Terreni BBL in flacone e in provetta pronti per l uso - Selective Sabouraud Brain Heart Infusion Agars for Cultivation of Fungi

Transcript

1 /08 Terreni BBL in flacone e in provetta pronti per l uso - Selective Sabouraud Brain Heart Infusion Agars for Cultivation of Fungi BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Gentamicin BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Gentamicin BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Gentamicin Vedere il glossario dei simboli alla fine del foglio illustrativo. USO PREVISTO Questi terreni sono usati in procedure qualitative per l isolamento selettivo e la coltivazione di funghi patogeni da campioni clinici e non clinici. SOMMARIO E SPIEGAZIONE BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar (agar Sabouraud infuso cuore-cervello) si basa sulla formulazione di Gorman 1. La combinazione dell agar infuso cuore-cervello con l agar destrosio Sabouraud in questo terreno, migliora il recupero dei funghi rispetto al recupero ottenibile su ciascun singolo terreno. Si raccomanda l aggiunta di sangue defibrinato di montone per aumentare il recupero di funghi dimorfi esigenti. 2,3 Gli antibiotici cloramfenicolo, cicloeximide e gentamicina sono incorporati in varie combinazioni per migliorare il recupero dei funghi patogeni da campioni altamente contaminati con batteri e funghi saprofiti. 2 PRINCIPI DELLA PROCEDURA L agar Sabouraud infuso cuore-cervello è costituito da una combinazione di peptoni e infusi di tessuti cerebrali e cardiaci allo scopo di fornire aminoacidi e altre sostanze azotate complesse. Il destrosio è una fonte di energia. Il cloruro di sodio fornisce gli elettroliti essenziali. Per mantenere il ph, sono stati incorporati tamponi fosfato disodico. Il sangue defibrinato di montone è aggiunto per fornire le sostanze nutritive che inducono la crescita di specie dimorfi nella fase lievitiforme. 2,3 Il cloramfenicolo è un antibiotico ad ampio spettro che inibisce una vasta gamma di batteri gram-negativi e gram-positivi. Il cicloeximide è un antimicotico principalmente attivo contro i funghi saprofiti e che non inibisce specie patogene. La gentamicina è un antibiotico aminoglicosidico che inibisce la crescita dei batteri gram-negativi. REAGENTI BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Formula approssimata* per L di acqua purificata Infuso cuore-cervello (solidi)... 4,0 g Digerito peptico di tessuto animale... 5,0 g Digerito pancreatico di caseina...10,5 g Destrosio... 21,0 g Cloruro di sodio... 2,5 g Fosfato disodico... 1,25 g Agar... 15,0 g *Compensata e/o corretta per soddisfare i criteri di performance.

2 BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Gentamicin contiene per litro sangue defibrinato di montone al 5% e 0,05 g di cloramfenicolo. Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide contiene per litro 0,05 g di cloramfenicolo e 0,5 g di cicloeximide. Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide contiene per litro sangue defibrinato di montone al 5%, 0,05 g di cloramfenicolo e 0,5 g di cicloeximide. Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Gentamicin contiene per litro 0,05 g di cloramfenicolo e 0,05 g di gentamicina. Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Choramphenicol and Gentamicin contiene per litro sangue defibrinato di montone al 10%, 0,05 g di cloramfenicolo e 0,05 g di gentamicina. Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Gentamicin contiene per litro 0,05 g di gentamicina. Avvertenze e precauzioni Per uso diagnostico in vitro. Aprire con estrema cautela le provette e i flaconi con i tappi serrati allo scopo di evitare lesioni dovute alla rottura del vetro. I campioni clinici possono contenere microrganismi patogeni, inclusi i virus dell epatite e i virus dell immunodeficienza umana. Manipolare tutti i materiali e gli articoli contaminati con sangue e altri fluidi biologici in conformità alle norme dell'istituto e alle Precauzioni standard. 4-7 Prima dello smaltimento, sterilizzare in autoclave le provette preparate, i contenitori dei campioni e gli altri materiali contaminati. Modalità di conservazione - Al ricevimento, conservare le provette e i flaconi al buio a 2 8 C. Evitare congelamento e surriscaldamento. Aprire soltanto al momento dell uso. Ridurre al minimo l esposizione alla luce. I terreni in provetta e in flacone conservati come indicato sull'etichetta sino al momento dell uso, possono essere inoculati fino alla data di scadenza e incubati per un massimo di 6 settimane. Prima dell inoculo, attendere che il terreno si porti a temperatura ambiente. Deterioramento del prodotto - Non usare il terreno se presenta tracce di contaminazione microbica, alterazione di colore, essiccamento o altri segni di deterioramento. RACCOLTA E TRATTAMENTO DEI CAMPIONI Per informazioni dettagliate sulle procedure di raccolta e trattamento dei campioni, consultare la documentazione appropriata. 2,3,8 PROCEDURA Materiale fornito - A seconda del prodotto ordinato, viene fornito uno dei terreni pronti per l uso sottoelencati. BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Gentamicin BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Gentamicin BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Gentamicin Materiali necessari ma non forniti - Terreni di coltura accessori, reagenti, colture per controllo di qualità e apparecchiature di laboratorio necessarie per questa procedura. Procedura del test - Adottare tecniche asettiche. Inoculare il terreno non appena i campioni pervengono in laboratorio. Strisciare il campione sulla superficie del terreno con un ago o un ansa da inoculo sterile. Per informazioni sul trattamento e l inoculo di campioni come tessuti, scarificazioni cutanee, capelli, unghie, ecc., consultare la documentazione appropriata. 2,3,8-12

3 Per l isolamento di funghi che causano micosi cutanee, inoculare un terreno universale non selettivo insieme a uno selettivo. Incubare a C in ambiente a umidità aumentata. Per l isolamento di funghi che causano micosi sistemiche, inoculare due serie di terreni e incubare una serie a C e l altra a 35 ± 2 C. Esaminare le colture almeno una volta alla settimana per verificare la crescita fungina e conservarle per 4 6 settimane prima di refertarle come negative. Controllo di qualità a cura dell utente 1. Verificare che i terreni non presentino segni di deterioramento come descritto in Deterioramento del prodotto. 2. Controllare le performance inoculando un campione rappresentativo di ogni terreno con colture pure di microrganismi di controllo stabili che producono reazioni note e attese. Si consigliano i ceppi di test sottoelencati. CEPPO PER TEST Blastomyces dermatitidis ATCC Candida albicans ATCC Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 Escherichia coli ATCC *Aspergillus niger ATCC RISULTATO ATTESO Crescita Crescita Crescita Inibizione (parziale - completa) Inibizione (parziale - completa) * Usare unicamente con Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide e Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol and Cycloheximide. Le procedure prescritte per il controllo di qualità devono essere effettuate in conformità alle norme vigenti o ai requisiti di accreditazione e alla prassi di controllo di qualità in uso nel laboratorio. Per una guida alla prassi di controllo di qualità appropriata, si consiglia di consultare le norme CLIA e la documentazione NCCLS in merito. RISULTATI Esaminare il terreno per verificare la crescita. L esame microscopico della colonia facilita l identificazione. LIMITAZIONI DELLA PROCEDURA Questi terreni pronti per l uso sono destinati all isolamento primario. Alcuni test diagnostici possono essere eseguiti con il terreno primario. Per i test biochimici e altre procedure di identificazione, si raccomanda tuttavia una coltura pura. Per ulteriori informazioni, consultare la documentazione appropriata. 3,8-12 Un solo terreno è raramente adatto a rilevare tutti i microrganismi potenzialmente significativi in un campione. Gli agenti in terreni selettivi possono inibire alcuni ceppi delle specie desiderate o consentire la crescita di una specie che erano destinati a inibire, soprattutto se la specie è presente in grandi quantità nel campione. Per ottenere maggiori informazioni e garantire il recupero ottimale di potenziali patogeni, i campioni messi in coltura su terreni selettivi devono pertanto essere messi in coltura anche su terreni non selettivi.

4 PERFORMANCE BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Gentamicin Prima della spedizione, vengono testate le performance di tutti i lotti di BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Chloramphenicol and Gentamicin. Campioni rappresentativi del lotto vengono inoculati direttamente strisciando l agar slant con la crescita di colonie fresche di Trichophyton mentagrophytes ATCC 9533 and Blastomyces dermatitidis ATCC prelevata dalla superficie di una piastra BBL Sabouraud Dextrose Agar. Altri campioni vengono inoculati con Candida albicans ATCC ed Escherichia coli ATCC strisciando lo slant con la crescita di colonie fresche di una piastra BBL Trypticase Soy Agar con sangue di montone al 5%. Le provette vengono incubate per un massimo di sette giorni con i tappi non completamente avvitati a C in aerobiosi. Con T. mentagrophytes, B. dermatitidis e C. albicans, si osserva una crescita moderata intensa, mentre con E. coli non si osserva alcuna crescita. DISPONIBILITÀ N. di cat. Descrizione BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar with Chloramphenicol, confezione da 10 flaconi Mycoflask BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Slants with Chloramphenicol and Cycloheximide, cartone da 100 provette di misura C BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar Slants with Chloramphenicol and Cycloheximide, cartone da 100 provette di misura A BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Slants with Chloramphenicol and Gentamicin, confezione da 10 provette di misura C BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Sheep Blood Agar Slants with Chloramphenicol and Gentamicin, confezione da 10 matracci in plastica BBL Sabouraud Brain Heart Infusion Agar with Gentamicin, cartone da 100 flaconi da 30 cc BIBLIOGRAFIA 1. Gorman, J.W SABHI, a new culture medium for pathogenic fungi. Am. J. Med. Technol. 33: Merz, W.G., and G.D. Roberts Detection and recovery of fungi from clinical specimens, p In A. Balows, W.J. Hausler, Jr., K.L. Herrmann, H.D. Isenberg, and H.J. Shadomy (ed.), Manual of clinical microbiology, 5th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 3. Haley, L.D., H. Trandel, and M.B. Coyle Cumitech 11, Practical method for culture and identification of fungi in the clinical mycology laboratory. Coordinating ed., J.C. Sherris. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 4. National Committee for Clinical Laboratory Standards Approved Guideline M29-A2. Protection of laboratory workers from occupationally acquired infections, 2nd ed. NCCLS, Wayne, Pa. 5. Garner, J.S Hospital Infection Control Practices Advisory Committee, U.S. Department of Health and Human Services, Centers for Disease Control and Prevention. Guideline for isolation precautions in hospitals. Infect. Control Hospital Epidemiol. 17: U.S. Department of Health and Human Services Biosafety in microbiological and biomedical laboratories, HHS Publication (CDC), 4th ed. U.S. Government Printing Office, Washington, D.C. 7. Directive 2000/54/EC of the European Parliament and of the Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work (seventh individual directive within the meaning of Article 16(1) of Directive 89/391/EEC). Official Journal L262, 17/10/2000, p Kwon-Chung, K.J., and J.E. Bennett Medical mycology. Lea & Febiger, Philadelphia. 9. Forbes, B.A., D.F. Sahm, and A.S. Weissfeld Bailey & Scott's diagnostic microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis. 10. Murray, P.R., E.J. Baron, M.A. Pfaller, F.C. Tenover, and R.H. Yolken (ed.) Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 11. Konenman, E.W., S.D. Allen, W.M. Janda, P.C. Schreckenberger, and W.C. Winn, Jr Mycology, p Color atlas and textbook of diagnostic microbiology, 4th ed., J.P. Lippincott Co., Philadelphia. 12. Larone, D.H Medically important fungi: a guide to identification, 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection. BD, BD Logo, BBL, Mycoflask and Trypticase are trademarks of Becton, Dickinson and Company.

5 2003 BD

6 _ÉÅíçåI=aáÅâáåëçå=~åÇ=`çãé~åó T=içîÉíçå=`áêÅäÉ pé~êâëi=j~êóä~åç=onnro=rp^ UMMJSPUJUSSP _bkbu=iáãáíéç _~ó=h=n~lçi=pü~ååçå=fåçìëíêá~ä=bëí~íé pü~ååçåi=`çìåíó=`ä~êéi=fêéä~åç qéäw=prpjsnjqtjovjom c~ñw=prpjsnjqtjorjqs