Giacomo Spinsanti Dipartimento di Biologia Evolutiva spinsanti@unisi.it Jacopo Bigliazzi Dipartimento di Scienze Ambientali bigliazzi4@unisi.it Tracciabilità, Valorizzazione della Qualità e Sicurezza degli Alimenti Potenzialità dei laboratori universitari Mercoledì 3 Marzo, Auditorium Camera di Commercio
La conoscenza reciproca ed il trasferimento di know- how
Il mondo della Biologia Molecolare PCR Polimerase Chain Reaction 1953 (Watson e Crick) Primo modello accurato della struttura del DNA 1983 (Kary Mullis) Metodologia di amplificazione di frammenti di DNA
DNA
Estrazione DNA
? Presenza/Assenza di PRESENTE PCR Quantificazione di 2 COPIE SU 8: 25%
1. Microbiologia 3. Allergeni 2. Ricerca di artificiale 4. Identificazione di specie animali e vegetali
1. Settore Microbiologico Identificazione delle principali specie di microrganismi patogeni Matrici Salmonella spp. Listeria spp. Listeria monocytogenes Escherichia coli O157 Campylobacter spp. Enterobacter sakazakii Staphilococcus aureus Materie prime Cibi pronti Carne e Pesce Prodotti lavorati Campioni ambientali
1. Settore Microbiologico Vantaggi: Tempo Riduzione sensibile della tempistica di analisi ad un giorno lavorativo Arrivo del campione Arricchimento O/N Estrazione DNA Reazione PCR Giorno 1 Giorno2 Costo Operatore Sensibilità Precisione Affidabilità
1. Settore Microbiologico Un caso specifico, Salmonella spp., a confronto... Metodo Microbiologico Classico Arrivo del campione Arricchimento O/N Semina su terreno Piastratura e incubazione O/N Conta delle colonie Giorno 1 Giorno 2 Giorno 3 Giorno 4 Metodo Molecolare Arrivo del campione Arricchimento O/N Estrazione DNA Reazione PCR Giorno 1 Giorno 2
Tracciabilità, Valorizzazione della Qualità e Sicurezza degli Alimenti Siena, Siena, Auditorium Auditorium Camera Camera di Commercio di Commercio 21 Dicembre 3 Marzo 2009 2010 1b. Settore Microbiologico/Enologico Screening quantitativo per Brettanomyces spp. nel vino Brettanomyces spp. in barrique con un costo pari a 3,60 al Matrici Uva Mosto Vino non filtrato Campioni ambientali
Tracciabilità, Valorizzazione della Qualità e Sicurezza degli Alimenti Siena, Siena, Auditorium Auditorium Camera Camera di Commercio di Commercio 21 Dicembre 3 Marzo 2009 2010 1b. Settore Molecolare Microbiologico/Enologico Screening quantitativo per Brettanomyces spp. nel vino Brettanomyces spp. La Microbiologia Classica è del tutto inadeguata per questo tipo di analisi X X X Tempo di risposta Precisione Affidabilità
2. Ricerca di artificiale gli eventi OGM (Organismi Geneticamente Modificati) Pianta Naturale Patrimonio genetico normale del grano Pianta OGM Patrimonio genetico normale del grano + 1 GENE INSERITO IN
2. Ricerca di artificiale Estrazione DNA Pianta OGM Estrazione DNA??
2. Ricerca di artificiale Capacità di identificazione di tutti gli eventi OGM Mangimi misti Prodotti finiti Saggio Qualitativo e Quantitativo La legge europea permette fino allo 0.9% di eventi OGM senza specifica in etichetta Sensibilità Precisione Affidabilità Reazioni multiple
PCR Multipla per del 95% degli eventi OGM consentiti Promotore artificiale Terminatore 35s 95% degli OGM ammessi in Europa T- Nos
PCR Multipla per del 95% degli eventi OGM consentiti Promotore artificiale Terminatore 35s T- Nos
PCR Multipla per del 95% degli eventi OGM consentiti Promotore artificiale Terminatore 35s T- Nos PCR degli eventi OGM ammessi in Europa con risposta qualitativa e quantitativa su semi, materie prime, prodotti lavorati.
3. Ricerca di Allergeni Identificazione delle principali specie allergeniche: risposta qualitativa Matrici Arachide Crostacei Fragola Latte Lievito Cibi pronti Prodotti lavorati Campioni ambientali durante la fase lavorativa
4. Identificazione di Specie Animali e Vegetali Come smascherare le frodi alimentari e tutelare il consumatore DNA 100% Latte Vaccino DNA DNA
4. Identificazione di Specie Animali e Vegetali Come smascherare le frodi alimentari e tutelare il consumatore DNA Sofisticazione Latte Ovino DNA DNA
4. Identificazione di Specie Animali e Vegetali Come smascherare le frodi alimentari e tutelare il consumatore
Collaborazione & Sviluppo
Giacomo Spinsanti spinsanti@unisi.it Jacopo Bigliazzi bigliazzi4@unisi.it Mercoledì 3 Marzo, Auditorium Camera di Commercio