Giovanni Di Bonaventura, PhD

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Alessia Rocco
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1 Giovanni Di Bonaventura, PhD CI Microbiologia e Microbiologia Clinica CL Medicina e Chirurgia Università G. d Annunzio di Chieti-Pescara AA

2 Trichomonas spp: tassonomia Phylum: Sarcomastigophora Subphylum: Mastigophora Al genere Trichomonas appartengono 3 specie: - T. tenax (orale) - T. hominis (intestinale) - T. vaginalis (genitale) T. tenax e T. hominis, scarsamente patogeni per l uomo T. vaginalis è patogeno franco per l uomo

3 T. vaginalis: epidemiologia T. vaginalis causa tricomoniasi, una delle più frequenti infezioni a trasmissione sessuale (STIs): oltre 250 milioni di casi nel mondo [WHO, 2005] negli USA, la tricomoniasi rappresenta il 56% delle STIs, facendo registrare 2-3 milioni di nuovi casi annui in donne sessualmente attive in Italia: prevalenza % (a seconda della età, promiscuità sessuale, utilizzo preservativo) T. vaginalis ha una distribuzione mondiale, indipendente dallo status socioeconomico L uomo è l unico ospite naturale per l infezione Trasmissione dell infezione: diretta (interpersonale): per contatto sessuale (frequente), oppure alla nascita, durante il passaggio del feto nel canale del parto (rara); indiretta (rara): mediante effetti personali (per igiene intima, bagni, asciugamani) Prevalenza maggiore (circa 70%) in soggetti a rischio: prostitute, persone con differenti partners sessuali od affette da altre malattie veneree Infezione tipica delle donne in età fertile (rari casi nel menarca ed in menopausa)

T. vaginalis: morfologia e struttura Il protozoo non forma cisti; esiste solo come trofozoite con le seguenti caratteristiche: piriforme (15-20 m), se libero; ameboide, se adeso alla mucosa

ondulante un assostilo, a funzione citoscheletrica e adesiva; decorre dal nucleo verso il polo posteriore cellulare da cui protrude riproduzione asessuata (fissione binaria) tipo cellulare

4 T. vaginalis: morfologia e struttura Il protozoo non forma cisti; esiste solo come trofozoite con le seguenti caratteristiche: piriforme (15-20 m), se libero; ameboide, se adeso alla mucosa monozoico mononucleato: nucleo nella metà anteriore, circondato da membrana porosa 2 paia di flagelli anteriori (da cinetosoma) ed un flagello (ricorrente) laterale accolto in una membrana ondulante un assostilo, a funzione citoscheletrica e adesiva; decorre dal nucleo verso il polo posteriore cellulare da cui protrude riproduzione asessuata (fissione binaria) tipo cellulare primitivo assenza di mitocondri o perossisomi possiede idrogenosomi: analoghi dei mitocondri, presenti in alcuni anaerobi aerotolleranti (ciliati, funghi) anaerobi aerotolleranti (metabolismo fermentativo)

5 T. vaginalis: metabolismo fermentativo Fermentazione dei carboidrati: Glucosio + ADP + P i piruvato lattato + CO 2 + ATP glucosio ADP + P i piruvato ATP H 2 + CO 2 + acetato Idrogenosoma (assenza di creste, DNA, cardiolipina, catena di trasporto e - )

6 T. vaginalis: morfologia e struttura flagelli ricorrenti costa assostilo membrana ondulante cinetosoma flagelli anteriori nucleo

7 T. vaginalis: ciclo biologico T. vaginalis risiede nelle basse vie genitali femminili (vagina, orifizio uretrale; talvolta endocervice) e maschili (uretra; talvolta prostata e epididimo), dove esso si replica per fissione binaria favorita da scarsa acidità (ph > 5.9; ph fisiologico: ). Il parassita non subisce incistamento e, conseguentemente, non sopravvive a lungo nell ambiente esterno. La trasmissione di T. vaginalis riguarda solo l uomo, unico ospite noto, principalmente a seguito di rapporto sessuale.

8 T. vaginalis: trasmissione Non vengono prodotte cisti trasmissione diretta sensibilità del trofozoite all essiccamento trofozoiti vitali per alcune ore all esterno dell ospite (liquido seminale, urine e acqua di piscine) Generalmente contratta mediante trasmissione diretta del trofozoite durante il rapporto sessuale Trasmissione (urinaria o genitale) madre-neonato durante il parto (2-17% femmine nate da madri infette) La trasmissione non mediata da rapporto sessuale è rara, soprattutto in età adulta: effetti personali per igiene intima (asciugamani), bagni iatrogena (speculum)

9 Tricomoniasi: patogenesi L infezione si localizza: nella donna: vagina, uretra, ghiandole Skene e Bartolini (meno frequentemente nella endocervice) nell uomo: uretra (meno frequentemente in prostata ed epididimo) T. vaginalis aderisce alla mucosa, senza penetrare, causando microemorragie L infezione si associa a dismicrobismo: il protozoo causa una marcata riduzione della flora lattobacillare* e, conseguentemente, facilita l impianto di una flora batterica mista * Normalmente residenti, mantengono basso il ph vaginale, rappresentando uno dei principali meccanismi di difesa dell ospite vs infezioni

Tricomoniasi: clinica Il periodo di incubazione è di 5-28 giorni Nelle donne il quadro clinico può variare dallo stato di portatore asintomatico ad una vaginite franca: 1/3 degli asintomatici

10 Tricomoniasi: clinica Il periodo di incubazione è di 5-28 giorni Nelle donne il quadro clinico può variare dallo stato di portatore asintomatico ad una vaginite franca: 1/3 degli asintomatici sviluppa la malattia nel corso di alcuni mesi La vaginite acuta è caratterizzata da abbondante leucorrea (giallo-verdastra, schiumosa, di cattivo odore) e lesioni ulcerative vulvari; dolore addominale, disuria e dispareunia La comparsa di lesioni microemorragiche ed ulcerative a carico dell esocervice ( cervicite a fragola ) è patognomonica, ma rara (2-3% dei casi) Negli uomini, l infezione decorre generalmente in maniera asintomatica; occasionalmente compaiono uretriti, epididimiti e prostatiti con dolore alla minzione ed all erezione Dati recenti suggeriscono un possibile ruolo causale dell infezione: nelle nascite sottopeso e prematurità nella amplificazione della trasmissione dell HIV e nella eziologia, come cofattore, del cancro della cervice uterina

11 Tricomoniasi: diagnosi di laboratorio Campioni clinici: donna: secrezione vaginale o uretrale, urine (primo mitto) uomo: secrezione uretrale anteriore o prostatica, urine (primo mitto) Secreto uretrale e urine vanno raccolti a distanza di almeno 2 h dall ultima minzione. Esame microscopico: su preparati a fresco, consente di porre diagnosi in presenza di organismi dotati di caratteristica motilità attiva (a foglia cadente); rapido e pratico (consente immediata terapia), ma di modesta sensibilità preparati colorati (Giemsa, Gram, blu di metilene); falsi negativi dovuti ad alterazione morfologica del parassita sebbene la tricomoniasi sia frequentemente diagnosticata in maniera accidentale durante l esame di un preparato citologico colorato con Papanicoloau (PAP test), questa tecnica non deve essere considerata come test diagnostico primario causa scarse sensibliità e specificità Immunofluorescenza diretta: previa colorazione con acridina orange elevata sensibilità, ma tecnicamente più complessa e più costosa

12 Tricomoniasi: diagnosi - microscopia ottica Trofozoiti da coltura in vitro. Preparato colorato con Giemsa. A B Preparato «a fresco» da: A) secrezione vaginale da paziente con vaginite; B) coltura in vitro.

non siano disponibili prima di 3 7 giorni.

13 Tricomoniasi: diagnosi di laboratorio Esame colturale: terreni di coltura: Diamond s medium (broth); CPLM medium (agar, broth). indicato nei casi recidivanti e per l esecuzione dei tests di sensibilità tecnica più sensibile ( parassiti/ml), sebbene i risultati non siano disponibili prima di 3 7 giorni. Saggio molecolare: differenti tecniche molecolari (hybridization assay, PCR, multiplex-pcr) sono state proposte [Wang et al, 2010], sebbene sensibilità e specificità siano spesso influenzate dall elevata variabilità genica di T. vaginalis [Rojas et al., 2004].

14 Tricomoniasi: terapia e controllo TERAPIA la tricomoniasi è, tra le STDs, quella maggiormente curabile trasmissione di infezioni a ping-pong : il trattamento deve includere i partners sessuali (anche se asintomatici) delle persone infette farmaci di elezione: metronidazolo e tinidazolo somministrazione per os è più efficace di uso topico la terapia ha generalmente esito positivo, sebbene la resistenza ai nitroimidazoli sia in aumento CONTROLLO adozione della terapia (compliance) profilassi: utilizzo del preservativo, buona igiene personale

15 Nitroimidazoli: meccanismo di azione Fermentazione dei carboidrati: Glucosio + ADP + P i piruvato lattato + CO 2 + ATP glucosio Idrogenosoma ADP + P i ATP piruvato Metronidazolo H 2 + CO 2 + acetato Il metronidazolo viene attivato a farmaco : il nitro-gruppo del farmaco viene ridotto anaerobicamente (attività selettiva vs anaerobi) da una piruvato-ferrodoxina ossidoriduttasi. Ciò causa la produzione di radicali citotox dell azoto che rompono le catene di DNA.

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Trichomonas vaginalis Classificazione Regno Protista Sottoregno Protozoa Phylum Sarcomastigophora Subphylum Mastigophora Classe Zoomastigophorea Ordine Trichomonadida Genere Trichomonas Specie Trichomonas