PGD screening for aneuploidy with CGH arrays. Lo screening per aneuploidie cromosomiche (PGS/PGD) mediante CGH array
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1 PGD screening for aneuploidy with CGH arrays Lo screening per aneuploidie cromosomiche (PGS/PGD) mediante CGH array In partnership con: Via F. Ferrer 25/ Busto Arsizio (VA) - Italy Tel Fax
2 PGD screening for aneuploidy with CGH arrays Lo screening per aneuploidie cromosomiche (PGS/PGD) mediante CGH array Presentation. What is it? Pre-implantation genetic diagnosis (PGD) with CGH arrays allows us to analyze all 24 chromosome types in order to discard the possibility of embryonic aneuploidy before implantation. Aneuploidies are alterations in the number of chromosomes contributed to offspring by parents, and can produce implantation mistakes in assisted reproduction cycles, spontaneous abortions, and chromosopathies in newborns. Objective. What is it used for? Aneuploidy screening allows the specific selection of embryos which are chromosomally normal from amongst all of the patient s embryos in a given cycle of assisted reproduction; therefore it increases the patient s reproductive possibilities. Recommendations. Who and what is it for? Cytogenetic analysis of abortive remains shows that approximately 50% of them result from the presence of aneuploidal anomalies. The risk of generating aneuploid embryos is especially increased in groups of couples with bad reproductive prognoses: Women older than 38 years old. Couples who have suffered various spontaneous abortions of unknown origin. Couples who have undergone many cycles of in vitro fecundation but who have been unable to conceive. Males with a low sperm concentration. Couples who had a previous gestation with a chromosomal anomaly. Presentazione. Che cos è? Lo screening genetico preimpianto (PGS/PGD) mediante array CGH permette di analizzare i 24 cromosomi umani al fine di minimizzare la possibilità di aneuploidie cromosomiche negli embrioni prima dell impianto. Le aneuploidie sono alterazioni nel numero di cromosomi che possono provocare fallimenti dell impianto del concepimento nei cicli di riproduzione assistita, aborti spontanei e anomalie cromosomiche nei neonati. Obiettivo. Per che cosa viene utilizzata? La PGS consente una specifica selezione degli embrioni che sono cromosomicamente normali tra tutti gli embrioni prodotti dalla paziente durante il ciclo di riproduzione assistita, aumentando pertanto le possibilità riproduttive della paziente stessa. Raccomandazioni. A chi e per cosa è raccomandata? L analisi citogenetica dei tessuti abortivi dimostra che almeno il 50% degli aborti sono caratterizzati dalla presenza di anomalie numeriche dei cromosomi. Il rischio di generare embrioni con aneuploidie è particolarmente alto nelle coppie con una prognosi riproduttiva negativa quali: Donne di età superiore ai 38 anni. Coppie che hanno subito diversi aborti spontanei a causa sconosciuta. Coppie che hanno subito molti cicli di fecondazione in vitro, ma che non sono stati in grado di concepire. Uomini con una bassa concentrazione di spermatozoi. Coppie che hanno avuto una precedente gestazione affetta da una anomalia cromosomica.
3 The selection of chromosomally normal embryos in these patients enormously reduces the risks of spontaneous abortions and globally increases reproductive success. Advantages. What are its advantages over other tests? This test provides a fast and reliable diagnosis, using only one embryonic cell, with well demonstrated improvements in the reproductive success. There is a very low rate of being unable to obtain diagnostic information, which assures a diagnosis for each embryo of greater than 99%, and includes information on all 24 chromosome types. Samples. How? The sample is obtained by blastomere biopsy from day 3 embryos or by sampling various trophoectoderm cells on day 5. The biopsied cells are collected in a microtube containing sterile solution, and are sent in a cold container. Once the sample is received, it is maintained at -20 C until it is processed. Shipping. How, when, where and who? The sample is transported in a special coolbox able to keep the samples frozen up to 48 hours. Sample processing and results delivery. When? The laboratory protocol requires 24-48h for the analysis and the delivery of results. How do I start Get in contact with: chromosomic@tomalab.com La selezione degli embrioni cromosomicamente normali in queste pazienti riduce enormemente i rischi di aborti spontanei e aumenta sostanziosamente il successo riproduttivo. Vantaggi. In cosa PGS è superiore rispetto agli altri test? Questo test fornisce una diagnosi veloce e affidabile utilizzando una sola cellula embrionale, con miglioramenti ben dimostrati nel successo riproduttivo. La PGS assicura una percentuale di successo diagnostico per ogni embrione superiore al 99%, che include l informazioni su tutti i 24 tipi di cromosomi. Sussiste tuttavia un rischio molto basso ( 1%) di non ottenere informazioni diagnostiche tramite PGS. Prelievo. Come? Il campione è ottenuto con una biopsia di un blastomero (singola cellula) da un embrione in giorno 3 o tramite biopsia di più cellule del trofoectoderma dall embrione in giorno 5. Le cellule prelevate con la biopsia sono raccolte in una provetta contenente una soluzione sterile e sono trasportati in un contenitore freddo. Una volta ricevuto il campione, lo si mantiene a -20 C fino al momento della diagnosi. Invio. Come, quando, dove e chi? Il campione viene trasportato in un apposito contenitore che è in grado di mantenere congelati i campioni per circa 48 ore. Processo diagnostico e consegna del referto. Quando? Il protocollo di laboratorio richiede 24-48h per l analisi e la consegna dei risultati. A chi mi rivolgo Entra in contatto con: chromosomic@tomalab.com
4 FAQs What is an embryo biopsy? Does the embryo suffer any damage? The embryo biopsy consists of the extraction of one or a few embryonic cells, (depending on the state of development). It is an invasive method and the embryologist that manipulates the embryos must be very experienced and skillful. If the embryo is manipulated correctly the embryo develops normally after the biopsy, implants properly and results in healthy newborn baby. The studies published so far, which compare children that come from biopsied and non-biopsied embryos show no differences in clinical terms. If I perform an aneuploidy study through a DNA micro-array for the 24 chromosome types, does that mean that all genetic diseases will be screened for? No, the study of aneuploidies of the 24 chromosomes types through DNA micro-arrays gives information about the number of chromosomes present in the cell which was collected. It reveals the gain or loss of chromosomes at a global level. It also allows the detection of chromosomal rearrangements (exchanges of chromosome parts), but only if they exceed a certain size and result in disequilibrium (that is, that a greater or smaller quantity of chromosomal material than normal exists for the fragment in question). However, the study of aneuploidies does not screen for all the possible genetic alterations. Therefore the study of aneuploidies of the 24 chromosome types through micro-array cannot discard: the presence of DNA Domande e Risposte Frequenti Che cosa è una biopsia embrionale? L embrione potrebbe soffrirne o essere danneggiato? La biopsia embrionale consiste nel prelievo di una o poche cellule embrionali (a seconda dello stadio di sviluppo). Si tratta di un metodo invasivo e gli embriologi che manipolano gli embrioni devono essere molto esperti ed manualmente abili. Se gli embrioni sono manipolati correttamente hanno la possibilità di svilupparsi normalmente dopo la biopsia e, successivamente ad un corretto impianto, di dare origine ad un neonato sano. Gli studi pubblicati finora, tesi a confrontare le condizioni di bambini che provengono da embrioni sottoposti a biopsia e bambini che al contrario non sono stati sottoposti a questo trattamento non mostrano differenze in termini clinici. Se eseguo lo studio PGS mediante microarray per tutti i 24 tipi di cromosomi, vuol dire sarà possibile verificare l eventuale presenza di tutte le possibili malattie genetiche? No. lo studio dei cromosomi che la PGS mediante microarray fornisce informazioni solo sul numero di cromosomi presenti nella cellula che è stata analizzata. Questo test rivela l acquisizione o la perdita di interi cromosomi. Permette inoltre la rilevazione di riarrangiamenti cromosomici, ma solo se questi superano una certa dimensione e provocano degli sbilanciamenti (ossia la presenza di una maggiore o minore quantità di materiale cromosomico nel campione esaminato rispetto alla normalità). Lo studio PGS delle aneuploidie non analizza tutte le possibili alterazioni genetiche. Lo studio delle aneuploidie attraverso micro-array non può dunque eliminare tutti i rischi di eventuali anomalie: la presenza di mutazioni del DNA che provocano
5 mutations that produce certain genetic diseases, structural alterations where the disequilibrium is smaller than the limit of the technique s detection, balanced structural alterations in coding or non-coding regions of the DNA, etc. In agreement with recommendations of European Society of Human Genetics and of European Society of Human Reproduction and Embryology (Harper et al, 2013) TOMA Laboratory is accredited UNI EN ISO 9001:2008, UNI EN ISO 15189:2007 and SIGUCERT2009. Array-CGH technique is covered by all certifications. TOMA Laboratory participates to external control quality certification programs (CEQA). alcune malattie genetiche, alterazioni strutturali in cui lo sbilanciamento è inferiore al limite di risoluzione della tecnica utilizzata, alterazioni strutturali bilanciate codificanti o non codificanti per alcune regioni del DNA, ecc. In accordo con le raccomandazioni della European Society of Human Genetics e della European Society of Human Reproduction and Embryology (Harper et al, 2013) il laboratorio TOMA è accreditato UNI EN ISO 9001:2008, UNI EN ISO 15189:2007 e SIGU-CERT2009 (certificazione della qualità emessa dalla Società Italiana di Genetica Umana - SIGU). La tecnica di arraycgh è stata oggetto di tutte e tre le certificazioni. TOMA partecipa a certificazioni esterne di Qualità per la tecnica array-cgh (CEQA).
6 In agreement with recommendations of European Society of Human Genetics and of European Society of Human Reproduction and Embryology (Harper et al, 2013) TOMA Laboratory is accredited UNI EN ISO 9001:2008, UNI EN ISO 15189:2007 and SIGUCERT2009. Array-CGH technique is covered by all certifications. TOMA Laboratory participates to external control quality certification programs (CEQA). In partnership con: In accordo con le raccomandazioni della European Society of Human Genetics e della European Society of Human Reproduction and Embryology (Harper et al, 2013) il laboratorio TOMA è accreditato UNI EN ISO 9001:2008, UNI EN ISO 15189:2007 e SIGU-CERT2009 (certificazione della qualità emessa dalla Società Italiana di Genetica Umana - SIGU). La tecnica di arraycgh è stata oggetto di tutte e tre le certificazioni. TOMA partecipa a certificazioni esterne di Qualità per la tecnica array-cgh (CEQA).
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