Risonanza Magnetica Nucleare NMR

Risonanza Magnetica Nucleare NMR

Numeri quantici di spin di alcuni nuclei Gli isotopi più abbondanti di C e O non hanno spin Element 1 H 2 H 12 C 13 C 14 N 16 O 17 O 19 F N.ro quantico di Spin 1/2 1 0 1/2 1 0 5/2 1/2 ( I ) No. di stati di Spin 2 3 1 2 3 1 6 2 Elementi che hanno o massa dispari o numero atomico dispari presentano spin nucleare. Il numero di stati di spin è 2I + 1, dove I è il numero quantico di spin.

Risonanza Nucleare Assorbimento di energia da parte dei nuclei che ruotano

Livelli di energia nucleare di spin N In un forte campo magnetico (B o ) i due stati di spin hanno un diverso contenuto energetico -1/2 opposto +1/2 B o S allineato

La differenza di energia dipende da B o - 1/2 degenerato se B o = 0 E = kb o = hν + 1/2 B o Forza di campo applicata aumenta

L equazione di Larmor!!! E = kb o = hν può essere trasformata in frequenza della Radiazione incidente che determina la transizione ν = γbγ 0 2π 2π B o γ è una costante caratteristica di ogni nucleo (H, C, N, etc) Rapporto giromagnetico γ Forza del campo magnetico

Frequenza di Risonanza di alcuni nuclei Isotopo Abbondanza B o (Tesla) Frequenza(MHz) γ(radianti/tesla) 1 H 99.98% 1.00 42.6 267.53 1.41 60.0 2.35 100.0 7.05 300.0 13 C 1.108% 1.00 10.7 67.28 2.35 25.0 7.05 75.0

Spettro NMR protonico

Spettro NMR del Fenilacetone O CH 2 C CH 3 Ogni gruppo di protoni equivalenti risuona in una posizione diversa. Possiamo dire quanti diversi tipi di protoni ci sono attraverso l integrazione dei segnali

Alcune generalizzazioni I solventi per NMR contengono deuterio Il riferimento è il Tetrametilsilano (TMS) Gli spostamenti chimici (Chemical Shift) in Hz dal TMS variano in relazione alla frequenza dello spettrometro! I valori Delta (δ) sono independenti dalla frequenza dello spettrometro (ppm)

Picchi vengono misurati in relazione al TMS Piuttosto di misurare l esatta posizione di risonanza di un certo picco, misuriamo quanto è spostato dal TMS a campi bassi. CH 3 CH 3 Si CH 3 CH 3 Composto di riferimento tetrametilsilano TMS Protoni altamente schermati, Risuonano a campi alti. n shift in Hz Campi bassi TMS 0 Originariamente si pensava che non ci fossero protoni a campi più alti del TMS

A FREQUENZE PIU ELEVATE CORRISPONDONO SPOSTAMENTI (shift) MAGGIORI Lo spostamento (chemical shift) osservato per un certo protone in Hz dipende anche dalla frequenza dello strumento utilizzato Frequenze più alte = shift maggiore in Hz. n shift in Hz Campi bassi TMS 0

IL CHEMICAL SHIFT (spostamento chimico) Gli spostamenti dal TMS in Hz sono maggiori in strumenti a RF alte (300 MHz, 500 MHz) rispetto a quelli a RF basse (100 MHz, 60 MHz). Possiamo rendere lo spostamento indipendente dal campo applicato nel seguente modo: parti per milione chemical shift = δ = shift in Hz Frequenza dello spettrometro in MHz = ppm Questa operazione fornisce un numero che non dipende dallo Strumento utilizzato Un certo protone in una molecola risuonerà sempre allo stesso valore di chemical shift (valore costante).

Il Chemical Shift

Punti principali elettroni schermano i nuclei elettronegatività: gli elettroni vengono attratti e i nuclei sono deschermati Campi bassi (deschermati) = parte sinistra dello spettro Campi alti (schermati) = parte destra dello spettro I valori di delta aumentano da dx a sx!

I PROTONI DIFFERISCONO IN BASE ALLA SCHERMATURA Tutti i diversi protoni in una molecola presentano una diversa schermatura Rispondono in modo diverso al campo magnetico applicato e risuonano a diversi valori di cs nello spettro. Questo è il motivo per cui uno spettro NMR fornisce informazioni utili (tipi diversi di protoni risuonano a valori di cs noti e prevedibili). Campi bassi I protoni meno schermati risuonano qui SPETTRO Campi alti Protoni altamente schermati risuonano qui.

Chemical shift dei principali tipi di protoni acidi COOH aldeide CHO benzene CH alchene =C-H C-H dove C è legato ad un atomo electronegativo X-C-H CH su C vicino a pi legami X=C-C-H alifatic C-H 12 10 9 7 6 4 3 2 0

Tavola di correlazione NMR Campi bassi DESCHERMATI CHCl 3, H -OH -NH Campi alti SCHERMATI TMS 12 11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 δ (ppm) RCOOH RCHO C=C H CH 2 F CH 2 Cl CH 2 Br CH 2 I CH 2 O CH 2 NO 2 CH 2 Ar CH 2 NR 2 CH 2 S C C-H C=C-CH 2 CH 2 -C- O C-CH-C C C-CH 2 -C C-CH 3

DESCHERMATURA E ANISOTROPIA Sono quattro i principali fattori che determinano la posizione (sulla scala ppm ) dei principali tipi di protoni. 1. Deschermatura per la presenza di atomi elettronegativi 2. Ibridizzazione 3. Campi di anisotropia di solito dovuti a elettroni π nella molecola. 4. Deschermatura dovuta a legami H.

Deschermatura da atomi elettronegativi

DESCHERMATURA DOVUTA A ELEMENTI ELETTRONEGATIVI δ- δ+ Cl C Elemento elettronegativo H δ- δ+ Il Cloro descherma il protone, diminuendo la densità elettronica del C, che a sua volta diminuisce la densità elettronica dell idrogeno deschermando quindi il protone. deschermati protoni risuonano a campi bassi Altamente schermati protoni risuonano a campi alti La deschermatura sposta la risonanza protonica a campi bassi

Chemical Shift e Electronegatività Dipendenza del Chemical Shift di CH 3 X dall Elemento X Composto CH 3 X Elemento X Electronegatività di X Chemical shift δ CH 3 F CH 3 OH CH 3 Cl CH 3 Br CH 3 I CH 4 (CH 3 ) 4 Si F O Cl Br I H Si 4.0 3.5 3.1 2.8 2.5 2.1 1.8 4.26 3.40 3.05 2.68 2.16 0.23 0 Più deschermato La deschermatura aumenta all aumentare dell elettronegatività dell atomo X TMS

Effetto della sostituzione Più schermato CHCl 3 CH 2 Cl 2 CH 3 Cl 7.27 5.30 3.05 ppm L effetto aumenta all aumentare del numero di atomi elettronegativi X Più deschermati -CH 2 -Br -CH 2 -CH 2 Br -CH 2 -CH 2 CH 2 Br 3.30 1.69 1.25 ppm L effetto diminuisce all aumentare della distanza

LEGAME IDROGENO

IL LEGAME IDROGENO DESCHERMA I PROTONI R Il chemical shift dipende dall entità del legame idrogeno. O H O R H H O R Gli alcoli variano il chemical shift da 0.5 ppm (OH libero) a circa 5.0 ppm (molti legami H). Il legame idrogeno allunga il legame O-H e riduce la densità degli Elettroni di valenza del protone Che viene quindi deschermato e spostato a campi bassi nello spettro NMR

ALCUNI ESEMPI. R O C O H H O C O R Gli acidi carbossilici hanno forti Legami idrogeno formano dimeri Negli acidi carbossilici l OH risuona a campi molto bassi 10-12 ppm. H 3 C O O H O Nel salicilato di metile, che presenta un forte legame H intramolecolare, l O-H risuona a circa 14 ppm.

Strumento classico: NMR ad onda continua In uso prima del 1965;

Spettrometro NMR a 60 MHz semplificato RF (60 MHz) Oscillatore Transmitter hν absorption signal RF Detector Ricevitore Registratore MAGNET MAGNET N S ~ 1.41 Tesla (+/-) pochi ppm Probe

Strumento Moderno: NMR a trasformata di Fourier FT-NMR Richiede un calcolatore

ECCITAMENTO PULSATO N RF impulso a Banda larga (Broadband) Contiene un range di frequenze (ν 1... ν n ) ν 2 ν 1 O CH 2 C ν 3 CH 3 S Tutti gli idrogeni vengono eccitati simultaneamente con un singolo impulso

Spettro NMR del Fenilacetone O CH 2 C CH 3 Ogni gruppo di protoni equivalenti risuona in una posizione diversa. Possiamo dire quanti diversi tipi di protoni ci sono attraverso l integrazione dei segnali.

Integrazione

INTEGRAZIONE DI UN SEGNALE L intensità di un segnale è proporzionale al numero di idrogeni che vi contribuiscono. Integrazione = determinazione dell area sottesa ad un picco

Benzil Acetato La linea dell integrale rappresenta una quantità proporzionale al numero di H Linea dell integrale 55 : 22 : 33 = 5 : 2 : 3 Rapporto tra le altezze

Benzil Acetato (FT-NMR) Actually : 5 2 3 58.117 / 11.3 = 5.14 21.215 / 11.3 = 1.90 33.929 / 11.3 = 3.00 CH 2 O O C CH 3 Integrazione digitale CH 3 33.929 / 3 = 11.3 per H Gli strumenti moderni riportano l integrale come un numero. Gli integrali sono attendibili con un 10% di margine.