC: 4 x 1,5 ml, liofilizzato Plasma carente PC: 4 x 1 ml, liofilizzato Plasma di controllo PC: 2 x 1 ml, liofilizzato Guava Proteina S Libera Utilizzo: Test immunologico al lattice per la determinazione quantitativa della Proteina S libera nel plasma umano. La PS è il cofattore necessario all azione anticoagulante e profibrinolitica della proteina C attivata. La PS circola nel plasma in due forme: PS libera (40%) e PS legata (60%) al C4bBP (frammento C4b del Complemento). Le due forme sono in equilibrio dinamico ma solo la PS libera è funzionalmente attiva. Principio: Il kit Proteina S Libera determina la PS libera misurando l incremento di torbidità prodotta dalla agglutinazione di due reagenti al lattice. Il C4bBP purificato è adsorbito al primo reagente e si lega con elevata affinità alla PS libera del campione in esame; la PS adsorbita al lattice C4bBP si lega al secondo reagente coniugato con un anticorpo monoclonale diretto contro la PS umana dando l avvio alla reazione di agglutinazione. Il grado di agglutinazione è direttamente proporzionale alla concentrazione di PS libera presente nel campione. Tampone C4BP: 3 x 4 ml, liquido Lattice C4BP: 3 x 4 ml, liofilizzato Lattice Anti PS MAb: 3 x 2 ml, liofilizzato TROMBOFILIA Kiwi Ottima stabilità dei reagenti Estesa linearità Test funzionale con metodo coagulativo Test specifico per l investigazione della trombofilia È possibile utilizzare il medesimo reagente HemosIL APTT usato in routine Libera Test immunologico-turbidimetrico con affinità ad un Ab policlonale e specificità ad un MAb Completamente automatizzato Metodo basato sul legame della PS libera con il C4bBP Elevata specificità per la PS libera Nessuna interferenza dalla mutazione FV Leiden Eccellente correlazione con metodi ELISA Eccellente stabilità della calibrazione 9

12 TROMBOFILIA Protein S Activity Utilizzo: Test coagulativo funzionale per la determinazione quantitativa della Proteina S libera nel plasma umano. Principio: Il kit HemosIL Protein S Activity determina l attività funzionale della PS libera eseguendo un tempo di protrombina (PT) modificato in presenza di fattore tissutale umano ricombinante, fosfolipidi sintetici, ioni calcio e Proteina C attivata. L attività della Proteina S è proporzionale all allungamento del tempo di coagulazione del plasma carente di Proteina S a cui è stato addizionato il plasma diluito del campione in esame. Reagente PS: 3 x 2 ml, liofilizzato Reagente Calcio: 3 x 6 ml liquido Plasma Carente PS: 3 x 2 ml, liofilizzato Sissi Test funzionale con metodo coagulativo Reagente con fattore tissutale ricombinante umano e fosfolipidi sintetici Ridotta al minimo la variabilità lotto-lotto Aumentata stabilità a bordo Test completamente automatizzato Factor V Leiden (APC Resistance V) Utilizzo: Il kit Factor V Leiden (APC Resistance V) è da utilizzare per la determinazione della resistenza alla APC causata dalla mutazione del fattore V:Q506 (FV Leiden). Per una corretta strategia diagnostica della APCR si dovrebbe eseguire sia il test Factor V Leiden (APC Resistance V) per la ricerca della mutazione Leiden sia il test COATEST APC Resistance per non perdere le resistenze acquisite. Principio: Il test è basato sulla misura del tempo di coagulazione dell APTT con e senza APC sul campione di plasma diluito con plasma carente di FV. Il metodo con diluizione del plasma campione in plasma carente di FV è altamente specifico per la mutazione Leiden. Reagente APTT : 2 x 4 ml, liquido Fattore V Plasma Reagente: 2 x 4 ml, liofilizzato APC/CaCl 2 : 2 x 2 ml, liofilizzato CaCa 2 : 2 x 2 ml, liquido APC Plasma di Controllo livello 1: 2 x 1 ml, liofilizzato APC Plasma di Controllo livello 2: 2 x 1 ml, liofilizzato Umea Alta specificità per la determinazione della APCR Alta sensibilità per la mutazione FV:Q506 I risultati non sono influenzati dalla TAO I risultati non sono influenzati dalla presenza di eparina nel campione (fino a 1 U/ml) Su analizzatori ACL serie 100 e 1000 o per maggiori diluizioni del campione utilizzare il reagente Factor V Reagent Plasma (for APCR V) codice Manita (5 x 4 ml) COATEST APC Resistance Utilizzo: Per misurare la risposta anticoagulante alla Proteina C Attivata (APC) in plasma umano in soggetti con disturbi tromboembolici sospetti o confermati. Il test consente di scoprire le resistenze alla APC non dovute alla mutazione Leiden, resistenze globalmente dette acquisite (pillola anticoncezionale, aumento di FVIII e FII, possibili altre mutazioni non ancora scoperte). Per una corretta strategia diagnostica della APCR si dovrebbe eseguire sia il test Factor V Leiden (APC Resistance V) per la ricerca della mutazione Leiden sia il test COATEST APC Resistance per non perdere le resistenze acquisite. Principio: COATEST APC Resistance è basato sulla misura del tempo di coagulazione dell APTT con e senza APC sul campione di plasma indiluito (test descritto da Dahlback). Il prolungamento del tempo basale di APTT dopo aggiunta di APC è più breve nel plasma di soggetti con fenotipo APC-resistente che in quello di soggetti con risposta normale. Reagente APTT: 1 x 16 ml, liquido APC/CaCl 2 : 4 x 2 ml, liofilizzato CaCa 2 : 1 x 8 ml, liquido Armando Alta specificità per la determinazione della APCR Per identificare le resistenze acquisite 10

13 COATEST APC Resistance Control Plasma Level 1 e 2 Utilizzo: Plasma umano per il controllo della qualità della Resistenza alla Proteina C attivata causata dalla mutazione del fattore V:Q506 (Fattore V Leiden). Il livello 1 è da utilizzare per il controllo di qualità nell intervallo normale mentre il livello 2 per l intervallo patologico. Principio: Il Plasma di controllo livello 1 è preparato utilizzando plasma umano citratato ottenuto da donatori sani, il livello 2 è preparato utilizzando plasma umano citratato ottenuto da donatori con difetto per la mutazione V:Q506. I valori indicati sono stati determinati con analisi multiple su coagulometri ACL utilizzando uno specifico lotto di reagente. Poiché per il test APCR-V non è disponibile uno Standard Internazionale, i valori sono stati assegnati contro uno Standard di Riferimento Interno, proveniente da un pool di plasmi normali congelati. Control Plasma Level 1: 5 x 1 ml, liofilizzato Control Plasma Level 2: 5 x 1 ml, liofilizzato Kit Lungo Level Corto Level 2 Controlli per la mutazione del fattore V:Q506 (Fattore V Leiden) Il controllo patologico deriva da un pool di plasmi di donatori selezionati Omocisteina Utilizzo: Test immunologico automatico per la determinazione quantitativa della L-omocisteina (Hcy) totale nel plasma umano citratato. L Hcy è un aminoacido solforato derivante dalla demetilazione intracellulare della Metionina (Met). La presenza di Hcy è tossica per i tessuti: un deposito di Hcy sulla parete vasale risulta lesivo sia per lo stimolo diretto sull'endotelio e sulla parete vasale sia per la sua interferenza sui fattori della coagulazione, sulle lipoproteine e sulle piastrine. Per questo motivo i livelli intracellulari di Hcy devo essere mantenuti entro uno stretto range. Principio: I livelli di Hcy nei campioni sono misurati automaticamente in tre fasi: 1. Riduzione dell omocisteina plasmatica a Hcy libera. 2. Conversione enzimatica della Hcy libera in SAH a opera dell SAHH in presenza di un eccesso di adenosina. 3. Reazione di agglutinazione competitiva tra anticorpi anti-sah e SAH coniugata. Il grado di agglutinazione è inversamente proporzionale alla concentrazione di Hcy. Tampone: 2 x 9 ml, liquido Agente Riducente: 2 x 2 ml, liquido Enzima: 2 x 2 ml, liquido Coniugato: 2 x 2,5 ml, liquido a-sah Reagente Lattice: 2 x 2 ml, liofilizzato Calibratore: 2 x 1 ml, liquido Maciste Controlli per Omocisteina Utilizzo: Per il controllo di qualità del test per la determinazione dell L-omocisteina totale (thcy). Il kit contiene due differenti controlli per la thcy, il Livello 1 e il Livello 2 e sono preparati da una soluzione concentrata, per mezzo di un processo dedicato e contengono quantità diverse di L-omocisteina (Hcy). Il Controllo per Omocisteina Livello 1 è utilizzabile per stimare la precisione e l accuratezza del test a livelli di omocisteina al limite del valore soglia. Il Controllo per Omocisteina Livello 2, invece, è essenziale per valutare la precisione e l accuratezza del test a livelli di omocisteina patologici. Principio: I valori indicati sono stati assegnati eseguendo repliche successive sui sistemi di coagulazione IL con l impiego di un lotto specifico di reagente rispetto a un Calibrante Standard di Hcy interno (aziendale). Poiché non è attualmente disponibile uno Standard Internazionale per l Hcy, il Calibrante Standard di Hcy interno è stato preparato diluendo con un tampone dedicato una soluzione concentrata di S-adenosil-L-omocisteina (SAH) in tampone fosfato. Controllo Livello 1: 3 x 1 ml, liofilizzato Controllo Livello 2: 3 x 1 ml, liofilizzato Kocis In un unico kit controlli con range a livello soglia e patologico TROMBOFILIA Il primo test immunoturbidimetrico completamente automatizzato per i Laboratori di emostasi Test validato con anticoagulante sodio citrato Consolidata e ben dimostrata tecnologia Linearità fino a 60 mmol/l 11

14 TROMBOFILIA ThromboPath Utilizzo: ThromboPath (ThP) è un test cromogenico automatico per la valutazione funzionale del sistema anticoagulante della PC nel plasma umano. Questo test può essere utilizzato, nello studio del paziente trombofilico, come ausilio nella diagnosi di difetti quali, le carenze di PC e di PS, la mutazione APCR-V e la presenza di LA. L azione anticoagulante mediata dal sistema della PC è uno dei più importanti meccanismi di regolazione della coagulazione. Il kit ThP indaga le possibili disfunzioni del sistema anticoagulante della PC misurando la generazione di trombina endogena ed esprimendola come PiCi%. Principio: Nel dosaggio, il campione di plasma viene diluito con Diluente ThP e suddiviso in due aliquote: un aliquota viene incubata con Attivatore ThP A (contenente Protac), l altra viene incubata con Attivatore ThP B (senza Protac). La generazione di trombina si ottiene, in entrambe le aliquote, con l aggiunta di Tromboplastina ThP. L attività della trombina è determinata misurando l incremento di DO a 405 nm dopo l aggiunta di Substrato Cromogenico ThP, con relazione di proporzionalità diretta. ThP Diluente: 2 x 10 ml, liquido ThP Substrato cromogenico S-2796: 1 x 8 ml, liofilizzato ThP Tromboplastina: 2 x 4 ml, liofilizzato ThP Attivatore A: 1 x 5 ml, liofilizzato ThP Attivatore B: 1 x 5 ml, liofilizzato Plasma di Controllo Basso: 2 x 1 ml, liofilizzato Mimmo Semplice da utilizzare, metodo cromogenico Cut-off stabilito per aiutare nella differenziazione fra valori normali e patologici Controllo di Qualità patologico compreso nel kit 12

15 FIBRINOLISI Plasminogeno Utilizzo: Kit con substrato cromogenico per la determinazione quantitativa del Plg nel plasma umano. Il Plg è il primo elemento nel processo fibrinolitico: una volta attivato in plasmina, è in grado di digerire diverse proteine, incluse fibrina, fibrinogeno, fattore V e fattore VII. Principio: Il kit Plasminogeno è basato su un substrato cromogenico sintetico. I livelli di Plg nei campioni in esame sono misurati automaticamente in due fasi: 1. Il Plg presente nel campione di plasma è complessato dalla reazione con un eccesso di SK e in presenza di fibrinogeno. 2. L attività del complesso [Plg SK/FIB] è determinata in funzione dell idrolisi del substrato cromogenico S Il colore sviluppato è monitorato cineticamente a 405 nm ed è direttamente proporzionale al livello di Plg del campione. Reagente SK: 2 x 2,5 ml, liofilizzato Substrato Cromogenico S-2403: 2 x 2 ml, di liofilizzato Jerry Ottima stabilità dei reagenti Estesa linearità Inibitore della Plasmina Utilizzo: Kit con substrato cromogenico per la determinazione quantitativa del PI nel plasma umano. Il PI è un importante e rapido regolatore del sistema fibrinolitico. Carenza congenite di questo inibitore sono comunemente associate a disturbi emorragici. Il PI lega la plasmina in modo irreversibile e ne inibisce rapidamente la funzione. Per questo motivo è molto difficile dimostrare la presenza di plasmina circolante con test funzionali. Principio: Il kit è basato sull idrolisi di un substrato cromogenico sintetico e sull inattivazione della plasmina. I livelli di PI sono misurati automaticamente in due fasi: 1. Incubazione del plasma con il reattivo Plasmina (in eccesso) in presenza di metilamina. 2. Determinazione dell attività residua della Plasmina con un substrato cromogenico. La paranitroanilina rilasciata è monitorata cineticamente a 405 nm ed è inversamente proporzionale al livello di PI nel campione. Reagente Plasmina: 2 x 2,5 ml, liofilizzato Substrato Cromogenico S-2403: 1 x 4 ml, liofilizzato Tampone: 2 x 9 ml, liquido Tom Accurata analisi in grado di individuare la deficienza omozigote dell inibitore della plasmina Minimizzata la reazione crociata con l α2-macroglobulina FIBRINOLISI 13

16 DIAGNOSTICA APS drvvt Screen e drvvt Confirm Utilizzo: Reagenti con veleno di vipera di Russell diluito (DRVVT) per la ricerca dell anticorpo antifosfolipide Lupus Anticoagulant (test di screening e test di conferma) nel plasma umano citratato. Principio: Il veleno di vipera Russell, in presenza di ioni calcio, attiva direttamente il FX nei campioni in esame perciò il test non è influenzato dalla riduzione dei fattori della fase di contatto, dalla carenza di FVII, FVIII e FIX o dalla presenza di inibitori. Il reagente drvvt Screen contiene una quantità ridotta di fosfolipidi e ciò lo rende particolarmente sensibile alla presenza di LA. L aggiunta di fosfolipidi (a doppio strato) nel drvvt Confirm neutralizza il LA ottenendo tempi di coagulazione accorciati. L interferenza da Eparina fino a 1 U/ml è neutralizzata dal polibrene. drvvt Screen: 10 x 2 ml, liofilizzato drvvt Confirm: 10 x 1 ml, liofilizzato Test Ulisse drvvt Screen Penelope drvvt Confirm Test semplice e standardizzato per la ricerca del LA Resistente all eparina fino a 1.0 U/mL L uso dei due test permette una indagine sicura della presenza del LA Silica Clotting Time Utilizzo: Il reagente Silica Clotting Time (SCT) è da utilizzare per la ricerca del LA nel plasma. Il kit è costituito da un test di screening (SCT Screen) e da un test di conferma (SCT Confirm) con reagenti sensibili agli anticorpi antifosfolipidi. I reagenti SCT Screen e SCT Confirm non subiscono interferenze causate da carenze di FVII o dalla presenza di inibitori. L interferenza da Eparina fino a 0.4 U/mL è neutralizzata dal polibrene. Principio: I reagenti, in presenza di ioni calcio, attivano direttamente la via intrinseca della coagulazione. Il reagente SCT Screen contiene una quantità ridotta fosfolipidi rendendolo particolarmente sensibile alla presenza di LA; viceversa, la quantità di fosfolipidi aggiunta nel reagente SCT Confirm neutralizza l eventuale presenza di LA e accorcia i tempi di coagulazione. SCT Screen: 3 x 5 ml, liquido SCT Confirm: 3 x 5 ml, liquido SCT CaCl 2 : 3 x 10 ml, liquido Simonetta Reagenti per il test di screening e di conferma nello stesso kit Formulazione liquida, pronta all uso Completamente automatizzato Utilizzabile per i test di miscela Adatto anche per campioni di pazienti in TAO LA Negative Control LA Positive Control Utilizzo: Plasma umano per il Controllo di Qualità dei kit per la diagnosi della Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi (HemosIL drvvt Screen/dRVVT Confirm e HemosIL Silica Clotting Time). Principio: Il Controllo LA Negativo è ottenuto da un pool di plasmi umani poveri di piastrine per essere conforme e rispondente a quanto indicato nelle più recenti linee guida ISTH che raccomandano l utilizzo di un plasma povero di piastrine come controllo negativo dei test per la diagnosi di APS. Questo plasma può essere utilizzato come plasma normale per i test di miscelazione per determinare la presenza di inibitori o la carenza di fattori nei plasmi di pazienti che risultano positivi al test per la determinazione del Lupus Anticoagulant. Il Controllo LA Positivo è ottenuto a partire da plasmi umani di donatori che contengono anticorpi antifosfolipidi. La sua positività è stata confermata utilizzando tutte le metodiche descritte nelle più recenti Linee Guida ISTH. LA Negative Control: 10 x 1mL, liofilizzato LA Positive Control: 10 x 1mL, liofilizzato Kit Gange LA Negative Mekong LA Positive Controlli specifici per il Lupus Anticoagulant Il Controllo Positivo è preparato a partire da plasmi che contengono LA 14

17 CRITERI CLINICI Trombosi vascolare Complicanze della gravidanza CRITERI DI LABORATORIO* Ricerca di Lupus Anticoagulant Ricerca di anticorpi anticardiolipina IgG/IgM Ricerca di anticorpi anti-β 2 -GPI IgG/IgM * In accordo alle Linee Guida SSC-ISTH DIAGNOSTICA APS PANNELLO HEMOSIL PER DIAGNOSI APS LUPUS ANTICOAGULANT HemosIL drvvt Screen & Confirm HemosIL Silica Clotting Time Screen & Confirm NEGATIVO NON ESEGUIRE ALTRI TEST acl IgG & IgM ACL AcuStar HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipina IgG HemosIL AcuStar Anti-Cardiolipina IgM NEGATIVO APS aß 2 GPI IgG & IgM ACL AcuStar HemosIL AcuStar Anti-ß 2 Glicoproteina-I Ig G HemosIL AcuStar Anti-ß 2 Glicoproteina-I Ig M ALMENO UN TEST POSITIVO RIPETERE LE ANALISI DOPO 12 SETTIMANE POSITIVO 15

18 DIAGNOSTICA APS Quanta Lite ACA Screen III Utilizzo: Test immunoenzimatico quantitativo per la ricerca delle IgG, IgM ed IgA dirette contro la cardiolipina nel siero umano. La presenza di anticorpi acl può essere utilizzata con i riscontri clinici e ad altri test di Laboratorio come ausilio per valutare il rischio di trombosi in pazienti affetti da SLE o altri disturbi simili al lupus. Antigene: cardiolipina purificata completa di cofattore β2gpi umana e bovina. Principio: I campioni diluiti sono distribuiti nei pozzetti rivestiti di cardiolipina consentendo agli anticorpi acl, eventualmente presenti, di legarsi all antigene adsorbito. Un lavaggio elimina l eccesso di campione non legato. Si aggiunge quindi un anticorpo anti-iggam umane marcato con un enzima e una seconda incubazione consente agli anticorpi marcati di legarsi agli anticorpi del paziente legati ai pozzetti. Un ulteriore lavaggio allontana gli anticorpi marcati in eccesso e l attività dell enzima rimasto è misurata aggiungendo un substrato cromogenico e misurando l intensità del colore sviluppato. Il test può essere valutato tramite spettrofotometro misurando e comparando l intensità di colore sviluppato nei pozzetti dei campioni con quello sviluppato dai controlli. Piastra micropozzetti adesi con cardiolipina: 96 pozzetti Controllo ACA negativo: 1 x 1.2 ml Decision Point ACA: 1 x 1.2 ml, liquido Controllo ACA III screening: 1 x 1.2 ml, liquido Diluente per campioni ACA III: 1 x 50 ml, liquido Soluzione di lavaggio PBS concentrata: 1 x 50 ml, liq. Coniugato HRP IgGAM: 1 x 10 ml, liquido Substrato cromogeno (TMB): 1 x 10 ml Soluzione d arresto HRP: 1 x 10 ml Nicola Quanta Lite ACA IgG - IgM - IgA III Utilizzo: Test immunoenzimatici per la ricerca semi-quantitativa di anticorpi cardiolipina IgG, IgM o IgA nel siero umano. La determinazione degli ACA è da utilizzarsi, con i riscontri clinici e ad altri test di Laboratorio, come ausilio per valutare il rischio di trombosi in pazienti affetti da SLE o altri disturbi simili al lupus. Antigene: cardiolipina purificata completa di cofattore β2gpi umana e bovina. Principio: I campioni diluiti sono distribuiti nei pozzetti rivestiti di cardiolipina consentendo agli ACA di legarsi all antigene adsorbito. Un lavaggio elimina l eccesso di campione non legato. Si aggiunge l anticorpo anti-igg/m/a umane marcato con un enzima, una seconda incubazione consente agli anticorpi marcati di legarsi agli anticorpi del paziente. Un nuovo lavaggio allontana gli anticorpi marcati in eccesso. L attività enzimatica è misurata aggiungendo un substrato cromogenico e misurando l intensità del colore sviluppato. La presenza di ACA si determina confrontando la densità ottica del campione con quella di una curva di calibrazione. I risultati sono riportati in modo semi-quantitativo in unità IgG/M/A standard anti-cardiolipina. iastra micropozzetti adesi con cardiolipina: 96 pozzetti Controllo ACA negativo: 1 x 1.2 ml Controllo ACA IgG/M/A III: 1 x 1.2 ml, liquido Calibratori (A E) ACA: 1 x 1.2 ml, liquido Diluente per campioni: 1 x 50 ml, liquido Soluzione di lavaggio PBS concentrata: 1 x 50 ml, liq. Coniugato HRP: 1 x 10 ml, liquido Substrato cromogeno (TMB): 1 x 10 ml Soluzione d arresto HRP: 1 x 10 ml Isotipo Pier IgG Luigi IgM Benedetta IgA 16

19 Quanta Lite β2gpi Screening Utilizzo: Test immunoenzimatico qualitativo per la ricerca delle IgG, IgM ed IgA (IgGAM) dirette contro la β2 glicoproteina I. Gli anticorpi anti-β2gpi rappresentano un aiuto nella diagnosi di alcuni disordini trombotici autoimmuni, come quelli secondari al lupus eritematoso sistemico (SLE) o altri disordini simili al lupus. Antigene: proteina β2gpi umana purificata. Principio: I campioni diluiti sono distribuiti nei pozzetti rivestiti di β2gpi consentendo agli anticorpi anti-β2gpi, eventualmente presenti, di legarsi all antigene adsorbito. Un lavaggio elimina l eccesso di campione non legato. Si aggiunge quindi un anticorpo anti-iggam umane marcato con un enzima e una seconda incubazione consente agli anticorpi marcati di legarsi agli anticorpi del paziente legati ai pozzetti. Un ulteriore lavaggio allontana gli anticorpi marcati in eccesso e l attività dell enzima rimasto è misurata aggiungendo un substrato cromogenico e misurando l intensità del colore sviluppato. Il test può essere valutato tramite spettrofotometro misurando e comparando l intensità di colore sviluppato nei pozzetti dei campioni con quello sviluppato dai controlli. Quanta Lite β2gpi IgG - IgM - IgA Utilizzo: Test immunoenzimatico semi-quantitativo per la ricerca delle IgG, IgM o IgA dirette contro la β2gpi. Gli anticorpi anti-β2gpi rappresentano un aiuto nella diagnosi di alcuni disordini trombotici autoimmuni come quelli secondari a SLE o altri disordini simili al lupus. Antigene: proteina β2gpi umana purificata. Principio: I campioni diluiti sono distribuiti nei pozzetti rivestiti di β2gpi consentendo agli anticorpi anti-β2 di legarsi all antigene adsorbito. Un lavaggio elimina l eccesso di campione non legato. È aggiunto un siero anti-igg/m/a umane marcato con un enzima: una seconda incubazione consente agli anticorpi marcati di legarsi agli anticorpi del paziente. Un nuovo lavaggio allontana l eccesso di anticorpi anti-igg/m/a. L attività enzimatica è misurata aggiungendo un substrato cromogenico e misurando l intensità del colore sviluppato.. Dopo l arresto della reazione enzimatica la presenza di anticorpi anti-β2gpi è determinata paragonando il valore di assorbanza del campione a quello di una curva di calibrazione a cinque punti. I risultati sono refertati in modo semi-quantitativo esprimendoli in unità standard di IgG/M/A anti-β2gpi. DIAGNOSTICA APS Piastra micropozzetti adesi con β2gpi: 96 pozzetti Controllo β2gpi negativo: 1 x 1.2 ml Decision Point β2gpi: 1 x 1.2 ml, liquido Controllo β2gpi screening: 1 x 1.2 ml, liquido Diluente per campioni HRP: 1 x 25 ml, liquido Soluzione di lavaggio HRP concentrata: 1 x 50 ml, liq. Coniugato HRP IgGAM: 1 x 10 ml, liquido Substrato cromogeno (TMB): 1 x 10 ml Soluzione d arresto HRP: 1 x 10 ml Vittorio Piastra micropozzetti adesi con β2gpi: 96 pozzetti Controllo β2gpi negativo: 1 x 1.2 ml Controllo β2gpi IgG/M/A: 1 x 1.2 ml, liquido Calibratori (A E) β2gpi: 1 x 1.2 ml, liquido Diluente per campioni HRP: 1 x 25 ml, liquido Soluzione di lavaggio HRP concentrata: 1 x 50 ml, liq. Coniugato HRP: 1 x 10 ml, liquido Substrato cromogeno (TMB): 1 x 10 ml Soluzione d arresto HRP: 1 x 10 ml Isotipo Angela IgG Tiziano IgM Gualtiero IgA 17

20 HIT ED EPARINA HIT - Ab(PF4-H) Utilizzo: Test immunologico al lattice per la determinazione delle immunoglobuline totali contro il complesso PF4-eparina utilizzando i sistemi ACL TOP. Gli anticorpi eparino-dipendenti sono riscontrabili nei pazienti con HIT. La HIT è un evento immunologico avverso che può verificarsi durante il trattamento eparinico ed è causata dalla presenza di anticorpi che riconoscono il PF4 legato all eparina o ad altre molecole polianioniche; è caratterizzata da una riduzione significativa dei valori piastrinici ed è associata a complicanze tromboemboliche. Principio: Sospensione di particelle di lattice rivestite con un anticorpo monoclonale contro PF4-eparina. La competitività della reazione di agglutinazione si verifica quando un complesso di PF4-PVS (polivinil sulforato, un composto simile a eparina) è mescolato con il lattice e con il campione del paziente. Gli eventuali anticorpi PF4-eparina presenti nel campione si legano al complesso inibendone l agglutinazione, mentre l assenza di anticorpi permette al complesso di legarsi al lattice consentendo la reazione di agglutinazione. Il grado di agglutinazione è inversamente proporzionale alla concentrazione di anticorpi ed è determinato misurando la diminuzione della luce trasmessa causate dagli aggregati. Controlli per HIT - Ab(PF4-H) Utilizzo: Per il controllo di qualità del test per la determinazione HIT - Ab(PF4-H) totale. Nella confezione sono presenti due differenti controlli che contengono quantità diverse di anticorpo monoclonale anti-pf4-eparina: il Controllo HIT Livello Low è utilizzabile per verificare il test ad un titolo anticorpale negativo (circa 0.6 U/mL), il Controllo HIT Livello High è essenziale per valutare la precisio ma di controllo di qualità completo si raccomanda l uso di entrambi i controlli. Principio: Controlli preparati da una soluzione concentrata tramite di un processo dedicato e contengono quantità diverse di anticorpo monoclonale anti-pf4-eparina. Control Livello Basso: 3 x 1 ml, liquido Control Livello Alto: 3 x 1 ml, liquido Stephen Controlli dedicati a due differenti livelli anticorpali Liquidi, pronti all uso Lattice: 2 x 1.8 ml, liquido Stabilizzante: 2 x 3.2 ml, liquido Complesso: 2 x 0.8 ml liquido Calibratore: 2 x 1 ml, liquido King Test on-demand 24/24 ore - 7/7 giorni Reagenti liquidi, pronti all uso Velocità di esecuzione, risultato in meno di 12 minuti Uso del test rapido HIT-Ab Quadro clinico (score delle 4-T) 1 Probabilità Intermedia o Alta Test HIT Bassa Probabilità Test HIT negativo HIT Improbabile Analisi del quadro clinico di origine per decidere se continuare il trattamento con eparina. Test HIT positivo Circa il 90% dei pazienti con il sospetto di HIT non hanno gli anticorpi anti-pf4-eparina e hanno una bassa probabilità di sviluppare la HIT. HIT Probabile Ulteriori test di approfondimento e analisi dei sintomi clinici per determinare la corretta terapia anticoagulante. L utilizzo di un test immediato per gli anticorpi anti-pf4-eparina previene inutili e costosi cambiamenti di terapia in pazienti con il sospetto di HIT. 1. Greinacher A. Heparin-induced thrombocytopenia. J. Thromb Haemost 2009; 7 (Suppl. 1):