Patogenesi molecolare della Mielofibrosi Primaria
Mielofibrosi primaria WHO 2008: Primary myelofibrosis (PMF) is a clonal myeloproliferative neoplasm (MPN) characterized by a proliferation of predominantly megakaryocytes and granulocytes in the bone marrow that in fully developed disease is associated with reactive deposition of fibrous connective tissue and with extramedullary haematopoiesis
Il cromosoma Philadelphia nelle malattie mieloproliferative t (9;22) q(34;11)
Il cromosoma Philadelphia nella classificazione delle MPN PHILADELPHIA POSITIVE: PHILADELPHIA NEGATIVE: LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA (CML) MIELOFIBROSI PRIMARIA (PMF) POLICITEMIA VERA (PV) TROMBOCITEMIA ESSENZIALE (ET) LEUCEMIA CRONICA NEUTROFILICA (CNL) Forme Classiche LEUCEMIA CRONICA EOSINOFILICA, NAS (CEL) MASTOCITOSI (MCD) SINDROME IPERESOINOFILA (HES) NEOPLASIE MIELOPROFIRATIVE NON CLASSIFICABILI (MPN u)
Diagnosi di PMF Integrazione dati : Epidemiologici Clinici Immunofenotipici Biologia molecolare
Mielofibrosi primaria Epidemiologia Età mediana alla diagnosi: 60 aa Più del 90% delle diagnosi èfatta dopo i 40 aa Infrequente, ma possibile anche nei bambini Malattia abbastanza rara : 0,3 1,5/100.000 anno Mediana di sopravvivenza: 5 anni Le cause di morte includono la trasformazione leucemica
Mielofibrosi primaria Caratteristiche cliniche Progressiva fibrosi midollare, osteosclerosi, angiogenesi Ematopoiesi extramidollare Massiva splenomegalia Eritropoiesi inefficace Iperplasia mieloide e megacariocitaria Presenza di elementi immaturi della linea granulocitaria ed eritroblastica nel sangue periferico (dacriociti)
Mielofibrosi primaria Caratteristiche immunofenotipiche Drssa Sabattini
Mielofibrosi primaria Caratteristiche citogenetiche Tecniche utilizzate: Citogenetica convenzionale, SNPs array profiling Le alterazioni più comuni sono: del(13)(q12;q22) del(20)(q11;q13) trisomia 8 parziale trisomia 1q aupd chr9
SNPs array profiling della PMF PLoS One. 2011 SNPs array karyotyping reveals a novel recurrent 20p13 amplification in primary myelofibrosis Visani G, Sapienza MR, Isidori A, Tripodo C, Laginestra MA, Righi S, Sagramoso Sacchetti CA, Gazzola A, Mannu C, Rossi M, De Nictolis M, Valentini M, Donati M, Emiliani R, Alesiani F, Paolini S, Finelli C, Pileri SA, Piccaluga PP.
Mielofibrosi primaria Caratteristiche genetiche Marcatori diagnostici: JAK2V617F (60%) MPLW515K/L (5%) Presenti anche nella policitemia vera e trombocitemia essenziale
Complessità genetica ed epigenetica nella patogenesi della mielofibrosi primaria 1) Ruolo centrale di JAK2 2) Alterazioni epigenetiche 3) Predisposizione genetica
1) Ruolo centrale JAK2
ASH American Society of Hematology
La proteina JAK2 èun enzima tirosin chinasi associato ai recettori dell eritropoietina e della trombopoietina
Il legame ligando recettore attiva la proteina JAK2
L enzima JAK2 attivato, attiva i pathway delle MAPK e delle proteine STAT, promuovendo la proliferazione e il differenziamento cellulare
La mutazione JAK2V617F porta ad una attivazione costituzionale della proteina JAK2
JAK2V617F fosforila SOCS3 e sfugge a regolazione negativa NORMAL JAK2V617F
JAK2V617F fosforila la metiltransferasi PRMT5 con conseguente deregolazione trascrizionale NORMAL JAK2V617F
Incidenza di JAK2V617F
Meccanismi alternativi a JAK2
Meccanismi alternativi di attivazione di JAK2
Trattamento della mielofibrosi primaria e delle neoplasie mieloproliferative classiche mediante inibitori di JAK2
La mutazione V617F in JAK2 èun evento secondario La deregolazione del signalling di JAK2 e` un evento chiave nella patogenesi delle MPN MA. L`acquisizionedi JAK2V617 sembra essere un evento secondario Studi di clonalità Perdita di JAK2V617 durante la progressione della malattia nel 50% dei casi
Conclusioni JAK2V617F JAK2 e` una tirosin chinasi essenziale, legata a EpoR, TpoR e ad altri pathway JAK2V617F e` deregolato e costitutivamente attivo JAK2V617F fosforila SOCS3 e PRMT5, sfuggendo a meccanismi di regolazione negativa e alterando l espressione genica, rispettivamente Il signalling di JAK2 puo essere deregolato da mutazioni a monte (es. MPL) e a valle (es. SH2B3/LNK) Anche se JAK2 ha un ruolo centrale nelle MPN la mutazione JAK2V617F e` un evento secondario JAK2 e` un target terapeutico delle MPN
2) Alterazioni epigenetiche
Modificazioni epigenetiche nella mielofibrosi primaria MODIFICAZIONI EPIGENETICHE: modificazioni dell espressione genica ma non della sequenza di DNA
Alterazioni genetiche ma anche epigenetiche nella mielofibrosi primaria
Regolatori epigenetici mutati nella mielofibrosi primaria Diversi modulatori epigenetici sono mutati nelle MPN Non e` ancora chiara l interazione fra di loro e con JAK2 Le mutazioni in questione comportano per lo piu perdita di funzione e sono difficili target terapeutici
3) Predisposizione genetica
Predisposizione genetica della mielofibrosi primaria
L aplotipo (46/1 or GGCC) di JAK2 correla positivamente con la mutazione V617F
Conclusione
Maria Rosaria Sapienza, PhD Molecular Pathology Laboratory, Unit of Hematopathology, Department of Hematology and Oncological Sciences "L. and A. Seràgnoli e mail: mariarosaria.sapienza@gmail.com