ISTRUZIONI PER L USO

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1 ISTRUZIONI PER L USO Prodotti per immunodiagnostica VITROS Confezione di reagente Anti-HCV Prodotti per immunodiagnostica VITROS Calibratore Anti-HCV Impiego previsto Unicamente per uso diagnostico in vitro. Prodotti per immunodiagnostica VITROS - Confezione di reagente Anti HCV Per la rilevazione qualitativa degli anticorpi contro il virus dell epatite C (anti-hcv) nel siero e nel plasma umani (eparina, EDTA o citrato) utilizzando i Sistemi per immunodiagnostica ECi/ECiQ VITROS, il Sistema per immunodiagnostica 3600 VITROS e il Sistema integrato 5600 VITROS. Prodotti per immunodiagnostica VITROS - Calibratore Anti HCV Da usarsi nella calibrazione dei Sistemi per immunodiagnostica ECi/ECiQ VITROS, il Sistema per immunodiagnostica 3600 VITROS e il Sistema integrato 5600 VITROS per la rilevazione qualitativa degli anticorpi contro il virus dell epatite C (anti- HCV) nel siero e nel plasma umani (EDTA, eparina o citrato). Spiegazione in breve Il virus dell epatite C (HCV) è oggi riconosciuto come l agente responsabile della maggior parte, se non di tutte, le epatiti non-a non-b (epatiti NANB) trasmesse con il sangue. Studi condotti in tutto il mondo indicano che l HCV è trasmesso attraverso sangue ed emoderivati contaminati, trasfusioni di sangue o lo stretto contatto interpersonale. La presenza dell anti-hcv indica che un individuo potrebbe essere stato infettato da HCV e potrebbe trasmettere l infezione HCV. 1 Nel test Anti-HCV VITROS sono utilizzati tre antigeni ricombinanti codificati dal virus dell epatite C. I tre antigeni ricombinanti sono c22 3, c200 e NS 5. La proteina ricombinante c22-3 è codificata dalla regione ipotetica del core del genoma dell HCV. La proteina ricombinante dell HCV c200 è codificata dalle regioni ipotetiche NS3 e NS4 del genoma dell HCV. La proteina c200 contiene la sequenza proteica c33c collegata geneticamente alla proteina c Studi hanno indicato che gli anticorpi che si sviluppano in seguito all infezione con HCV sono spesso reattivi con c22-3 e/o c33c. 2 La proteina ricombinanti HCV NS5 è codificata dalla regione ipotetica NS5 del genoma dell HCV. Una percentuale significativa di persone infettate dal virus HCV sviluppano anticorpi verso l NS5. 3 L organismo ospite per tutte e tre gli antigeni ricombinanti dell HCV è lo S. cerevisiae (lievito). Principi della procedura Il test Anti-HCV VITROS viene eseguito utilizzando la confezione di reagente Anti-HCV VITROS e i calibratori Anti-HCV VITROS sul Sistema per immunodiagnostica VITROS ECi/ECiQ, il Sistema per immunodiagnostica VITROS 3600 VITROS e il Sistema integrato 5600 VITROS utilizzando la Tecnologia Intellicheck. Viene utilizzata una tecnica immunometrica, che implica una reazione a due stadi. Nel primo stadio, l anticorpo HCV presente nel campione si lega con gli antigeni ricombinanti HCV sui pozzetti. Il campione non legato viene rimosso mediante lavaggio. Nel secondo stadio, il coniugato dell anticorpo marcato con HRP (perossidasi di rafano) (anti-igg umano monoclonale di topo) si lega all anti IgG umano catturato sul pozzetto nel primo passaggio. Il coniugato non legato viene rimosso mediante lavaggio. Il coniugato con HRP legato viene misurato mediante reazione luminescente. 4 Viene quindi aggiunto ai pozzetti un reattivo contenente substrati luminogeni (un derivato del luminolo e un sale peracido) e un agente di trasferimento di elettroni. La perossidasi da rafano nel coniugato legato catalizza l ossidazione del derivato del luminolo, dando origine a produzione di luce. L agente di trasferimento di elettroni (acetanilide sostituita) provoca un aumento del livello di luce prodotta e ne prolunga l emissione. I segnali luminosi vengono letti dal sistema. Il quantitativo di coniugato HRP legato è direttamente proporzionale alla concentrazione di anti-hcv presente. Tipo di test Sistema * incubazione Tempo di Immunodosaggio immunometrico ECi/ECiQ, 3600, 5600 * Non tutti i prodotti e i sistemi sono disponibili in tutti i paesi. Tempo per il 1 risultato Temperatura test Volume del campione di reazione 45 minuti 55 minuti 37 C 20 μl Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 1 di 12

2 ISTRUZIONI PER L USO Avvertenze e precauzioni Schema della reazione Avvertenze e precauzioni AVVERTENZA: Materiale potenzialmente infettivo Trattare come materiale infettivo. Occorre fare attenzione nel trattare materiali di origine umana. Considerare tutti i campioni come potenziale fonte di infezione. Nessun metodo di test può garantire con assoluta certezza l assenza del virus dell epatite B, dell epatite C (HCV), del virus dell immunodeficienza umana (HIV 1 + 2) o di altri agenti infettivi. I rifiuti solidi e liquidi provenienti da campioni e componenti del test devono essere manipolati, utilizzati, conservati ed eliminati in conformità alle procedure previste dalle direttive e normative nazionali in materia di sicurezza biologica (ad es. le linee guida M29 5 dell NCCLS). Il Calibratore Anti-HCV VITROS è l unico componente che contiene materiale umano derivato. Il calibratore contiene: Plasma positivo all anticorpo HCV proveniente da donatori testati individualmente e confermati negativi sulla base di metodi approvati (dosaggi immunoenzimatici) per l antigene di superficie dell epatite B e per gli anticorpi contro il virus dell immunodeficienza umana (HIV-1/HIV-2). Il plasma positivo all anticorpo HCV è stato trattato al fine di ridurre il titolo del virus potenzialmente infettivo. Tuttavia, poiché nessun metodo di dosaggio è in grado di escludere il rischio di una potenziale infezione, trattare come agente potenzialmente infettivo. Plasma negativo all anticorpo HCV proveniente da donatori testati individualmente e confermati negativi sulla base di metodi approvati (dosaggi immunoenzimatici) per l antigene di superficie dell epatite B e per gli anticorpi contro l HCV e il virus dell immunodeficienza umana (HIV-1/HIV-2). AVVERTENZA: Contiene ProClin 300 e Kathon o ProClin 200 (CAS ) 6 La confezione di reagente Anti-HCV VITROS e il calibratore Anti-HCV VITROS contengono 0,5% ProClin 300 e 2,0% Kathon or ProClin 200 rispettivamente. H317: Può provocare una reazione allergica cutanea. P280: Indossare guanti/ indumenti protettivi/proteggere gli occhi/il viso. P302 + P352: IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: lavare abbondantemente con acqua e sapone. P333 + P313: In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. P363: Lavare gli indumenti contaminati prima di indossarli nuovamente. AVVERTENZA AVVERTENZA: Contiene 2-cloroacetammide (CAS ) 6 2 di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1

3 ISTRUZIONI PER L USO Reattivi La confezione del reagente Anti-HCV VITROS contiene 0,1% 2-Cloroacetammide. H361: Sospettato di nuocere alla fertilità o al feto. H317: Può provocare una reazione allergica cutanea. P280: Indossare guanti/indumenti protettivi/proteggere gli occhi/il viso. P302 + P352: IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE: lavare abbondantemente con acqua e sapone. P333 + P313: In caso di irritazione o eruzione della pelle: consultare un medico. P363: Lavare gli indumenti contaminati prima di indossarli nuovamente. P308 + P313: In caso di esposizione o di temuta esposizione, consultare un medico. Per le schede dati di sicurezza e le informazioni di contatto OCD fare riferimento a AVVERTENZA AVVERTENZA Reattivi Contenuto del pacchetto di reagente 1 confezione dei reagenti contenente: 100 pozzetti rivestiti (antigeni ricombinanti del virus dell epatite C derivati da lievito; rivestiti a 0,41 μg/pozzetto) 18,2 ml di reagente di dosaggio - tampone con albumina di siero bovino e agente antimicrobico 20,6 ml reagente coniugato (anti-igg umana monoclonale di topo con HRP, 1,04 ng/pozzetto) in soluzione tampone con albumina di siero bovino e agente antimicrobico Manipolazione del pacchetto di reagente La confezione dei reagenti viene fornita pronta per l uso. Il pacchetto contiene reattivi liquidi omogenei che non richiedono agitazione o miscelazione prima di essere caricati nel sistema. Maneggiare il pacchetto di reattivo con cura. Evitare quanto riportato di seguito: far formare condensa sul pacchetto generare schiuma ai reattivi agitare il pacchetto Conservazione e preparazione del pacchetto di reagente Reagente Condizioni di conservazione Stabilità Sigillato Refrigerato 2 8 C data di scadenza Aperto Sul sistema Sistema acceso 8 settimane Aperto Refrigerato 2 8 C 8 settimane La confezione di reagente VITROS Anti HCV può essere utilizzata fino alla data di scadenza stampata sulla confezione se conservata e utilizzata come previsto. Non utilizzare oltre la data di scadenza indicata. Non congelare pacchetti di reagenti chiusi. I pacchetti di reagente vanno caricati direttamente dal frigorifero in modo da limitare la formazione di condensa. Conservare pacchetti di reagente chiusi in frigorifero in un apposita scatola sigillata contenente anche essiccante secco. Contenuto del calibratore 1 calibratore Anti-HCV VITROS (2 ml, plasma umano positivo ad anti-hcv in plasma umano negativo ad anti-hcv con agente antimicrobico) Scheda di calibrazione del lotto Scheda del protocollo 8 etichette con codice a barre per calibratore Manipolazione del calibratore Usare soltanto con confezioni di reagenti aventi lo stesso numero di lotto. Mescolare accuratamente capovolgendoli e portarli a C prima dell uso. Ogni pacchetto contiene un quantitativo sufficiente per almeno 6 determinazioni per ciascun calibratore. Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 3 di 12

4 ISTRUZIONI PER L USO Raccolta, preparazione e conservazione dei campioni Manipolare i calibratori in contenitori chiusi al fine di evitare contaminazione ed evaporazione. Per evitare l evaporazione, limitare il numero di calibratori presenti sul sistema. Fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Riportare a 2 8 C quanto prima dopo l uso oppure caricare soltanto il quantitativo necessario per una singola determinazione. Conservazione e preparazione del calibratore Calibratore Condizioni di conservazione Stabilità Sigillato Refrigerato 2 8 C data di scadenza Aperto Refrigerato 2 8 C 13 settimane Aperto Congelato -20 C 13 settimane Il calibratore Anti-HCV viene fornito pronto per l uso. Il calibratore VITROS Anti HCV può essere utilizzato fino alla data di scadenza stampata sulla confezione se conservato e utilizzato come previsto. Non utilizzare oltre la data di scadenza indicata. I calibratori aperti possono essere conservati congelati (è ammesso un solo ciclo di congelamento-scongelamento). Il test Anti HCV VITROS utilizza 20 μl di calibratore per ogni determinazione. I Calibratori Anti HCV VITROS possono essere utilizzati direttamente sul Sistema per immunodiagnostica VITROS e sui Sistemi integrati VITROS. In alternativa, trasferire un aliquota di ogni calibratore nel contenitore del campione (tenendo conto del volume di riempimento minimo del contenitore), che può essere identificato tramite codice a barre con l etichetta fornita. Per informazioni dettagliate sul volume minimo di riempimento di cuvette o contenitori, leggere le istruzioni operative del sistema. Il calibratore Anti HCV VITROS viene automaticamente analizzati in duplicato. Raccolta, preparazione e conservazione dei campioni Preparazione del paziente Non è necessaria alcuna preparazione specifica del paziente. Campioni consigliati Siero Plasma eparinato Plasma con EDTA Plasma citrato Nota: I risultati ottenuti con campioni plasmatici (citrato) saranno proporzionalmente inferiori a motivo della diluizione con anticoagulante liquido. Campioni non consigliati Non utilizzare campioni torbidi. La torbidità dei campioni può influire sui risultati del test. Precauzioni speciali IMPORTANTE: è stato riscontrato che alcuni sistemi di prelievo dei campioni alterano l integrità di altri analiti e test. 7 A causa della varietà dei sistemi di prelievo dei campioni disponibili sul mercato, la Ortho-Clinical Diagnostics non è in grado di fornire una statistica definitiva inerente al rendimento dei suoi prodotti con questi sistemi. controllare che i sistemi utilizzati siano compatibili con il test. Prelievo e preparazione dei campioni Prelevare i campioni utilizzando i metodi standard. 8, 9 I campioni devono essere separati completamente da tutto il materiale cellulare. Diversamente, si potranno ottenere risultati erronei. Mescolare accuratamente i campioni capovolgendoli e portarli a C prima dell uso. Il test Anti HCV VITROS utilizza 20 μl di campione per ogni determinazione. Questo dosaggio non tiene in considerazione il volume minimo di riempimento del contenitore di campioni prescelto. Per informazioni dettagliate sul volume minimo di riempimento di cuvette o contenitori, leggere le istruzioni operative del sistema. Condizioni di manipolazione e di conservazione Mettere i campioni in contenitori chiusi per evitare la contaminazione e l evaporazione. Il tempo di permanenza dei campioni all interno del sistema prima dell analisi va limitato per evitare l evaporazione. Fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Riportare a 2 8 C quanto prima dopo l uso oppure caricare il volume necessario per una singola determinazione. 4 di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1

5 ISTRUZIONI PER L USO Procedura per l esecuzione dell analisi È possibile conservare i campioni di siero e plasma per 7 giorni a 2 8 C. I campioni di siero e plasma analizzati inizialmente e dopo 4 settimane di conservazione a -20 C non hanno mostrato differenze di prestazione clinica. Evitare congelamenti e scongelamenti ripetuti. Procedura per l esecuzione dell analisi Materiali forniti Prodotti per immunodiagnostica VITROS - Confezione di reagente Anti HCV Prodotti per immunodiagnostica VITROS - Calibratore Anti HCV Materiali richiesti (non forniti) Reattivo di segnale VITROS Reattivo di lavaggio universale VITROS Materiali per il controllo qualità, come i Prodotti per immunodiagnostica VITROS Controlli Anti HCV VITROS Immunodiagnostic Products Reagent Pack Storage Box (scatola per pacchetti di reagente, facoltativa) con essiccante Istruzioni per l uso Verificare periodicamente il materiale a disposizione assicurando la corretta gestione dei reagenti e la disponibilità di lotti di reagenti di Segnale, Reagenti di Lavaggio Universale e Reagenti calibrati sufficienti a condurre le analisi programmate. Dovendo eseguire una serie di test su un singolo campione, è opportuno accertarsi che il volume di campione sia sufficiente ad effettuare i test richiesti. Per informazioni dettagliate, fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Nota: Non utilizzare i prodotti se visibilmente danneggiati. Nome predefinito del test Il nome predefinito del test che appare sul referto del paziente è Anti HCV. L abbreviazione predefinita che appare sui menu di selezione dei test e sui referti di laboratorio è. Se necessario è possibile riconfigurare. Per informazioni dettagliate, fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Calibrazione Procedura di calibrazione La calibrazione è specifica per i singoli lotti; le confezioni di reagenti e i calibratori vengono associati in base al numero del lotto. È possibile utilizzare la stessa calibrazione per pacchetti di reattivo dello stesso lotto. Per i singoli lotti di reagenti viene definita una calibrazione principale tramite l esecuzione di test multipli. Si tratta del processo mediante il quale si determinano i parametri specifici dei singoli lotti [a] che legano il valore di cut-off al segnale del calibratore. Valore di cut-off = (a x segnale di Cal 1) Assicurarsi che sia disponibile sul sistema una calibrazione principale per ogni nuovo lotto di reagente. Processare il calibratore analogamente ai campioni. Caricare una quantità sufficiente per la determinazione automatica dei duplicati. Se si usano etichette con codici a barre non occorre programmare la calibrazione; la calibrazione verrà effettuata automaticamente. All atto dell elaborazione del calibratore la validità della calibrazione viene valutata a fronte dei parametri di qualità mettendo a confronto il segnale effettivo del calibratore con i segnali attesi. Se la calibrazione è accettabile, i valori di cut-off vengono calcolati e memorizzati per l uso con le confezioni di reagenti del lotto in oggetto. Non è possibile descrivere interamente la qualità della calibrazione tramite un singolo parametro. Per determinare la validità della calibrazione si utilizzerà il rapporto della calibrazione con valori di controllo nei limiti dell accettabilità. La ricalibrazione si rende necessaria dopo un periodo di tempo predeterminato e quando viene caricato un nuovo lotto di reattivo. I risultati della calibrazione sono valutati in base a un parametro di qualità. Il mancato rispetto del parametro di qualità definito viene codificato nel rapporto di calibrazione. Per le azioni da mettere in atto in seguito ad una calibrazione non andata a buon fine, vedere le istruzioni di funzionamento del sistema. Per istruzioni sulla procedura di calibrazione consultare le istruzioni dettagliate del sistema. Frequenza di calibrazione Eseguire la calibrazione quando si cambiano la confezione del reattivo e il lotto del calibratore. Calibrare ogni 28 giorni. Calibrare dopo l esecuzione di specifiche procedure di manutenzione. Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 5 di 12

6 ISTRUZIONI PER L USO Controllo di qualità Calibrare se i risultati del controllo qualità non rientrano nell intervallo accettabile. Per ulteriori informazioni su quando calibrare, fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Tracciabilità della calibrazione La calibrazione del test anti-hcv VITROS è tracciabile contro un calibratore di riferimento interno a cui è stato assegnato un valore in grado di ottimizzare la sensibilità clinica e le performance di specificità. Modello di calibrazione I risultati sono calcolati come un segnale normalizzato, relativo ad un valore di cut-off. Durante il processo di calibrazione, un parametro specifico del lotto, viene usato per determinare un valore di cut-off valido memorizzato per il Sistema immunodiagnostico e per i Sistemi integrati VITROS. Controllo di qualità Scelta del materiale del controllo qualità Per controllare il Sistema per immunodiagnostica e i Sistemi integrati VITROS, si raccomanda l uso dei Controlli Anti HCV VITROS. Sono disponibili 2 controlli Anti-HCV VITROS (anti-hcv negativo e anti-hcv positivo). La compatibilità delle prestazioni dei liquidi di controllo in commercio con questo test va valutata prima di utilizzarli per il controllo di qualità. I materiali di controllo possono mostrare differenze rispetto ad altri metodi per l anti HCV se contengono concentrazioni elevate di conservanti, stabilizzanti o altri additivi non fisiologici o comunque se non sono costituiti da una vera matrice di campione umano. Per tutti i materiali da usarsi nel controllo qualità con il test anti HCV VITROS è necessario stabilire degli intervalli di valori specifici. Controllo di qualità La buona prassi di laboratorio richiede l esecuzione di controlli per la verifica delle prestazioni del test. I livelli dei controlli selezionati devono essere tali da verificare le concentrazioni rilevanti da un punto di vista clinico. Per verificare le prestazioni del sistema analizzare i materiali di controllo: Dopo la calibrazione Secondo le normative locali o almeno una volta nei giorni in cui viene effettuato il test Dopo l esecuzione delle procedure di manutenzione specificate. Se le procedure di controllo di qualità interne richiedono un uso più frequente dei controlli, è opportuno attenersi alle procedure previste. Analizzare i materiali di controllo qualità nello stesso modo usato per i campioni di paziente. Se i risultati dei controlli sono al di fuori degli intervalli di accettabilità, stabilire le cause prima di decidere se includere i dati nel referto per il paziente. Per raccomandazioni generali sul controllo qualità fare riferimento alle linee guida pubblicate in materia. 10 Per maggiori informazioni, fare riferimento alle istruzioni per il funzionamento del sistema. Preparazione e conservazione dei materiali del controllo di qualità Per la preparazione, la conservazione e la stabilità si rimanda alle istruzioni fornite dal produttore. Risultati I risultati vengono calcolati in modo automatico dal Sistema per immunodiagnostica e dai Sistemi integrati VITROS. Calcolo risultato I risultati sono calcolati come un segnale normalizzato, relativo ad un valore di cut-off. Durante il processo di calibrazione, un parametro specifico del lotto, viene usato per determinare un valore di cut-off valido memorizzato per il Sistema immunodiagnostico e per i Sistemi integrati VITROS. Risultato = Segnale per il campione di prova Valore di cut-off Un risultato di 1,00 indica un campione reattivo e l eventuale presenza di anti-hcv. Un risultato di <0,90 indica un campione non reattivo, negativo all anti-hcv. Un risultato di 0,90 e <1,00 indica un campione borderline. 6 di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1

7 ISTRUZIONI PER L USO Limiti della procedura Interpretazione dei risultati Un campione borderline o reattivi deve essere rianalizzato per verificarne lo stato. Prima d essere ulteriormente analizzato, il campione deve essere centrifugato in modo da rimuovere cellule, depositi cellulari e fibrina. Se i risultati del test ripetuto sono <0,90 per entrambi i replicati, il campione deve essere ritenuto negativo. Se il risultato della nuova analisi di entrambi i campioni è 0,90, il campione deve essere rianalizzato con test supplementari per confermare il risultato. Un campione ripetutamente reattivo confermato da test supplementari deve essere considerato positivo per l anti-hcv. Nel caso di risultati ripetutamente borderline, si raccomanda l esecuzione di analisi di follow-up. Limiti della procedura Interferenti noti Il test Anti-HCV VITROS è stato valutato per evidenziare eventuali interferenze compatibilmente con il protocollo CLSI EP7 11. Le sostanze incontrate comunemente sono state testate su due lotti di reattivo. Dei composti testati, nessuno ha dato come risultato l interferenza con l interpretazione clinica del test. Per l elenco delle sostanze che non hanno mostrato alcuna interferenza vedere la sezione Sostanze che non interferiscono. Altri limiti I risultati ottenuti con questo o altri test diagnostici devono essere utilizzati ed interpretati esclusivamente nel contesto del quadro clinico generale. Un risultato negativo al test non esclude la possibilità di esposizione all infezione con HCV. Gli anticorpi all HCV possono essere rilevabili in alcuni stadi dell infezione e in alcune condizioni cliniche. 12 Si è osservato che gli anticorpi eterofili presenti nei campioni di siero o plasma possono interferire con gli immunodosaggi. 13 Questi anticorpi possono essere presenti nei campioni di sangue provenienti da soggetti normalmente a contatto con animali o che sono stati curati con prodotti derivati da siero animale. I risultati che sono contraddittori con le osservazioni cliniche indicano che sono necessari altri test. Prestazioni metodologiche Sensibilità 435 campioni di pazienti precedentemente determinati positivi da un test immunoblot anti-hcv sono stati sottoposti ad analisi con il test Anti-HCV VITROS. Si è calcolato che la sensibilità di questa popolazione di campioni nel test Anti HCV VITROS corrisponde a 100% (435/435). Inoltre, sono stati sottoposti ad analisi 29 campioni rappresentativi di sieroconversione disponibili in commercio. Il test Anti- HCV VITROS ha mostrato una sensibilità di sieroconversione equivalente o maggiore per 29/29 campioni rappresentativi, laddove confrontati con i risultati resi noti da altri test disponibili in commercio. 25 campioni positivi di siero e plasma freschi ( 1 giorno dopo il prelievo) sono stati testati in un confronto diretto con un test a marchio CE disponibile in commercio. I due test hanno dato risultati comparabili. Specificità Campioni di 5374 donatori di sangue in apparente buona salute e 393 campioni clinici sono stati testati con il test Anti-HCV VITROS e con un altro test in commercio. Campioni Numero di campioni del test Inizialmente reattivi Ripetutamente reattiv Donatore Clinici Confermati positivi La specificità del dosaggio Anti-HCV VITROS per la popolazione di donatori è stata calcolata come 99,76% (5.361/5.374) basandosi su reattivi ripetuti. La specificità del dosaggio Anti-HCV VITROS per la popolazione clinica è stata calcolata come 99,75% (392/393) basandosi su reattivi ripetuti. Sottogruppi potenzialmente cross-reattivi Inoltre 161 sono stati testati con il test Anti HCV VITROS campioni dei seguenti sottogruppi potenzialmente cross reagenti: Pazienti CMV positivi, EBV positivi, HIV positivi, con altre patologie epatiche non virali, altre patologie epatiche (p.es. HBV, HAV), SLE, fattore reumatoide positivo, vaccini recenti (p.es. influenza), campioni reattivi lievito. Di tali categorie nessuno è stato riscontrato falso reattivo con il test Anti-HCV VITROS. Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 7 di 12

8 ISTRUZIONI PER L USO Gruppo di lavoro ADM Riepilogo della valutazione Precisione Sistema per immunodiagnostica VITROS ECi/ECiQ La precisione è stata valutata secondo il documento EP5 14 dell NCCLS. Due replicati, ognuno con 4 campioni, sono stati analizzati in 1 ciclo al giorno per almeno 20 giorni diversi. L esperimento è stato eseguito utilizzando 2 lotti di reagente su 2 sistemi diversi. I dati riportati sono rappresentativi delle prestazioni del prodotto. Sistema per immunodiagnostica 3600 VITROS e Sistema integrato 5600 VITROS La precisione è stata valutata secondo il documento NCCLS EP5 15 dell NCCLS. Due replicati per ogni 2 campioni di controllo e 4 pool di campioni di paziente sono stati analizzati in 2 cicli separati al giorno per almeno 20 giorni diversi. L esperimento è stato eseguito utilizzando 1 lotto di reagente su ogni sistema. I dati riportati sono rappresentativi delle prestazioni del prodotto. Sistema Sistema 1 ECi/ECiQ Sistema 2 ECi/ECiQ Risultato medio Unità = Risultato (S/C) Singola sessione * Singola calibrazione ** Singolo laboratorio *** DS CV (%) DS CV (%) DS CV (%) n. di osservazioni 0,14 0, ,3 0, ,7 0,0110 7, ,04 0,0542 2,7 0,147 7,2 0,148 7, ,76 0,0998 1,7 0,368 6,4 0,341 5, ,8 0,147 1,0 0,449 3,0 0,493 3, ,14 0, ,5 0, ,1 0, , ,02 0,0314 1,6 0,116 5,7 0,120 5, ,65 0,157 2,8 0,309 5,5 0,366 6, ,8 0,219 1,5 0,459 3,1 0,645 4, ,19 0, ,2 0,0143 7,5 0,0159 8, ,20 0,128 2,1 0,216 3,5 0,318 5, ,09 0, ,4 0, ,3 0, , ,87 0,0187 2,1 0,0600 6,9 0,0695 8, ,35 0,0388 2,9 0,0757 5,6 0,098 7, ,51 0,0393 1,6 0,119 4,7 0,166 6, ,16 0, ,5 0, ,1 0,0110 6, ,79 0,111 1,9 0,239 4,1 0,318 5, ,08 0, ,1 0, ,2 0, , ,80 0,0184 2,3 0,0628 7,9 0,0573 6, ,24 0,0321 2,6 0,0644 5,2 0,0684 5, ,36 0,0398 1,7 0,0799 3,4 0,115 4, * Intra-ciclo (ripetibilità). Precisione fra duplicati, con media ottenuta su tutti i cicli. ** Intra-calibrazione. Precisione totale, con componenti ponderati di variazione intra-ciclo, fra un ciclo e l altro e da un giorno all altro. *** Intra-laboratorio. Misura dell effetto della ricalibrazione sulla precisione totale, calcolata nell ambito di un singolo lotto di reattivo, utilizzando dati di almeno 4 calibrazioni. Sostanze che non interferiscono L effetto di Birilubina, Emoglobina e Trioleina è stato analizzato in un campione positivo anti-hcv e in un campione negativo anti-hcv. Per ogni sostanza, la concentrazione maggiore, considerata come non influente nell interpretazione clinica dei risultati, è mostrata nella tabella seguente. n. di giorni Composto Concentrazione Bilirubina 0,342 mmol/l 20 mg/dl Emoglobina 0,310 mmol/l 500 mg/dl Trioleina 33,9 mmol/l 3000 mg/dl Gruppo di lavoro ADM Riepilogo della valutazione Il test Anti-HCV VITROS è stato valutato dal gruppo di lavoro ADM. Sono stati analizzati 450 campioni di 246 pazienti infetti da genotipi diversi del virus dell epatite C e 50 campioni dal pannello SFTS HCV, compresi 27 campioni reattivi all RNA. Il test Anti-HCV VITROS ha dimostrato buona sensibilità alla rilevazione di sieroconversione precoce e per lo screening di altre categorie di campioni reattivi, comprese quelle che evidenziano una reattività isolata e provenienti da portatori cronici. 8 di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1

9 ISTRUZIONI PER L USO Dichiarazione di licenza È stata analizzata una popolazione di 2018 campioni di sangue di donatori con il test Anti-HCV VITROS. Otto campioni hanno restituito ripetitivamente risultati reattivi, dei quali 1 è stato confermato come reattivo e 6 sono stati trovati negativi da altri test. Non è stato possibile analizzare il risultato del campione restante (NS3 indeterminata, PCR negativo). La specificità per il test VITROS Anti-HCV era approssimativamente del 99,70%. Dichiarazione di licenza Gli antigeni ricombinanti HCV utilizzati nel test anti-hcv VITROS sono preparati secondo licenza statunitense da Grifols Diagnostic Solutions Inc., in conformità con un accordo condiviso di produzione. Bibliografia 1. Choo Q-L, Weiner AJ, Overby LR, Kuo G, Houghton M. Hepatitis C virus : the major causitive agent of viral non-a, non- B hepatitis. Br Med Bull 46: (1990). 2. Van der Poel CL, Cuypers HTM, Reesink HW et al. Confirmation of hepatitis C virus infection by new four antigen recombinant immunoblot assay. Lancet 337: (1991). 3. Chien D, Choo Q-L et al. Diagnosis of hepatitis C virus (HCV) infection using an immunodominant chimeric polyprotein to capture circulating antibodies: reevaluation of the role of HCV in liver disease. Proc Natl Acad Sci 89: 10,011 10,015 (1992). 4. Summers M et al. Luminogenic Reagent Using 3-Chloro 4-Hydroxy Acetanilide to Enhance Peroxidase/Luminol Chemiluminescence. Clin Chem. 41:S73; CLSI. Protection of Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline - Fourth Edition. CLSI document M29-A4. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; Regulation (EC) No 1272/2008 of the European Parliament and of the Council of 16 December 2008 on classification, labelling and packaging of substances and mixtures, amending and repealing Directives 67/548/EEC and 1999/45/EC, and amending Regulation (EC) No 1907/ Calam RR. Specimen Processing Separator Gels: An Update. J Clin Immunoassay. 11:86 90; CLSI. Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture; Approved Standard Sixth Edition. CLSI document H3-A6 (ISBN ). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania , USA NCCLS. Procedures and Devices for the Collection of Diagnostic Capillary Blood Specimens; Approved Standard Fifth Edition. NCCLS document H4-A5 [ISBN ]. NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA USA, CLSI. Statistical Quality Control for Quantitative Measurements: Principles and Definitions; Approved Guideline - Third Edition. CLSI document C24 A3 [ISBN ]. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA USA, CLSI. Interference Testing in Clinical Chemistry; Approved Guideline Second Edition. CLSI document EP7-A2 (ISBN ). CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, Pennsylvania USA, Lee Dong-Soon et al. Significance of Anti-E2 in the Diagnosis of HCV Infection in Patients on Maintenance Hemodialysis. J American Society of Nephrology V7, No.11, (1996). 13. Levinson SS. The Nature of Heterophilic Antibodies and Their Role in Immunoassay Interference, J Clin Immunoassay 15: (1992). 14. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second Edition. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Order Code EP5-T2; NCCLS. Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. NCCLS document EP5 A2 [ISBN ]. CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA USA, Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 9 di 12

10 ISTRUZIONI PER L USO Glossario dei simboli Glossario dei simboli Revisioni Data revisione Versione Modifiche tecniche apportate* Dichiarazioni sui brevetti: modificato Novartis Corporation in Grifols Diagnostic Solutions Inc. Indirizzo: logo CHIRON modificato in logo GRIFOLS Avvertenze e precauzioni: modificato Kathon in Kathon o ProClin 200 Aggiornato indirizzo della sede legale del produttore Avvertenze e precauzioni: modificato 'metodi approvati dalla FDA' in 'metodi approvati' 10 di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1

11 ISTRUZIONI PER L USO Revisioni Data revisione Versione Modifiche tecniche apportate* Avvertenze e precauzioni: aggiunto riferimento bibliografico aggiornate Dichiarazioni su pericoli e precauzioni per l'allineamento con le nuove schede dati di sicurezza aggiunti simboli del sistema armonizzato internazionale per conformità alle normative di classificazione, etichettatura e imballaggio (CLP) Preparazione e conservazione dei calibratori: chiarimento sulla temperatura di conservazione congelati Bibliografia: aggiornato M29 aggiunto riferimento bibliografico Glossario dei simboli: aggiunti Simboli armonizzati globalmente per la conformità con le normative sulla classificazione, l'etichettatura e l'imballaggio (CLP) Glossario dei simboli: aggiunta la Data di produzione Sensibilità: aggiornata la frase per evidenziare la conformità alle specifiche tecniche comuni revisionate in tema di dispositivi medici per la diagnosi in vitro (2009/886/EC) Contenuto del pacchetto di reagente: testo aggiornato Glossario dei simboli: testo aggiornato Finalità d uso Calibratore : testo aggiornato Conservazione e preparazione della confezione di reagente: testo aggiornato Controllo di qualità: testo aggiornato Nuovo formato che unisce i documenti seguenti in un unico documento: Confezione di reagente Anti HCV (GEM1240_EN_XUS), versione 1.0 Calibratore Anti HCV (GEMC240_EN_XUS), versione 1.0 Informazioni aggiunte per il Sistema per immunodiagnostica 3600 VITROS e Sistema integrato 5600 VITROS Dichiarazioni sui rischi e la sicurezza aggiornate Bibliografia: aggiornata Glossario dei simboli: aggiornato (GEM1240) CHIRON Corporation cambiato in Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc (GEMC240) Nuovo formato, tecnicamente equivalente a PIGEMC240/102.0 con le seguenti variazioni minori: Sezione Simboli usati sostituita dalla tabella Glossario dei simboli Aggiunta la casella per la firma della sezione Revisioni (GEM1240) Nuovo formato, tecnicamente equivalente a PIGEM1240/101.0 con le seguenti variazioni minori: Sezione Simboli usati sostituita dalla tabella Glossario dei simboli Aggiunta la casella per la firma della sezione Revisioni * Le barre delle modifiche indicano la posizione del testo aggiornato rispetto alla versione precedente del documento. Quando le presenti Istruzioni per l'uso saranno sostituite da quelle aggiornate, apporre la propria firma e la data e conservare in base alle direttive locali o ai regolamenti del laboratorio. Firma Data Versione 9.1 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT 11 di 12

12 ISTRUZIONI PER L USO Revisioni Condizioni di fornitura: tutte le forniture sono regolate dai termini e dalle condizioni di vendita di Ortho-Clinical Diagnostics e dei suoi distributori. Copie di tali condizioni sono disponibili su richiesta Ortho-Clinical Diagnostics Felindre Meadows Pencoed Bridgend CF35 5PZ United Kingdom VITROS è un marchio di Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. Ortho-Clinical Diagnostics, Inc., di 12 Pubb. n. GEM1240_XUS_IT Versione 9.1