Validazione di metodi microbiologici (5.4.5) UNI CEI EN ISO/IEC 17025:2005 p.to REQUISITI TECNICI della norma ISO17025
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- Michela Testa
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1 CORSO ACCREDIA E ISTITUTO SUPERIORE DI SANITA Le dsposzon n matera d scurezza almentare applcate a Laborator Accredtat novembre 011 REQUISITI TECNICI della norma ISO1705 Valdazone, stma dell ncertezza e asscurazone del dato analtco nel settore della mcrobologa degl alment n base alla 1705 Valdazone d metod mcrobologc (5.4.5) Dno Spolaor UNI CEI EN ISO/IEC 1705:005 p.to Scopo: confermare con esame e apporto d evdenze oggettve che requst per l utlzzazone prevsta sano soddsfatt Quando: a. metod non normalzzat; b. progettat dal laboratoro; c. normalzzat utlzzat fuor Campo d Applcaz.; d. estenson e modfche d metod normalzzat UNI CEI EN ISO/IEC 1705:005 p.to Tecnche utlzzabl per determnare le prestazon d un metodo (una o n combnazone) Utlzzo d Materal d Rfermento (MR/MRC) Confronto de rsultat ottenut con altr metod Confront nterlaboratoro Valutazone sstematca de fattor che nfluenzano rsultat Stma dell ncertezza d msura de rsultat D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 3 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 4 1
2 UNI CEI EN ISO/IEC 1705:005 p.to LA VALIDAZIONE COMPRENDE Specfca de requst del metodo Determnazone caratterstche del metodo Controllo che requst sano soddsfatt Dcharazone relatva alla valdtà (procedure utlzzate, rsultat ottenut, donetà uso prevsto) Resam regolar (verfca che requst contnuno ad essere rspettat) VALIDAZIONE DI UN METODO DI PROVA INTERNO La valdazone è sempre un blanco fra cost, rsch e possbltà tecnche Alcune rflesson Convene al laboratoro? Responsabltà legal? D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 5 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 6 REGOLAMENTO (CE) n. 073/005 su crter mcrobologc applcabl a prodott almentar Metod d prova alternatv Artcolo 5 L mpego d metod d anals alternatv è accettable quando tal metod sono valdat n base al metodo d rfermento d cu all allegato I e se è utlzzato un metodo propretaro certfcato da una terza parte n base al protocollo defnto nella norma EN/ISO o ad altr protocoll analogh accettat a lvello nternazonale. Organsm d valdazone AFNOR Valdaton McroVal NordVal D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 7 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 8
3 Valdazone metod NordVal c/o NMKL NordVal c/o Natonal Veternary Insttute P.O.Box 750 Sentrum N 0106 Oslo - Norway Prce-lst Updated: Applcaton fee for one method coverng two or more matrx groups EUR Applcaton fee for one method coverng one matrx group and extenson of an approved method wth new matrces EUR ISO CD 17994:004 Water qualty -- Crtera for establshng equvalence between mcrobologcal methods Qualtà dell acqua Crter per la defnzone d equvalenza fra metod mcrobologc D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 9 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 10 UNI EN ISO 16140:005 e ISO 16140:003/Amd1:011 Mcrobology of food and anmal feedng stuffs Protocol for the valdaton of alternatve methods UNI EN ISO 16140:005 Mcrobologa degl alment e mangm per anmal PROTOCOLLO PER LA VALIDAZIONE DI METODI ALTERNATIVI PROTOCOLLO DI VALIDAZIONE Fase 1. Confronto d metodo alternatvo con un metodo d rfermento (Esamnare 0 alquote per cascun tpo d almento, per entramb metod (rfermento e alternatvo). TOTALE: almeno 60 rsultat /categora d almento/ da cascun metodo) Fase. Studo nterlaboratoro per cascuno de due metod Le due fas possono essere condotte n parallelo D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 11 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 1 3
4 ISO/IEC Verfca prestazone metodo Il laboratoro deve confermare che può correttamente esegure metod normalzzat prma d metterl n opera per le prove e/o le tarature. Nel caso d cambamento del metodo la conferma deve essere rpetuta. Stablre modaltà e frequenza della verfca (es. rpetbltà, materal rfermento, crcut profcency test) REQUISITI TECNICI della norma ISO1705 Stma dell ncertezza d msura (5.4.6) I laborator d prova devono avere e devono applcare delle procedure per stmare l ncertezza d msura. In cert cas la natura de metod d prova può escludere l calcolo rgoroso dell ncertezza d msura, valdo dal punto d vsta metrologco e statstco. In quest cas almeno tentare d dentfcare tutte le component dell ncertezza e fornre una stma ragonevole D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 13 ISO 718:007 MICROBIOLOGY OF FOOD AND ANIMAL FEEDING STUFFS GENERAL REQUIREMENTS AND GUIDANCE FOR MICROBIOLOGICAL EXAMINATION Scopo e Campo d applcazone - Guda per laborator d mcrobologa - Applcable ad alment e mangm, all ambente d produzone e manpolazone degl alment. CALCOLO DEL CONTEGGIO (ISO 718) Un grande mpegno de laborator per calcolare l ncertezza d msura ma asscuramoc prma d applcare correttamente la formula d calcolo del conteggo! C N = V(n 0,1n 1 + )d D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 15 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 16 4
5 ISO / TS 19036:006 Mcrobologa degl alment Lnea Guda per la stma dell ncertezza d msura per le determnazon quanttatve ISO / TS 19036:006 Campo d Applcazone - Prodott destnat al consumo umano ed anmale - Campon ambental (aree d produzone e manpolazone alment) NON APPLICABILE - Prove n MPN - Prove quanttatve con bassa concentrazone d m.o. ( Amd1:009 - Prove QUALITATIVE elaborazone d un nuovo documento D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 17 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 18 SCARTO TIPO DI RIPRODUCIBILITA (s R ) SCARTO TIPO DI RIPRODUCIBILITA (s R ) Modaltà d Calcolo n ordne d preferenza QUANDO CALCOLARLO? 1 th - s R ntralaboratoro (Rproducbltà ntralaboratoro) th - s R d un metodo (dat d valdazone nterlaboratoro) Per cascun tpo d m.o. target (o grupp) Per cascuna matrce (o grupp) Per cascun metodo 3 th - s R da profcency tral, nterlaboratoro D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 19 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 0 5
6 Problema: qual matrc? Secondo crter d tpo fsco Categora I Lqud e polver (es. latte, latte d cocco, acqua, latte essccato, casenat, cpolle n polvere) Categora II Sold ben mscelat (es. carne macnata, carne separata meccancamente, salum, crushed meat, panna montata, gelato al latte, crema d soa, ecc.) Categora III Sold d pccola tagla (es. prezzemolo/fungh essccat, carote e sedano rapa grattugat, tagloln secch, nsalata IV gamma, gamberett, cozze, cereal, mangm, noccole trtate) Categora IV Altr sold (carn non trtate, formagg, prodott d pastccera, pesce, patt pront, proscutto,) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 1 U = S R Incertezza estesa U UGUALE PER TUTTI? E caratterstca d un laboratoro E correlata ad un dato ottenuto n specfche condzon (operator, apparecchature, reagent, ) Non è caratterstca d un metodo analtco d per sé, ndpendentemente dal laboratoro che la calcola (legame metodo-laboratoro) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco Stesso campone (nstable) analzzato da due operator dvers Stesso campone (stable) analzzato dallo stesso operatore n gorn dvers GIORNO 1 GIORNO contemporaneamente D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 3 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 4 6
7 s R DI UN METODO valutazone INTRALABORATORIO s R DI UN METODO Valutazone INTRALABORATORIO Protocollo - Matrce (realmente contamnate /m.o. stressat) - Sottocampone (utlzzato per prelevare la porzone per test) - Almeno 10 campon per cascuna matrce - Dvers gorn n un lungo perodo d tempo Protocollo - Campon con dvers lvell d contamnazone (quell usual del lab) - Calcolo S R non per lvello - Trasformazone log de dat (stablzzazone della varanza d rproducbltà / lvell d contamnazone (<10 ufc escluse!) - Contamnazone artfcale (se rchesta): attenzone al nuovo elemento d varabltà (smulare l pù possble la contamnazone naturale n termne d m.o. stressat / d competzone / background mcroflora ) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 5 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 6 s R INTRALABORATORIO s R INTRALABORATORIO s R = n = = 1 (loga logb ) n a e b = prmo e secondo rsultato della prova sullo stesso campone (loga -logb ) = dfferenza tra rsultat, espress n logartmo decmale n = numero d prove esegute n doppo (n 10) = 1,, n Radce della Sommatora/n D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 7 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 8 7
8 ISO /TS 19036:006 /Amd1:009 UNI ENV ISO 13843:003 p la ISO 19036:006/Amd1:009 parte dall assunto che la stma dell ncertezza d msura basata sul calcolo dello scarto tpo d rproducbltà, lmtata alle conte superor a 10 UFC/pastra, trascur l errore casuale dato dalla dstrbuzone d Posson. L ncertezza casuale aumenta rapdamente con la rduzone della conta delle colone. Nell ntervallo d conteggo sotto a dec crca, che è d consderevole nteresse per la salute pubblca, le sngole msurazon sono così mprecse che possono essere a malapena caratterzzate come mglor che semquanttatve. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 9 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 30 ISO /TS 19036:006 /Amd1: Concetto delle basse conte 180 U=0,0 Se ΣC > C lm ncertezza estesa calcolata con scarto tpo d rproducbltà U = S R Valore C lm Area d applcazone dell'amd 1:009 U=0,5 U=0,30 Se ΣC C lm vengono combnate le due component U = s R + 0,18861 C 60 U=0,35 U=0,40 40 U=0,45 U=0, Somma delle colone n pastra D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 31 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 3 8
9 INCERTEZZA DI MISURA (ISO/TS 19036:006 ) 3. COME va espressa? - Rsultato ed Intervallo n log 10 5,0 log ± 0, log(ufc)/g oppure 5,0 log [ 4,8, 5, ] - Rsultato ed Intervallo n Valore naturale UFC/g [ , ] 10 5 UFC/g [ 6,3 x 10 4, 1,6 x 10 5 ] - Intervallo n percentuale UFC/g [ %, % ] INCERTEZZA DI MISURA (ISO/TS 19036:006 ) 4. DOVE va espressa? Sul R. d P.: come ncertezza estesa U assocata al rsultato nella sua stessa forma (log, n ) oppure espressa n percentuale (%) Defnt: l Lvello d probabltà p ed l Fattore d copertura k Grad d Lbertà: N.A. Recupero: N.A. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 33 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco UFC / g UFC stmate / g m.o. nferor a 1/d UFC/g Espressone del rsultato e ncertezza d msura m.o. present ma nferor a 4/d UFC/g Ma se la matrce è ACQUA? D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 35 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 36 9
10 CALCOLO DELL INTERVALLO DI FIDUCIA UNI ENV ISO 13843:003. Qualtà dell acqua Guda per la valdazone d metod mcrobologc UNI 10674:00. Acque destnate al consumo umano Guda generale per determnazon mcrobologche ISO 8199:005 Water qualty General gudance on the enumeraton of mcro-organsms by culture DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 901:010 Water qualty The varablty of test results and the uncertanty of measurement of mcrobologcal enumeraton methods D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 37 ISO 8199:005 Water qualty General gudance on the enumeraton of mcro-organsms by culture Calcolo ntervallo d fduca (IF) per Z 0 per Z<0 Z Z C s ± 95% IF = ± V Vtot V tot Z Z C IF ± 95% = ± V s s Vtot Vtot dove Cs è la stma del numero espresso come UFC (conteggo) nel volume d rfermento Vs. Z è la somma delle colone contate sulle pastre o membrane dervate dalle dluzon consderate nel calcolo del rsultato Vtot è l volume totale del campone orgnale dstrbuto nelle pastre sottoposte a conta. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 38 s DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 901:010 Water qualty The varablty of test results and the uncertanty of measurement of mcrobologcal enumeraton methods Breve descrzone de dvers approcc nazonal (francese, norvegese, nglese e neozelandese) Presentazone d due possbl approcc: Bottom-up (ISO 19036) e step-by-step Crter d scelta tra approcc Esemp applcatv Alternatve alla ISO/TS 19036? Stma delle sngole component secondo l approcco del MIKES D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 39 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 40 10
11 STIMA DELLE PRINCIPALI COMPONENTI DELL INCERTEZZA NELLE PROVE MICROBIOLOGICHE Approcco per Sngole Component Valutazon prelmnar Dstrbuzone casuale delle cellule mcrobche Volume d noculo Dluzon Lettura del rsultato Calcolo spermentale della rpetbltà d dosaggo delle ppette (scarto tpo del volume d noculo) Calcolo spermentale della rpetbltà d dosaggo del dluente (scarto tpo del volume d dluente) Calcolo spermentale della rpetbltà d conteggo degl operator (ncertezza d lettura delle pastre) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 41 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 4 CALCOLO DELLE COMPONENTI D INCERTEZZA Incertezza dovuta alla Dstrbuzone d Posson Incertezza d lettura delle pastre Incertezza d conteggo dovuta alla lettura delle capsule Incertezza meda d conteggo d capsule n sngolo Rlettura n ordne casuale delle capsule Breve lasso d tempo tra le due letture Almeno una trentna d capsule D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 43 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 44 11
12 CALCOLO DELLE COMPONENTI D INCERTEZZA Incertezza dovuta al dosaggo degl nocul CALCOLO DELLE COMPONENTI D INCERTEZZA Incertezza dovuta al fattore d dluzone D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 45 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 46 CALCOLO DELLE COMPONENTI D INCERTEZZA Eventuale Incertezza d conferma delle colone Component dell ncertezza Component ncertezza Dstrbuzone d Posson u(z)/z Volume totale noculato u(v)/v Fattore d dluzone u(f)/f Lettura pastre u(l)/l Conferma colone u(p)/p Quando contrbuscono all ncertezza? Comune a tutt contegg (d facle calcolo, è nversamente proporzonale al numero d colone contate) Comune a tutt contegg è legata alla rpetbltà d dosaggo degl nocul. E rchesta una valutazone spermentale della rpetbltà del dosaggo con le ppette. In presenza d dluzon (è legata alla numerostà delle dluzon allestte e alla rpetbltà d dosaggo de volum del dluente) E rchesta una valutazone spermentale della rpetbltà del dosaggo del dluente. Comune a tutt contegg, rchede una prelmnare valutazone della rpetbltà de contegg da parte degl operator. Solo se rchesta la conferma delle colone. In tale caso comprende e qund sosttusce u(z)/z (dstrbuzone d Posson) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 47 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 48 1
13 Calcolo fnale dell ncertezza d msura basata sulla stma delle component d ncertezza dell anals Metodo semplfcato Basato sul calcolo del parametro G Incertezza relatva del rsultato della prova Prove che non prevedono la conferma [ u(z)/z] + [ u(v)/v] + [ u(f)/f] [ u(l)/l ] u(y)/y = + NON rchede l calcolo delle sngole component d ncertezza, ma tene conto delle component date da - dstrbuzone d Posson - ncertezza de volum d noculo - ncertezza d lettura delle pastre Incertezza d msura = Rsultato x Incertezza relatva u(y)/y G n 1 n = z = 1 z ln v Z ln Z V D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 49 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 50 Metodo semplfcato Dverse combnazon d conta d colone Medesmo conteggo mcrobco per untà d campone In cu [ u(x)/x] [ u(f)/f] u(y)/y = + Prova Dluzon Rsultato (UFC) G n 1 n 1 Incertezza estesa U Lmte nferore Lmte superore n ,5 x ,05 ± ,4 x 10 7,6 x 10 7 [ ( x ) / x ] G n 1 1 u = n 1 Z Il metodo semplfcato permette d valutare l ncertezza relatva che nclude tutte le component casual che nfluenzano le conte. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 51 n ,5 x ,99 ± ,3 x 10 7,7 x 10 7 n ,5 x ,86 ± ,0 x ,0 x 10 7 n ,5 x ,57 ± ,8 x , x 10 7 Prove n. 1,, 3 e 4,5 x 10 7 ISO ,3 x 10 7,7 x 10 7 Medante calcolo secondo ISO ne dvers cas s sarebbe ottenuto lo stesso ntervallo d fduca D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 5 13
14 UFC Vantagg del metodo semplfcato Metodo semplfcato: medesmo conteggo Incertezza funzone della qualtà del dato analtco 3,3E+07 3,1E+07,9E+07,7E+07,5E+07,3E+07,1E+07 1,9E+07 1,7E+07 Iso ,05 0,99 4,86 11,57 Indce G Lm.nf. Lm.sup. Rsultato DOCUMENTI d RIFERIMENTO UNI CEI EN ISO/IEC 1705:000 Requst general per la competenza de laborator d prova e d taratura UNI CEI ENV 13005:000 - Guda all espressone dell ncertezza d msura MIKES - Centre for metrology and accredtaton, Publcaton J4/003, Uncertanty of quanttatve determnatons derved by cultvaton of mcroorgansms, Seppo I. Nemela ISO 718:1996/Amd. 1:001 - Mcrobology of food and anmal feedng stuffs General rules for mcrobologcal examnaton ISO 718:007 - Mcrobology of food and anmal feedng stuffs General requrements and gudance for mcrobologcal examnatons ISO/TS 19036:006 - Mcrobology of food and anmal feedng stuffs Gudelnes for the estmaton of measurement uncertanty for quanttatve determnatons ISO/TS 19036:006/Amd Mcrobology of food and anmal feedng stuffs Gudelnes for the estmaton of measurement uncertanty for quanttatve determnatons. Measurement uncertanty for low counts UNI ENV ISO 13843:003. Qualtà dell acqua Guda per la valdazone d metod mcrobologc UNI 10674:00. Acque destnate al consumo umano Guda generale per determnazon mcrobologche ISO 8199:005 Water qualty General gudance on the enumeraton of mcro-organsms by culture DRAFT INTERNATIONAL STANDARD ISO/DIS 901:010 Water qualty The varablty of test results and the uncertanty of measurement of mcrobologcal enumeraton methods D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 53 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 54 REQUISITI TECNICI della norma ISO1705 Asscurazone della qualtà de rsultat d prova (5.9) UNI CEI EN ISO/IEC 1705:005 p.to 5. La Drezone deve asscurare la competenza d coloro che eseguono prove e/o tarature, valutano rsultat e frmano R.d P omsss Il personale deve essere qualfcato sulla base d approprata formazone ed addestramento, esperenza e/o comprovata abltà omsss Deve essere valutata l effcaca delle azon d formazone ed addestramento. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 56 14
15 Qualfca del personale tecnco Mantenmento della qualfca Prove d rpetbltà nello svolgmento delle prove Partecpazone a prove valutatve n crcut nterlaboratoro Valutazone della qualtà delle prestazon analtche (es. G ) Valutazone qualtà del dato analtco Montorare la valdtà delle prove esegute. Regstrare dat n modo che le lnee d tendenza sano rvelabl Eventuale applcazone d tecnche statstche per resamnare rsultat Anals de dat e adozone d msure per correggere eventual problem e prevenre l emssone d dat non corrett D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 57 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 58 Panfcazone del montoraggo VALUTARE L OMOGENEITÀ GENERALE TRA LE DILUIZIONI E TRA LE PIASTRE RIPETUTE Il montoraggo deve essere panfcato e resamnato prevedendo: l utlzzo regolare d materal d rfermento la partecpazone a programm d prove nterlaboratoro la rpetzone d prove Nota. I metod selezonat dovrebbero essere approprat al tpo e al volume delle attvtà svolte. Valutare se le varazon, rspetto a dat attes, sono pù elevate d quelle dovute al caso D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 59 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 60 15
16 UNI ENV ISO 13843:003 p. 5.3 La varazone casuale dovuta alla dstrbuzone non unforme delle partcelle tra campon parallel, persno nelle sospenson perfettamente mscelate, è una caratterstca de metod mcrobologc La varazone casuale d base è nevtable e non ha nente a che fare con le competenze tecnche o l apparecchatura Essa segue una legge matematca nota, la dstrbuzone d Posson Le mperfezon tecnche e molte altre cause sono responsabl della varazone addzonale ( ) denomnata sovradspersone D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 61 UNI ENV ISO 13843:003 p La sovradspersone è un utle msura d affdabltà complessva. Essa può essere rvelata medante gl ndc d dspersone (X, G ). D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 6 INDICE DI DISPERSIONE DI POISSON (UNI ENV ISO 13843:003) c 15 Crtero d accettabltà per n prove replcate d uno stesso campone n c ( = c ) n c X = n 1 c c c n = numero d pastre parallele della dluzone esma Formula equvalente: X (c c ) = = n 1 χp, ν c (n >) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 63 Confrontare con k p c c = c INDICE DI DISPERSIONE DI POISSON (UNI ENV ISO 13843:003 Appendce A3) Un valore X solato è d poca mportanza, specalmente se l numero d pastre parallele (n) è rdotto. S raccomanda d studare un grande numero (almeno 100) d grupp d pastre parallele su un lungo perodo d tempo. I campon dovrebbero rappresentare dverse font e stagon. D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 64 16
17 PROPORZIONALITÀ DEI CONTEGGI Parametro G Costtusce una stma della varanza relatva che comprende tutte le component casual dell ncertezza (dstrbuzone d Posson, effett dell ncertezza de volum e l ncertezza d lettura delle conte) Esprme l grado d proporzonaltà de contegg PROPORZIONALITÀ DEI CONTEGGI G n z = z ln = 1 v n 1 Z Z ln V z = conta delle colone nella -esma pastra d Petr v = volume d sospensone dstrbuta nella -esma pastra (n ml) n = numero d pastre Z = somma d tutte le conte -esme V = somma de volum delle -esme sospenson D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 65 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 66 G - SIGNIFICATO Il valore assunto da G permette d valutare se l operatore abba lavorato n manera accettable e se contegg ottenut alle dstnte dluzon sano da consderars congruent tra loro Tale condzone s ottene se G /n-1 - SIGNIFICATO - Valore atteso nella classca dstrbuzone d Posson G /n-1 1,0 - Presenza d varabltà non mputable alla sola dstrbuzone d Posson G /n-1 > 1,0 G χ p = 0,95, n-1 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 67 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 68 17
18 Calcolo d G tramte Foglo d calcolo MICROINCERT ISO :005 IDF 169-1:005 Latte e dervat del latte Controllo d qualtà ne laborator d Mcrobologa Valutazone della performance degl operator che effettuano l conteggo delle colone D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 69 Montoraggo della valdtà delle prove tramte la valutazone delle prestazon analtche Anals delle tendenze CONTROLLO QUALITA' ANALITICA (per sngolo analsta) STATISTICA DEI GIUDIZI ESPRESSI TRAMITE IL TEST DEL G Numerostà gudz Gudz % TECNICI OK Crtco NC TOT OK % Crtco % NC % Tecnco ,3%,3%,3% Tecnco Tecnco ,6% 1,4% 0,0% Tecnco ,8% 3,1% 3,1% Tecnco ,9% 11,1% 0,0% Tecnco ,0% 0,0% 0,0% Tecnco Tecnco Tecnco CONTROLLO QUALITA' ANALITICA (del laboratoro) Numerostà gudz Gudz % OK Crtco NC TOT OK % Crtco % NC % LABORATORIO ,%,5% 1,3% D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 71 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 7 18
19 ISO :005 IDF 169-:005 Latte e dervat del latte Controllo d qualtà ne laborator d Mcrobologa Valutazone dell affdabltà del conteggo delle colone n pastre parallele e delle dluzon decmal ISO :005 IDF 169-:005 Scopo - Valutare rsultat della enumerazone de m.o. medante la tecnca d conta delle colone - Valutare la capactà d effettuare le dluzon Campo d applcazone - Metod quanttatv (conteggo colone) - Metod con fas d dluzone n base 10 e semna su 1 o pastre parallele per cascuna dluzone Applcazone delle BPL (prerequsto) D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 74 ISO :005 IDF 169-:005!! FREQUENZA DI APPLICAZIONE!! Se metodo gà prevede la semna su pastre: verfca ad ogn prova Se l metodo prevede la semna su 1 pastra: verfca n doppo, ogn 100 campon (par. 5.1) ISO :005 IDF 169-:005 VALUTAZIONE DATI Confronto de valor con dat rportat n Tabella 1 per valutare conte d pastre parallele Conformtà valutata con Probabltà (P) 99% Conta per pastra Somma delle conte Lmte nferore e superore dell ntervallo d fduca D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 75 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 76 19
20 Tab. 1 - Pastre parallele ISO :005 IDF 169-:005 VALUTAZIONE DATI Confronto de valor con dat rportat n Tabella per valutare conte d dluzon Esempo. Conte: 193 e 14 S cerca n Tab. 1 l valore pù alto de due e s controlla che l valore della a pastra sa all nterno dell ntervallo della tabella. In questo caso 14 non è conforme Conformtà valutata con Probabltà (P) 99% Somma della conta delle colone su pastre parallele oppure Conta delle colone da 1 pastra per step d dluzone, confrontat step consecutv d dluzone n base 10 Lmte nferore e superore dell ntervallo d fduca D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 77 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 78 Tab. dluzon n successone ISO :005 IDF 169-:005 Conte su dluzon successve: 151 e 31. S cerca nella tab. l valore della prma dluzone consderata (151). S verfca se l secondo valore è compreso nell ntervallo 6 e 6 rportato nella stessa rga. In questo caso l valore 31 è al d fuor dell ntervallo (non conforme). Prma dl Dluzone successva SUPERAMENTO LIMITI: valutazone Problem tecnc allestmento pastre parallele Problem allestmento dluzon Procedura non attendble (lmt superat n pù d 1/100 cas) necessara una verfca dell applcazone del metodo D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 79 D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 80 0
21 ? In ogn caso graze dell attenzone Dno Spolaor D.Spolaor, A.Maello - Valdazone, Incertezza d msura, Asscurazone qualtà dato analtco 81 1
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