X CICLO DI CONFERENZE

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Barbara Filippi
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1 X CICLO DI CONFERENZE Professione Biologo Biologo della Fecondazione Assistita Giovedì 27 settembre 2012 Alessandro Miceli Promea S.p.A. - Torino alessandro.miceli@promea.net Dipartimento di Biologia Animale e dell Uomo Via Accademia Albertina, 13 - Torino Fisiopatologia della araiproduzione Umana e Tecniche di Riproduzione Assistita

2 CARIOTIPO UMANO

I cromosomi sessuali X e Y (la loro denominazione è riferibile all'aspetto che assumono alla meiosi che li rende simili rispettivamente a una x e a una y) sono differenti per dimensioni e forma, e

3 I cromosomi sessuali X e Y (la loro denominazione è riferibile all'aspetto che assumono alla meiosi che li rende simili rispettivamente a una x e a una y) sono differenti per dimensioni e forma, e ciò riflette il differente contenuto genetico. Il cromosoma Y è un cromosoma sui generis, è molto più piccolo, infatti è grande circa 1/3 del cromosoma X, contiene pochissimi geni (solo quelli necessari per la determinazione del sesso maschile) geni quindi meno numerosi e differenti da quelli portati dal cromosoma X ed ha un elevato numero di sequenze ripetitive.

Il cromosoma Y è un cromosoma sui generis, è molto più piccolo, infatti è grande circa 1/3 del cromosoma X, contiene pochissimi geni (solo

4 DETERMINAZIONE DEL SESSO

5 LA FUNZIONE RIPRODUTTIVA ASSE IPOTALAMO - IPOFISI - GONADI IPOTALAMO ghiandola che, integrando segnali endocrini e segnali neurologici, secerne neuropeptidi che stimolano l ipofisi a produrre tropine. In particolare produce GNRH - Gonadotropin Releasing Factor. IPOFISI ghiandola il cui afflusso ematico deriva completamente dall ipotalamo, attraverso il sistema portale ipotalamo-ipofisario, suddivisa in Adenoipofisi anteriore che produce tropine fra cui le gonadotropine (FSH - Follicle Stimulating Hormone ed LH Luteinizing Hormone) e Neuroipofisi posteriore che secerne Ossitocina e Vasopressina. GONADI organi bersaglio delle gonadotropine con funzione steroidogenica (androgeni ed estrogeni) e gametogenica.

IPOFISI ghiandola il cui afflusso ematico deriva completamente dall ipotalamo, attraverso il sistema portale ipotalamo-ipofisario, suddivisa in Adenoipofisi anteriore che produce

6 APPARATO RIPRODUTTIVO MASCHILE Testicoli, Prostata, Vescichette Seminali, Ghiandole Bulbo-Uretrali, Pene

9 APPARATO RIPRODUTTIVO FEMMINILE Ovaie, Tube di Falloppio, Utero, Vagina

11 CICLO MESTRUALE Il ciclo mestruale è il periodo compreso tra una mestruazione e la successiva. Accompagna la donna dalla prima mestruazione (menarca) fino all'ultima mestruazione (menopausa). Il ciclo mestruale è regolato da diversi ormoni che attraverso il circolo ematico raggiungono vari organi dove svolgono la loro azione specifica. Il centro regolatore è rappresentato dall'ipofisi, che produce due ormoni (gonadotropine): follicolostimolante FSH e luteinizzante LH. Questi ormoni ipofisari agiscono sull'ovaio promuovendo la maturazione della cellula uovo con la sua liberazione durante l'ovulazione e la produzione di due ormoni, estrogeni e progesterone. Gli ormoni ovarici agiscono soprattutto sull'utero stimolando la proliferazione dell endometrio (estrogeni) e preparandolo ad una gravidanza (progesterone).

Il centro regolatore è rappresentato dall'ipofisi, che produce due ormoni (gonadotropine): follicolostimolante FSH e luteinizzante LH.

12 NELL UOMO, COME IN TUTTI GLI ANIMALI, I GAMETI VENGONO PRODOTTI DA ORGANI SPECIALIZZATI, LE GONADI GONADE MASCHILE TESTICOLO GONADE FEMMINILE OVAIO

15 Struttura dello spermatozoo umano

16 400 x campione colorato 200 x campione a fresco

17 Struttura dell ovocita umano

18 Ovaio Follicolo di Graaf Ovocita

19 Ovocita denudato (decoronizzato) Ovocita con cumulo ooforo e corona radiata

20 La Fecondazione Naturale Fecondazione Reazione Acrosomiale

22 La reazione acrosomiale comporta una fusione tra la membrana plasmatica dello spermatozoo e quella acrosomiale nella regione anteriore con una specie di vescicolazione che permette la secrezione di enzimi litici acrosomali che digeriscono il cumulo ooforo e la zona pellucida.

24 Dalla fusione di due gameti si costituirà quindi un'unica cellula con un patrimonio genetico completo che suddividendosi in maniera corretta darà origine ad un nuovo individuo.

25 Ma.... quando il figlio non arriva????

26 Centro di Medicina della Riproduzione

27 VALUTAZIONE E PREPARAZIONE DEL LIQUIDO SEMINALE

28 MONITORAGGIO ECOGRAFICO DELL OVULAZIONE Immagine ecografica di un ovaia durante la induzione farmacologica dell ovulazione. Sono visibili vari follicoli che appaiono come aree nere. I punti colorati evidenziano un follicolo maturo di 17 mm di diametro.

29 IUI - INTRAUTERINE INSEMINATION Quando due o tre follicoli hanno raggiunto la misura idonea, viene indotta l ovulazione con una ulteriore iniezione di ormone (gonadotropina corionica umana o hcg). In periodo periovulatorio, un campione di seme fresco viene preparato e posto nel fondo dell utero della partner mediante un sottile tubicino (catetere). Nella IUI, come nelle altre tecniche di riproduzione assistita, dopo l entrata in vigore della legge 40/2004, si utilizza esclusivamente il campione seminale del partner (inseminazione omologa).

30 FIVET - FERTILIZATION IN VITRO END EMBRYO TRANSFER ICSI - INTRACITOPLASMATIC SPERM INJECTION

31 Sonda ecografica endovaginale Termoblock Pompa di aspirazione a vuoto Provette PICK-UP OVOCITARIO

32 Durante il pick-up il fluido follicolare viene aspirato all interno di provette.

33 Il fluido follicolare, riversato in piastre di coltura, viene esaminato allo stereomicroscopio per la ricerca degli ovociti.

34 FIVET ICSI

35 FIVET

36 ICSI

38 Ovocita maturo con cumulo ooforo chiaro ed espanso

39 Ovocita immaturo, con cumulo ooforo scuro e compattato

40 Ovocita immaturo, con cumulo ooforo scuro e compattato

41 Ovocita molto immaturo - Vescicola Germinale (Profase I)

42 Ovocita immaturo Metafase I

43 Ovocita maturo Metafase II

44 Vescicola germinale Metafase I Metafase II

45 Ovocita di bassa qualità, con vacuoli e globulo polare irregolare

46 Ovocita con zona pellucida fratturata (Fractured Zone) ed ooplasma in estrusione

48 Zigote diploide, 2 pronuclei (46 cromosomi)

49 Zigote triploide, 3 pronuclei anziché 2 (69 cromosomi anziché 46)

50 Zigote poliploide

52 DAY 2

53 DAY 2

54 DAY 3

55 DAY 5

56 Hatching Embrionario

57 Assisted Hatching Soluzione Acida di Tyrode Laser

58 Crioconservazione Spermatozoi Ovociti Embrioni

59 Transfer embrionario Catetere con embrioni

60 Immagine ecografica di un transfer Linea rossa: limiti del collo dell utero Linea blu: limiti dell intero utero Linea verde: limiti della cavità uterina Linea gialla tratteggiata: catetere che contiene gli embrioni

62 Grazie per l attenzione!

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