Espressione dei risultati per analisi Microbiologiche
Distribuzione dei batteri
Distribuzione dei batteri
Incertezza di misura Per comprendere al meglio la teoria e la pratica di una misurazione, da cui ci aspettiamo risultati oggettivi e rigorosi, bisogna conoscere li concetto fondamentale di INCERTEZZA. Il valore di una caratteristica numerica è sempre incerto La conoscenza dell ampiezza di tale incertezza è indispensabile per utilizzare al meglio i risultati delle misure.
UNI CEN ISO/IEC 17025
ISO 17025
UNI ENV ISO 13843
UNI ENV ISO 13843
UNI ENV ISO 13843
Poisson P= probabilità X= numero atteso λ= numero medio di individui contati
Esempi Poisson Distribuzione di Poisson % 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 N batteri 5 Distribuzione di Poisson % 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 N batteri 10 Distribuzione di Poisson % 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 N batteri 35
UNI EN ISO 8199
Conteggio di colonie 20 UNI EN ISO 8199 Nel caso di numero di colonie 20, il risultato finale con l intervallo di fiducia al 95% di probabilità sarà dato da: Z 2 Z Cs ± 95% IF = ± Vs Vtot Vtot Cs= risultato Z= n. TOT di colonie contate Vtot= volume tot filtrato Vs= volume refertato Dove il numero 2 è l approssimazione del fattore di copertura (1,96), per il livello di probabilità del 95%. Distribuzione di Poisson 20 18 % 16 14 12 10 8 6 4 2 0 95% 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49 51 53 55 57 59 61 N batteri 35
Conteggio di colonie < 20 UNI EN ISO 8199 Nel caso di Z compreso tra 10 e 19 si aggiungono alla formula delle correzioni utili a compensare l asimmetria della distribuzione di Poisson: Z + 2 ± 2 Z + 1 IF 95% = Vs Vtot Distribuzione di Poisson 20 18 16 14 12 % 10 8 6 4 2 0 1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 N batteri 10
UNI EN ISO 8199 Conte > 20 Z 2 Z Cs ± 95% IF = ± Vs Vtot Vtot Conte tra 10 e 20 Z + 2 ± 2 Z + 1 IF 95% = Vs Vtot
UNI EN ISO 8199 Nel caso di numero di colonie tra 4 e 9, la precisione diminuisce quindi il risultato calcolato con la formula, viene espresso come UFC stimate/volume di campione senza associare il valore dell incertezza di misura.
UNI EN ISO 8199 Nel caso di numero di colonie da 1 a 3, la precisione è così bassa che il risultato dovrebbe essere riportato senza un dato numerico, ma con l espressione: microrganismi presenti nel volume analizzato ; in base ad accordi con il cliente, anche in questo caso si può esprimere il dato numerico come UFC stimate/volume di campione, senza associare il valore dell incertezza di misura.
Caso che può trarre in inganno!!!!!! Batteri coliformi a 37 C: Numero stimato 5 UFC/100nl Conta di colonie a 22 C: 5 UFC/ml incert. 3 9 Spiegazione: La conta a 22 C è un metodo che viene eseguito in doppio (lettura su 2 piastre) Es. Piastra 1: leggo 5 colonie Piastra 2: leggo 5 colonie Somma = 10 UFC La ISO 8199 dice che se ho letto 10 colonie posso esprimere un incertezza Z + 2 ± 2 Z + 1 IF 95% = Vs Vtot
Caso che può trarre in inganno!!!!!! Il risultato è la media: 10/2= 5 UFC/ml Z + 2 ± 2 Z + 1 Incertezza: IF 95% = Vs Vtot 10 + 2 ± 2 10 + 1 12 ± 6,6 IF95 % = 1 IF95 % = 1 2 2 9,3 2,7 Quindi: Conta di colonie a 22 C 5 UFC/ml inc. 3 9
Tutti questi aspetti sono indicati nel documento U.RP.K022 Protocollo validazione metodi di prova
Es di esiti di campioni e frasi sul R. di P. 1) Tutti i parametri con valori 0 oppure <1 UFC/x ml
2) Uno o più parametri con valori da 1 9 UFC/x ml
2) Uno o più parametri con valori da 1 9 UFC/x ml Verrà inserita la seguente nota tecnica quando avremo: numero stimato La stima si basa su quanto riportato nel documento Arpa "Protocollo validazione metodi di prova U.RP.K022" e nelle Norme UNI EN ISO 8199: 2008 e UNI ENV ISO 13843:2003
3) Uno o più parametri con valori da 19 10 UFC/x ml
4) Uno o più parametri con valori > di 20 UFC/x ml
Es di altre note tecniche presenti sui R. di P. NOTE TECNICHE Si segnala la presenza di particellato amorfo sulla membrana di filtrazione. Si segnala sul terreno Agar Lattosato + TTC (utilizzato per la determinazione del parametro Escherichia coli) la presenza di un significativo quantitativo di colonie (. UFC/100 ml) con caratteristiche non corrispondenti al parametro ricercato. All atto della consegna del campione in questione è stata riscontrata l assenza del campione testimone, non è stato quindi possibile effettuare il controllo della temperatura in ingresso; per tale motivazione si omette dichiarazione di conformità/non conformità. Si evidenzia che non è indicata la temperatura dell acqua al momento del campionamento. Si segnala che all atto della consegna del campione in questione, è stata rilevata una temperatura del boccetto testimone di C. Per tanto si omette emissione di dichiarazione di conformità/non conformità.
Grazie per l attenzione